益生菌對舍飼藏雞生產性能和腸道微生物的影響

李龍+李瑜鑫+劉鎖珠

摘要：通過日糧中添加益生菌，研究益生菌對舍飼條件下藏雞生產性能和腸道微生物的影響。試驗選用360羽1日齡雄性藏雞，隨即分為3個處理組，每個處理組6個重復。3個處理組分別為對照組（不含抗生素的基礎日糧）、抗生素組（基礎日糧+金霉素50 mg/kg）、益生菌組（基礎日糧+益生菌109 CFU/kg）。結果顯示，相比于對照組，益生菌處理組和抗生素處理組均能夠顯著提高舍飼藏雞120日齡體質量和平均日增質量（P<0.05），顯著降低飼養期內藏雞的死亡率（P<0.05），并且顯著降低60、120日齡藏雞盲腸中大腸桿菌和沙門氏菌的數量（P<0.05）。益生菌能夠提高藏雞生產性能、降低死亡率，表現出與抗生素相似的促生長效果，這可能與其降低藏雞腸道中病原菌數量有關。

關鍵詞：益生菌；藏雞；舍飼；生產性能

中圖分類號： S831.5 文獻標志碼： A

文章編號：1002-1302（2016）11-0270-02

隨著西藏旅游業的迅速發展，當地對藏雞的需求量也在迅速增加。藏雞主要分布在雅魯藏布江中游和三江源地區。藏雞雖然對西藏高原的特殊環境表現出了良好的適應性，但其生產性能偏低，散養藏雞在6月齡體質量才能夠達到約950 g，遠不能滿足當地對藏雞產品的需要。為了解決這一問題，當地養殖戶開始嘗試對藏雞進行大規模的舍飼，以提高飼養效率，增加藏雞的產量。但為了生產安全的有機無抗肉，提高藏雞肉品質，養殖戶在飼料中并未添加抗生素，這就造成藏雞在舍飼過程中疾病發生率和死亡率過高。

益生菌被認為是1種可能的抗生素替代物。競爭性抑制病原菌、調節免疫機能和增強上皮屏障功能是其發揮益生作用的3個重要機理[1]。目前，已有許多研究表明益生菌能夠提高家禽的生產性能[2-6]，提高營養物質消化率[7]，促進腸道發育[8]和改善腸道微生態[7]。但關于益生菌在藏雞飼養中的應用還未見報道。因此，本試驗的目的是研究益生菌對舍飼藏雞生產性能和盲腸微生物的影響。

1 材料與方法

1.1 菌粉的制備

所用益生菌菌株（J113菌株，植物乳桿菌）是本試驗室前期試驗分離所得。益生菌的發酵和菌粉制備過程按照文獻[9]的方法進行。首先挑取菌株單菌落制備種子液，然后將種子液接種于發酵罐中進一步擴大培養。將發酵罐中擴大培養的菌液離心，收集菌泥，加入保護劑（脫脂奶粉和甘油）混勻，冷凍干燥后研磨成粉狀，取0.1 g菌粉梯度稀釋計數，制備好的菌粉-20 ℃保存備用。

1.2 試驗設計與飼養管理

飼養試驗采用單因素完全隨機設計，選用360羽健康1日齡雄性藏雞，根據初始體質量隨機分為3個處理組，每個處理組設6個重復，每個重復20羽雞，進行120 d的飼養試驗。處理1飼喂不含抗生素的基礎日糧，處理2、處理3分別在基礎日糧中添加金霉素50 mg/kg和J113菌株菌粉1×109 CFU/kg。試驗期飼料全部使用肉雞商品全價配合飼料。

試驗在西藏大學農牧學院教學實習基地進行（當地海拔2 986 m），試驗期內自由采食和飲水。光照程序采用前2周24 h光照，以后為光照23 h，熄燈1 h。按照常規程序進行免疫和消毒。第1周禽舍溫度保持在約30 ℃，從第2周開始逐步緩慢降溫，在飼養期第4周及以后溫度保持在約20 ℃。

1.3 測定指標

1.3.1 生產性能與死亡率

在120 d準確稱取每個重復雞羽的體質量，并統計每個重復雞羽的耗料量和增質量，計算每個重復藏雞的平均日增質量（ADG）、平均日采食量（ADFI）和飼料利用率（FCR）。

1.3.2 盲腸微生物計數

分別在60 d和120 d每個重復組隨機選取1羽接近平均體質量的雞（6羽雞/處理），斷頸處死后，無菌收集一臂盲腸，準確稱取盲腸質量，加入等量滅菌PBS（pH值=7.2），利用勻漿儀進行勻漿處理，勻漿液按照10倍梯度逐級稀釋，平板計數，每個樣品的微生物計數重復3次。

乳酸桿菌、雙歧桿菌、沙門氏菌和大腸桿菌分別利用乳酸菌選擇性培養基（HB0392）、雙歧桿菌BS培養基（HB0394）、沙門氏菌顯色培養基（HB7007-1）和大腸桿菌顯色培養基 （HB7001）進行分離和計數，其中乳酸桿菌和雙歧桿菌在 37 ℃ 培養箱中培養48 h后計數，雙歧桿菌置于厭氧袋中培養，沙門氏菌和大腸桿菌在37 ℃培養箱中培養24 h后計數。所用培養基均購自青島海博生物技術有限公司。活菌數以盲腸（盲腸+盲腸內容物）中細菌個數的對數lg CFU/g來表示。

1.4 統計分析

試驗數據處理采用SPSS 13.0軟件進行方差分析和多重比較，死亡率進行卡方檢驗，以P<0.05判定結果為差異顯著，P<0.01判定結果為差異極顯著。

2 結果與分析

2.1 益生菌對舍飼藏雞生產性能的影響

由表1可見，相比于對照組，抗生素和益生菌處理均顯著提高了舍飼藏雞120日齡體質量和平均日增質量（P<0.05），并顯著降低了飼養期內藏雞的死亡率（P<0.05）。但對藏雞飼料轉化率無顯著影響（P>0.05）。

2.2 益生菌對舍飼藏雞盲腸微生物的影響

由表2可知，相比于對照組，抗生素組和益生菌處理組顯著降低了60、120日齡藏雞盲腸中大腸桿菌和沙門氏菌數量（P<0.05）。益生菌處理組和對照組之間乳酸桿菌和雙歧桿菌數量無顯著差異（P>0.05），但抗生素處理組顯著降低了60、90日齡藏雞盲腸乳酸桿菌數量（P<0.05），并且顯著降低了60日齡藏雞盲腸雙歧桿菌數量（P<0.05）。

3 討論

目前，評價益生菌對家禽生產性能影響的研究不斷增加[10]，其中乳酸菌已經被廣泛地作為生長促進劑在家禽生產中使用。在本試驗中，研究發現飼料中添加益生菌Lactobacillus plantarum J113能顯著提高舍飼藏雞的生產性能，并且具有與抗生素類似的促生長效果，這與之前的部分研究結果一致。Lan等發現在飼料中以菌粉的形式添加106 CFU/kg益生菌L.salivarius改善了肉雞的生產性能，42 d體質量相比于對照組提高了約10.7%[2]。Mutus等以同樣的飼喂方式添加0.1%益生菌（L.salivarius和L.plantarum組成的混合菌）顯著降低了肉雞料肉比[3]。并且還有研究發現飼喂益生菌能夠在肉雞飼養中發揮和卑霉素相同的促生長效果[4]，甚至優于氯四環素[5]和氧四環素[6]的促生長效果。但也有研究表明益生菌對肉雞生產性能沒有影響[11]。然而，對不同的飼養試驗進行直接評價是不科學的，因為許多因素都會影響益生菌的使用效果，如菌種和菌株的不同，菌株的生存能力、添加水平、添加方式、添加頻率，日糧營養水平，肉雞日齡、免疫和飼養環境等因素的不同[10]。

本研究還發現飼料中添加益生菌顯著降低了舍飼藏雞的死亡率。在抗生素禁用的大背景下研究人員發現隨著抗生素的禁用，動物集約化飼養過程中疾病發生率增加[12]，這可能是造成藏雞在高密度舍飼條件下死亡率過高的主要原因。而病原菌是造成家禽疾病發生和死亡的一個重要誘因，本研究發現飼料中添加益生菌顯著降低了舍飼藏雞盲腸中病原菌（沙門氏菌和大腸桿菌）的數量，但對有益菌（乳酸桿菌和雙歧桿菌）的數量無顯著影響，這可能是由于益生菌的添加增加了早期雛雞腸道中有益菌的定植量，從而有效地抑制中后期藏雞腸道中有害菌的定植。而在試驗中后期藏雞腸道有益菌的負載量已經飽和，因此在60、120 d時益生菌處理組和對照組之間有益菌的數量無顯著差異。雖然抗生素處理組同樣降低了舍飼藏雞腸道中有害菌的數量，但是也降低了有益菌的數量。這主要是由于金霉素是一種廣譜類抗生素，對革蘭氏陽性菌（乳酸桿菌和雙歧桿菌）和革蘭氏陰性菌（大腸桿菌和沙門氏菌）都具有較強的抑制作用。益生菌和抗生素提高舍飼藏雞生產性能、減少死亡率可能與其減少藏雞腸道病原菌數量、維持機體健康有關。

本試驗結果表明添加益生菌能夠提高舍飼藏雞的生產性能，減少飼養過程中藏雞的死亡率，并且具有和抗生素類似的效果，這可能與其有效地減少藏雞腸道中病原菌數量有關。

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