β—葡聚糖對江黃顙魚生長性能、血清生化指標的影響

孫紀偉+齊遵利

摘要：為了解β-1，3-葡聚糖添加到配合飼料中對江黃顙魚生長性能、血清生化指標、機能、體成分等重要指標產生的影響，選用初始體重為（1.75±0.01）g的江黃顙魚720尾，隨機分為6組，每組4個重復。1組投喂基礎飼料，5組投喂分別添加200、400、600、800和1 000 mg/kg β-1，3-葡聚糖的試驗飼料，進行42 d的養殖試驗。由試驗結果顯示，各組江黃顙魚之間的增重率（WGR）、特定生長率（SGR）、飼料系數（FC）、成活率（SR）、肥滿度（CF）和肝體比（HSI）差異不顯著（P>0.05）。其中，與對照組相比，添加β-葡聚糖的組實驗前后體重、增重率和特定生長率都有一定程度的增高，在G600達到最高，飼料系數與對照組相比有所下降。飼料中添加β-1，3-葡聚糖對各組江黃顙魚血清總蛋白、尿素膽固醇、甘油三酯、谷丙轉氨酶活性和谷草轉氨酶活性沒有顯著性影響（P>0.05）。其中，與對照組相比，添加組的血清總蛋白含量有所升高（P>0.05），β-葡聚糖添加組血清谷丙轉氨酶和谷草轉氨酶活性有所降低（P>0.05）。結果表明，飼料中添加一定水平β-1，3-葡聚糖對江黃顙魚的生長性能和血清生化指標均沒有顯著影響。造成該結果的原因和機制有待進一步研究。

關鍵詞：江黃顙魚（Pseudobagrus vachelli）；β-葡聚糖；生長性能；血清生化指標

葡聚糖分α-葡聚糖和β-葡聚糖兩種。其中β-葡聚糖是目前使用最廣的一種免疫活性多糖。具有促生長、降血脂、降血糖、免疫調節、抗氧化和保肝等多種生物活性和生理功能[1-2]。酵母來源的β-葡聚糖因其免疫促進作用而廣泛應用于水產動物飼料中。趙紅霞等研究亦表明，在飼料中長期添加250 mg/kg β-1，3-葡聚糖能夠提高凡納濱對蝦的生長性能，促進營養物質代謝[3]。劉棟輝等[4]發現啤酒酵母β-葡聚糖可以顯著提高斑節對蝦（Penaeus monodon）的增重率和存活率。β-葡聚糖也具有一定的免疫增強作用。譚北平等[5]研究亦表明，葡聚糖能夠顯著提高凡納濱對蝦免疫保護力、吞噬指數以及血細胞總數等非特異性免疫指標。體內和體外試驗結果均表明，β-葡聚糖可以增強大西洋鮭（Salmo salar）抗病原感染的能力[6]。上述研究表明，β-葡聚糖作為一種具有免疫刺激作用的生物活性物質，對水產動物的生長和生理功能表現出多方面的作用，是一種研究相對深入、應用廣泛的免疫增強劑[7-10]。目前，關于β-葡聚糖對水產動物的促生長作用機理仍未有明確結論，還有待進一步研究。

江黃顙魚（Pseudobagrus vachelli）別名瓦氏黃顙魚，隸屬于鯰形目、鮠科、黃顙魚屬，分布生活淡水中、底層，雜食性，是一種重要漁業產業結構調整的經濟魚類。當前，針對江黃顙魚的養殖所存在的問題，當務之急是減少化學藥物和抗生素的使用。因此，在疾病防控方面，免疫增強劑的開發和應用成為新的重要方向。本研究以江黃顙魚為實驗對象，主要通過在飼料中添加不同劑量水平的β-1，3-葡聚糖進行試驗，研究β-1，3-葡聚糖對江黃顙魚的生長、血清生化指標產生的影響，以便促進江黃顙魚規?；】叼B殖的發展。

1材料與方法

1.1試驗飼料

在試驗中主要脂肪源用魚油，而蛋白來源則主要用魚粉以及大豆濃縮蛋白，糖源主要通過高筋面粉提供，其基礎飼料組成和營養成分見表1。選用的β-葡聚糖的主鏈為β-1，3結構，純度>90%。在基礎飼料中分別添加β-葡聚糖200、400、600、800、1 000 mg/kg，來進行5組飼料投喂實驗。具體操作過程如下：首先把飼料原料粉碎，之后使用40目篩絹網過篩，然后根據配方準確稱取，最后使用SLX-80型雙螺桿擠壓機制備顆粒飼料，其粒徑大小為1.5 mm，再在55 ℃高溫下將顆粒飼料烘干，之后自然冷卻，最后裝到密封袋，保存在-20 ℃冰箱備用。

1.2試驗用魚的飼養管理

試驗用魚首先需要暫養在室外的水泥池，在暫養期間，對試驗用魚投喂商品飼料，其中不含葡聚糖，日投喂2次。試驗在室內進行，養殖系統包括容積為350 L的玻璃缸，水體體積約為300 L。養殖用水為曝氣的自來水，經珊瑚石、活性炭過濾。實驗開始時，稱量江黃顙魚的體重（1.75±001）g作為初始體重，最終選取720尾，任意分6組，每個組設置4個重復，設置30尾魚為一個重復組。在開始試驗之前，用基礎飼料對其馴養大概1周，待情況穩定之后，實驗開始投喂5種試驗飼料和基礎飼料，投喂的基礎飼料組記作G0（對照組），不間斷投喂量依次為200、400、600、800、1 000 mg/kg的β-葡聚糖飼料組分別記為G200、G400、G600、G800和G1 000。試驗期間定量投喂，日投喂量（以飼料干物質計算）為體重的4%～6%，每天8：30和18：30各投喂一次。試驗過程要求自然光照，同時每天測定溶氧、水溫、pH等并做好管理日志記錄，包括記錄死亡魚尾數以及重量。試驗期間水溫在28～31 ℃之間，鹽度1‰，pH在7.5～8.0之間，氨氮<0.1 mg/L，溶氧>6.0 mg/L。一周換水2次，每次換水量為總體積的1/3。試驗期42天。

1.3樣品的采集及分析

待試驗結束后經過停食24 h，統計每組魚的存活數量，并稱量魚體總重，然后從每組中隨機取15尾魚，采用注射器（1 mL），在魚的尾靜脈抽血，采集到血液之后靜置4 h以上，然后通過4 000 r/min離心機將采集到的血液離心10 min，收集齊上清液并進行分裝來制備血清，在-80 ℃保存備用；采血后解剖，摘取肝臟樣品保存于-80 ℃冰箱中保存待測。

1.4指標分析

特定生長率（SGR），增重率（WGR），飼料系數（FC），肥滿度（CF），成活率（SR），肝體比（HSI）按照以下公式計算：

1.5統計與分析

平均數±標準差（Mean±SD）來表示試驗結果，通過SPSS 17.0 軟件來方差分析，利用Duncans多重比較來進行組間的顯著差異性分析，差異顯著性的水平為P<0.05。

2結果分析

2.1添加β-葡聚糖對江黃顙魚生長的影響

添加β-1，3-葡聚糖組，江黃顙魚的終末體重、增重率和特定生長率以G600為最高，但組間差異不顯著（P>0.05）（如表2）。隨著飼料中β-1，3-葡聚糖添加量的增加，江黃顙魚飼料系數呈上升的趨勢，添加組飼料系數與對照組相比沒有顯著差異（P>0.05），對照組和各添加組之間肥滿度、肝體比無顯著性差異（P>0.05）。

各添加組之間的終末體重、增重率、特定生長率和飼料系數無顯著性差異（P>0.05）。

2.2添加β-葡聚糖對江黃顙魚的血清生化指標的影響

飼料中添加β-葡聚糖對江黃顙魚血清生化指標沒有顯著影響（表3），但添加β-1，3-葡聚糖有升高血清總蛋白含量的趨勢，以及降低尿素、膽固醇的趨勢。血清甘油三酯含量除了G400 和G1 000 組外，其余各添加組也均低于對照組，但組間差異均不顯著（P>0.05）。相比對照組，β-葡聚糖添加組血清谷丙轉氨酶和谷草轉氨酶活性均較低，但組間差異均不顯著（P>0.05）。

3討論

3.1飼料中添加β-葡聚糖對江黃顙魚生長的影響

有學者研究發現，通過在動物飼料中添加一定量的β-1，3-葡聚糖后可促進其生長性能、同時也可提高其成活率、增重率，并且能夠降低其飼料系數[11-13]。在對蝦飼料中添加0.4%的β-葡聚糖時，可以顯著提高南美白對蝦的飼料利用率，降低其飼料成本，同時能夠起到增強食欲、促進生長的作用[14]。譚北平等將β-1，3/1，6-葡聚糖添加到凡納濱對蝦的基礎飼料中，由結果發現可以促進其生長，同時提高其抗病力[5]。吳春玉等[15]在花鱸（Lateolabrax japonicus）的飼料中添加β-1，3-葡聚糖可以顯著提高花鱸的增重率、特定生長率。本試驗結果顯示，飼料中添加β-1，3-葡聚糖使得江黃顙魚的增重率、特定生長率有所提高，其促生長作用與以上學者的研究結果一致。目前，β-葡聚糖作為一種免疫刺激劑，在促進水產動物的生長機能方面的研究相對較多，不過這種促進作用的作用機制目前還不是十分明確。不過多數研究學者一致認為，β-葡聚糖對水產動物并沒有直接的營養促進作用，而是通過免疫調節在促生長方面起到積極作用，其原理是機體的免疫屏障主要通過β-葡聚糖來增強，這樣機體就減少為支持免疫應答而消耗營養物質，水產動物的生長的促進就是通過降低免疫應答中的產物對生長的抑制作用來實現的[16-17]。王銀東等[18]指出β-葡聚糖能夠被消化吸收從而提供能量，主要一直被作為營養物質。不過也有學者研究發現，長期在飼料中添加β-葡聚糖，對水產動物生長作用沒有顯著影響[19-23]。張健等研究發現，凡納濱對蝦飼料中添加β-葡聚糖對其生長的促進作用[24]，可能是主要通過疾病抵抗能力的增強來實現生長的。不過另有研究表明，相比酵母來源的β-葡聚糖組，取自硅藻來源的β-葡聚糖組中養殖實驗大西洋鱈仔魚存活率明顯比較高，因此可以這樣認為β-葡聚糖的來源也可以影響其營養作用的發揮[25]，其原因可能是不同來源的β-葡聚糖在化學結構上的不同對其功效也產生差異影響[6]。雖然β-葡聚糖對水產動物的生長性能的作用研究已經有很多，但是其作用結果卻由于添加劑量[26]、生長階段[27]或飼料配方[28]等不同而表現出差異性。所以，有關β-葡聚糖對江黃顙魚生長性能產生影響的作用和機制的深入研究還有待繼續進行，主要綜合考慮其不同生長階段、差異的飼料營養水平、不一樣的投喂頻率、投喂方式以及β-1，3-葡聚糖的不同來源等各個方面的因素，從而進一步明確江黃顙魚健康養殖中β-葡聚糖的應用。

3.2飼料中添加不同水平 β-葡聚糖對江黃顙魚血清生化指標的作用

血清生化指標的作用主要反映機體物質代謝以及某些組織器官的不斷變化，一般作為評價魚體健康和營養狀況的重要指標。在血清中的蛋白質主要作用是維持滲透壓，其含量的變化主要與機體的生理機能有密切關系，可以準確反應動物的健康狀況，具有一定免疫功能。

相對于對照組，各添加組江黃顙魚膽固醇含量較低，其中血清甘油三酯含量除了G400 和G1000 組外，其他各添加組也低于對照組，這樣的結果與孫立威等[29]在殼聚糖對吉富羅非魚（Oreochromis niloticus）的作用影響中得到印證，血清中甘油三酯和膽固醇的變化情況可反映機體脂質代謝功能。由此說明，β-葡聚糖具有降血脂的功效。

實驗結果顯示，在飼料中添加一定量的β-1，3-葡聚糖對降低江黃顙魚血清中的谷丙轉氨酶活性有一定作用，但是各實驗組之間并無顯著性差異，對于β-1，3-葡聚糖在血清谷丙轉氨酶活性方面的作用機制還需要進一步加強研究。機體中轉氨酶含量升高是肝細胞損傷的標志，因此轉氨酶是反映肝功能的重要指標。本研究中我們可以看出，在實驗魚飼料中添加一定量β-葡聚糖可以達到促使血清中谷丙轉氨酶和谷草轉氨酶活性降低的作用，但是并沒有呈現顯著效果，因此可以表明β-葡聚糖對肝臟的保護有一定作用，這樣的實驗結果，與葡聚糖對鱸魚[23]、酵母細胞壁免疫多糖在草魚等的研究結果是一致的[30]。不過Mahmoud等對海鯛（Pagellus erythrinus）的研究結果也表明[31]，β-葡聚糖對血清中谷草轉氨酶、谷丙轉氨酶及尿素等機體指標并無顯著影響。有學者的研究結果顯示，寡糖-中草藥復合物對魚體的谷丙轉氨酶活性的降低有一定作用[32]。賀國龍等把酵母細胞壁免疫多糖添加到飼料中可以降低草魚（Ctenopharyngodon idellus）血清中谷丙轉氨酶活性[33]。出現上述不同結果的原因以及β-葡聚糖對江黃顙魚血清生化指標的影響尚需更加深入的研究。

參考文獻：

[1]

李萬坤，聞洪斌，才學鵬，等.β-葡聚糖的免疫增強作用機理的研究進展[J].中國畜牧獸醫，2007， 34（5）：151-155

[2] 曹敏，陳軍，王元春，等.葡聚糖的研究進展[J].廣西輕工業，2011（4）：17-20

[3] 趙紅霞，曹俊明，王安利，等.飼料中長期添加β-1，3-葡聚糖對凡納濱對蝦生長性能、體成分和生化指標的影響[J].動物營養學報.2010（05）：1464-1470

[4] 劉棟輝，陽會軍，劉永堅.β-葡聚糖和維生素C對斑節對蝦生長和抗病力的效果[J].中山大學學報（自然科學版）.2002（04）：59-62（下轉第15頁）

[5] 譚北平，周歧存，鄭石軒，等.β-1，3/1，6-葡聚糖制劑對凡納對蝦生長及免疫力的影響[J].高技術通訊，2004，14（5）：73-77

[6] 蔡成崗，蔣新龍，蔣昌海.β-葡聚糖結構、功能與開發研究進展[J].農產品加工：學刊，2011（9）：114-117

[7] 艾慶輝，麥康森.魚類營養免疫研究進展[J].水生生物學報，2007，31（3）：425-430

[8] 安尚澤，汪巖，王雷，等.β-葡聚糖對仔豬生長性能和腸道黏膜形態的影響[J].延邊大學農學學報，2012，1：125-131

[9] 蔡成崗，蔣新龍，蔣昌海.β-葡聚糖結構、功能與開發研究進展[J].農產品加工：學刊，2011（9）：114-117

[10] 陳復生，左錦靜，姚永志.大孔樹脂吸附和分離陳皮中黃酮類化合物的研究[J].食品科技，2006（7）：121-124

[11] Guttvik A，Paulsen B，Dalmo R A，Espelid S，Lund V，Bgwald J.Oral administration of Lipopolysaccharide to Atlantic salmon （Salmo salar L.） fry.Uptake，distribution，Influence on growth and immune stimulation[J].Aquaculture，2002，214（1-4）：35-53

[12] López N，Cuzon G，Gaxiola G，Taboada G，Valenzuela M，Pascual C，Sánchez A，Rosas C.Physiological，nutritional and immunological role of dietary β-1，3-glucan and ascorbic acid 2-monophosphate in Litopenaeus vannamei juveniles[J].Aquaculture，2003，224（1-4）：223-243

[13] 王計剛，曹俊明，趙紅霞，等.β-1，3-葡聚糖對凡納濱對蝦生長性能的影響[J].現代漁業信息，2008，23（6）：3-5，25

[14] 陳云波，周洪琪，華雪銘，等.飼料中添加β-葡聚糖對南美白對蝦的生長、存活及飼料系數的影響[J].淡水漁業，2002，32（5）：55-56

[15] 吳春玉.β-葡聚糖對花鱸生長、免疫和抗氧化功能的影響[D].華中農業大學，2014

[16] 張華，方熱軍.β-葡聚糖對動物的免疫增強和促生長作用及其機理[J].湖南飼料，2009（4）：29-31

[17] 譚崇桂，冷向軍，李小勤，等.多糖、寡糖、蛋白酶對凡納濱對蝦生長、消化酶活性及血清非特異性免疫的影響[J].上海海洋大學學報，2013，22（1）：93-99

[18] 王銀東，張欣欣，吳世林.β-葡聚糖在水產動物中的應用[J].飼料博覽（技術版）.2008（05）：33-35

[19] 許國煥，吳月嫦，陶家發.兩種多聚糖對彭澤鯽生長影響及免疫促進作用的初步研究[J].水利漁業，2002，22（4）：49-51

[20] 余水法，蔡春芳，宋學宏，葉元土，崔益軍，強曉亮.β-葡聚糖對河蟹免疫功能的影響[J].中國飼料，2006，5：20-22

[21] 季高華，劉至治，冷向軍.飼料中添加 β-葡聚糖和低聚果糖對中華鱉幼鱉生長和血清SOD、溶菌酶活力的影響[J].上海水產大學學報，2004，13（1）：36-40

[22] 李富東，葉繼丹，王琨，孫云章，凌澤春，王子甲.長時間連續投喂β-葡聚糖對鯉生長性能及非特異性免疫功能的影響[J].動物營養學報，2009，21（4）：499-505

[23] Ye J D，Wang K，Li F D，et al.Effects of Long-Term Dietary Administration of β -glucan on Tissue Enzyme Activity and Disease Resistance in Common Carp，Cyprinus carpio[J].The Israeli Journal of Aquaculture，2011：1-6

[24] 張健.免疫增強劑對凡納濱對蝦幼蝦生長、免疫及抗應激的影響[D].廣州：中山大學，2012：2-7

[25] Skjermo J，Storsseth T R，Hansen K，Hand A，ie G.Evaluation of β-（1→3，l→6）-glucans and high-M alginate used as immunostimu latory dietary supplement during first feeding and weaning of Atlantic cod （Gadus morhua L.） [J].Aquaculture，2006，261（3）：1088-1101

[26] Sang H M，Fotedar R.Effects of dietary β-1，3-glucan on the growth，survival，physiological and immune response of marron，Cherax tenuimanus （smith，1912）[J].Fish & Shellfish Immunology，2010，28（5-6）：957-960

[27] 李富東，葉繼丹，王琨，等.長時間連續投喂β-葡聚糖對鯉生長性能及非特異性免疫功能的影響[J].動物營養學報.2009（04）：499-505

[28] 劉立鶴，鄭石軒，譚斌，等.不同飼料配方下β-葡聚糖對凡納濱對蝦生長性能、非特異性免疫力的影響及成本分析[J].飼料工業.2005（08）：26-30

[29] 孫立威，文華，蔣明，等.殼寡糖對吉富羅非魚幼魚生長性能、非特異性免疫及血液學指標的影響[J].廣東海洋大學學報，2011，31（3）：43-49

[30] 賀國龍，劉立鶴，樂義詳，等.酵母細胞壁免疫多糖對草魚免疫功能的影響[J].糧食與飼料工業.2010（07）：43-45

[31] Mahmoud A.O.D，S K，Manabu I ，et al.Interaction effects of dietary supplementation of heat-killed Lactobacillus plantarum and β-glucan on growth performance，digestibility and immune response of juvenilered sea bream，Pagrus major[J].Fish & Shellfish Immunology，2015：1-10

[32] 周傳朋，劉波，王廣宇，等.寡糖-中草藥復合物和黃霉素對異育銀鯽生長、免疫及抗病力的影響[J].淡水漁業.2009（03）：46-51

[33] 賀國龍，劉立鶴，樂義詳，等.酵母細胞壁免疫多糖對草魚免疫功能的影響[J].糧食與飼料工業.2010（07）：43-45

（收稿日期：2016-11-04）