HNP 1-3在新生兒敗血癥診斷中的價值

朱銀燕 方妍彤 王曉芳 華春珍

HNP 1-3在新生兒敗血癥診斷中的價值

朱銀燕 方妍彤 王曉芳 華春珍

目的 探討人中性粒細胞多肽1-3（HNP 1-3）在新生兒敗血癥診斷中的價值。方法 新生兒敗血癥患兒105例，在入院初期（急性期）及恢復期（有效抗生素治療10d左右）行外周血血漿HNP 1-3和超敏C-反應蛋白（hs-CRP）測定，取同期出生的新生兒30例作為對照組，一次性采血測定HNP 1-3和hs-CRP。結果 新生兒敗血癥急性期組血漿HNP1-3、hs-CRP水平顯著高于恢復期組和對照組（P＜0.01），新生兒敗血癥急性期組血漿HNP1-3水平與hs-CRP水平呈中度正相關關系（r=0.450，P＜0.05）。結論 新生兒敗血癥患兒外周血漿HNP 1-3水平明顯高于健康新生兒，與hs-CRP呈正相關，HNP 1-3對新生兒敗血癥早期診斷有一定的臨床價值。

新生兒 敗血癥 HNP 1-3 hs-CRP

新生兒敗血癥是新生兒期最常見的疾病之一，尤其以早產兒、低體重兒和早期新生兒更為常見。新生兒敗血癥發病隱匿，以及臨床癥狀不典型性，早期診治是有效治療的前提。血培養是新生兒敗血癥診斷的金標準，但陽性率低、培養費時又滯后，不利于早期診斷。人中性粒細胞多肽1-3（HNP 1-3）是中性粒細胞內嗜天青顆粒中的主要成分，起直接殺菌作用，而生理情況血漿中濃度較低，但當急性感染時可以向細胞外分泌量大幅度提高［1］。本文通過觀察新生兒敗血癥HNP 1-3的變化，并與超敏C-反應蛋白（hs-CRP）進行比較分析，為臨床早期診斷新生兒敗血癥提供依據。

1 臨床資料

1.1 一般資料 選擇2013年6月至2014年9月在杭州師范大學附屬醫院因敗血癥入院治療的患兒105例。其中男55例，女50例；胎齡37～42周；體重2250～4000g，入院時日齡2～11d。根據患兒血培養結果和臨床表現診斷新生兒敗血癥［2］，入選者均排除自身免疫性疾病和血液系統疾病，所有入選者入院前均未接受抗感染治療。另選擇同期在本院婦產科出生的健康新生兒30例作為對照組，其中男18例，女12例；胎齡37～42周；體重2250～4000g，入院時日齡2～11d。各組新生兒性別、胎齡、體重、日齡差異無統計學意義（P＞0.05）。

1.2 材料和試劑 HNP1-3試劑盒由荷蘭HycultBiotch公司提供；酶標儀為美國Molecular Devices公司產品；hs-CRP檢測采用美國BECKMAN公司的全自動免疫分析儀及配套試劑。

1.3 檢測方法 新生兒敗血癥患兒在入院初及恢復期抽取全血標本各1ml，以EDTA抗凝，靜置15min后4℃低溫低速離心，分離血漿200μl并分裝2管，置-80℃冰箱保存待用。將-80℃保存的血漿標本室溫復融并混勻，以ELISA法測定HNP1-3；以免疫比濁法測定hs-CRP，在抗生素有效治療第10天左右的恢復期，再次同上測定血漿HNP1-3和hs-CRP。

1.4 統計學方法 采用SPSS 17.0統計軟件。對不符合正態分布的計量資料，采用非參數檢驗，以中位數與四分位數M（P25，P75）表示。計數資料采用χ2檢驗，變量間的相關關系采用Pearson法作相關分析。P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 新生兒敗血癥急性期組與對照組及恢復期組血漿HNP1-3、hs-CRP比較 見表1。

表1 各組HNP1-3和hs-CRP水平比較［M（P25，P75）］

2.2 急性期組外周血血漿HNP1-3水平與hs-CRP水平相關關系 急性期外周血血漿HNP1-3水平與hs-CRP水平呈中度正相關關系（r=0.450，P＜0.05）。

3 討論

人HNP 1-3主要存在于中性粒細胞的嗜天青顆粒中，細胞內的HNP 1-3是人體天然免疫的重要組分，直接發揮抗多種細菌、病毒、真菌等病原體感染，其抗感染作用強弱與胞內HNP 1-3濃度正相關［3］。機體在正常情況下血漿中HNP 1-3含量甚微，但當急性感染時其含量大幅度增加，并可導致機體組織、細胞損傷。HNP 1-3作為一類抗菌肽，可殺傷多種病原微生物，大部分為細菌感染［4-5］。由于HNP 1-3主要從中性粒細胞中釋放，標本采集后應及時分離血漿和白細胞，如果操作不當，導致白細胞破壞，都有可能導致血漿HNP 1-3水平明顯升高，影響實驗結果。因此采集標本后經EDTA抗凝，應及時冰浴靜置和低溫離心，減少破壞白細胞的目的。國外研究報道顯示細菌性腦膜炎和新生兒敗血癥患者血漿HNP 1-3水平明顯高于健康對照組［1］，Ihi等學者研究也發現感染性疾病患者的血漿HNP 1-3水平明顯高于健康對照組［6］。本資料結果顯示，新生兒敗血癥急性期組血漿HNP 1-3水平明顯高于對照組，說明HNP 1-3與新生兒敗血癥有一定關系，提示HNP 1-3參與了機體的抗感染作用。有研究報道顯示HNP 1-3可通過與抗原結合，抑制病原菌在黏膜上皮細胞粘附增值，增強病原抗原的免疫原性，促進抗原遞呈細胞的遞呈加工而發揮抗感染作用。本資料中新生兒敗血癥恢復期組HNP 1-3水平較急性期組明顯下降，但仍稍高于對照組，表明隨著病情的穩定好轉，新生兒敗血癥HNP 1-3水平表達顯著下降，但降至正常仍需一段時間。

hs-CRP作為CRP超敏感的檢測方法，對血液中低濃度時的CRP比較敏感。本資料結果顯示新生兒敗血癥急性期外周血血漿HNP 1-3水平與hc-CRP水平呈中度正相關關系，顯示HNP 1-3可作為診斷新生兒敗血癥患兒的輔助指標。

綜上所述，HNP 1-3可為新生兒敗血癥患兒早期診斷提供依據，有較高的臨床價值。本研究還存在一定的局限性，收集的病例數尚少，結論僅有一定的參考價值，希望對臨床有所幫助。

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Objective To explore the neutrophil peptide 1-3（HNP 1-3）value in the diagnosis of neonatal sepsis. Methods Neonatal sepsis in children with 105 cases，in the early admission（acute phase）and recovery（effective antibiotics around 10 d）line of peripheral blood plasma HNP 1-3 and allergic C-reactive protein（hs-CRP），30 cases of newborns in the same period wereas control group，blood smaple were collected once for the determination of blood HNP 1-3 and hs-CRP. Results During acute phase, plasma HNP 1-3，hs-CRP level in neonataleonatal sepsis group acute phase plasma HNP 1-3，hs-CRP level is significantly higher than treatment group and control group（P＜0.01），neonatal sepsis，acute phase plasma HNP of 1-3 and hs-CRP levels in moderate positive correlation（r=0.450，P＜0.05）.Conclusions Neonat-alsepsis in children with peripheral blood plasma HNP 1-3 level is significantly higher than that of healthy newborn，positively correlated with hs-CRP，HNP 1-3 of neonatal sepsis in early diagnosis has certain clinical value.

Neonatal Sepsis Human neutrophil peptides C-reactive protein

浙江省醫藥衛生科技項目（2012KYA155）；杭州市衛生科技項目（H201201）

310012 杭州師范大學附屬醫院（朱銀燕 方妍彤 王

曉芳）

310006 浙江大學附屬兒童醫院（華春珍）