東北地區(qū)鹿源大腸桿菌耐藥性的檢測

薛 原 ， 王曉菲 ， 劉偉石

(東北林業(yè)大學野生動物資源學院 ， 黑龍江哈爾濱150040)

東北地區(qū)鹿源大腸桿菌耐藥性的檢測

薛 原 ， 王曉菲 ， 劉偉石

(東北林業(yè)大學野生動物資源學院 ， 黑龍江哈爾濱150040)

對東北地區(qū)鹿源大腸桿菌進行分離培養(yǎng)，開展耐藥性調(diào)查。采用紙片擴散法測定各分離菌株對22種抗生素的敏感性。結(jié)果表明：鹿源大腸桿菌各分離株對各種抗生素的敏感性不同。對氨芐西林、頭孢噻吩、四環(huán)素和強力霉素的耐藥率均在60%以上，對氨曲南和亞胺培南敏感率均在90%以上。

大腸桿菌 ； 耐藥性 ； 藥敏試驗

鹿科動物是最有經(jīng)濟價值的動物種群之一。中國是世界上鹿類資源最豐富的國家之一。隨著抗菌藥物在臨床上的普遍應(yīng)用，加上使用不規(guī)范或使用方法不當，使得耐藥性菌株不斷出現(xiàn)，對鹿源大腸桿菌進行耐藥性的檢測具有重要意義。國內(nèi)外對家畜家禽的耐藥性報道有很多,但對鹿源大腸桿菌的耐藥性研究卻很少[1-2]。本試驗以東北地區(qū)鹿源大腸桿菌為研究對象，進行了耐藥性的分析，掌握其大腸桿菌流行情況，旨在為抗菌藥物的正確使用和控制耐藥性提供重要的科學依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 菌株 藥敏質(zhì)控菌株大腸桿菌ATCC 25922，購自中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所。試驗用大腸桿菌于2015年6～12月從黑龍江、吉林、遼寧的鹿養(yǎng)殖場分離大腸桿菌150株。分離菌株用于藥敏試驗。

1.1.2 培養(yǎng)基 杭州天和微生物試劑有限公司生產(chǎn)，批號151023 ： 普通瓊脂和水解酪蛋白瓊脂培養(yǎng)基(Mueller-Hinton,MH)。

1.1.3 藥敏紙片 共22種藥敏片，均購自杭州天和微生物試劑有限公司和OXIOD公司。包括β-內(nèi)酰胺類：阿莫西林/克拉維酸鉀(AMC)、阿莫西林(AMX)、氨芐西林(AMP)、氨曲南(ATM)、頭孢他啶(CAZ)、頭孢噻吩(KF)、亞胺培南(IPM)；氨基糖苷類：阿米卡星(AK)、慶大霉素(CN)、卡那霉素(K)、新霉素(NEO)、安普霉素(APR)；喹諾酮類： 諾氟沙星(NOR)、恩諾沙星(ENR)、環(huán)丙沙星(CIP)、氧氟沙星(OFX)；四環(huán)素類：強力霉素(DO)、四環(huán)素(TE)；磺胺類：復(fù)方新諾明(SXT)；氯霉素類：氯霉素(C)、氟苯尼考(FFC)；多肽類：多黏菌素B(PB)。

1.2 方法

1.2.1 藥敏試驗 采用WHO推薦的Kirby-Bauer法[3]。依據(jù)CLSI有關(guān)標準，只有當質(zhì)控菌株的抑菌圈直徑在允許范圍內(nèi)測試菌株結(jié)果才有效。

1.2.2 判定標準 按抗菌藥物敏感性試驗擴散法標準[4]判定各菌株的敏感度，對所分離的細菌進行藥敏試驗。以敏感(Susceptible)、中介(Intermediate)、耐藥(Resistant)3種形式對抑菌圈大小作出判定。

2 結(jié)果

2.1 大腸桿菌的耐藥性 150株鹿源大腸桿菌均可產(chǎn)生耐藥性。對氨芐西林、頭孢噻吩、四環(huán)素和強力霉素的耐藥率均在60%以上，對氨曲南和亞胺培南敏感率均在90%以上

2.2 大腸桿菌的多重耐藥性 150株受試鹿源大腸桿菌對22種抗菌藥物均存在耐藥性。4耐菌株所占比例最大為22%。分離菌株存在耐藥現(xiàn)象，最少為1種，最多為13種(見圖2)。

3 討論

隨著抗菌藥物的廣泛應(yīng)用，在抗菌藥物的選擇壓力下，細菌不斷發(fā)生耐藥性變異。目前我國畜禽大腸桿菌耐藥性嚴重而復(fù)雜，對大多數(shù)抗菌藥物都已經(jīng)產(chǎn)生了耐藥性。閉興明報道[2]，鹿源致病性大腸桿菌對抗生素的耐藥性以多重耐藥為主。這與規(guī)?；箞鲇捎诩膊〉膲毫Χ罅渴褂每股?， 細菌的耐藥性通過染色體或質(zhì)粒介導(dǎo)在細菌間傳播和擴散有關(guān)。

受試鹿源大腸桿菌對試驗所采用的22種抗生素均有不同程度耐藥性。其中最少的耐藥1種，最多的耐藥13種。150株耐藥大腸桿菌中耐4種抗生素的占22%。對氨芐西林、頭孢噻吩、四環(huán)素和強力霉素的耐藥率較高。這與梅妹等報道相似[1]。2002 年中國已經(jīng)禁止氯霉素用于食品動物，但是值得注意的是仍有19.46%的檢測菌株對氯霉素耐藥，這個耐藥表型的流行可能與攜帶cmlA基因的質(zhì)粒廣泛傳播有關(guān)[5]。受試大腸桿菌對亞胺培南敏感性相對較高，敏感比例達到99.3%。在動物飼養(yǎng)過程中抗生素的不規(guī)范使用或濫用，從而導(dǎo)致大腸桿菌的多重耐藥，這將會對人畜大腸桿菌病的控制產(chǎn)生不利影響，應(yīng)引起高度重視。為控制耐藥性大腸桿菌的發(fā)展，應(yīng)加強對其耐藥性監(jiān)測力度。

[1] 梅妹,范君文,鄧旭明,等.長春地區(qū)鹿源性大腸桿菌的分離鑒定和耐藥性分析[J]. 中國農(nóng)學通報，2008,24(8 ):11-16.

[2] 閉興明 ,飄周,白春蘭,等. 中國鹿源性大腸桿菌的耐藥性監(jiān)測及血清定型[J]. 云南畜牧獸醫(yī)，2008,1:8-10.

[3] Khan A , Dass C , Ramamurthy T ,etal. Antibiotic resistance ,virulence gene , and molecular profiles of Shiga toxin producingEscherichiacoliisolates from diverse sources in calcutta [J ] .India J Clin Microbiol , 2002 , 40 (6) : 2009-2015.

[4] Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI).Performance standards for antimicrobial susceptibility testing[C] 16th informational supplement.Document M100-S16 , Wayne ,PA :CLSI, 2009:15-19 .

[5] Schroeder C M, Zhao C, DebRoy C,etal. Antimicrobial resistance of Escherichia coli O157 isolated from humans, cattle, swine,and food. Appl. Environ[J]. Microbiol,2002,68(2):576-581.

2016-01-18

國家自然科學基金(31502119)；黑龍江省博士后科研啟動金(LBH-Q14002)；中央高?；究蒲袠I(yè)務(wù)費(2572015CA21)

薛原(1978—)，女，講師，博士，主要從事細菌耐藥性方面的研究.E-mail:xueyuan-1978@163.com

S852.61

B

0529-6005(2017)02-0084-02