巨噬細(xì)胞移動抑制因子、糖類抗原125及血管內(nèi)皮生長因子在子宮內(nèi)膜異位癥患者血清中的表達(dá)及臨床意義

王軍玲 朱濤

子宮內(nèi)膜異位癥(endometriosis,EMs)是常見于育齡期婦女的一種慢性疾病，病理特征為子宮內(nèi)膜樣組織在子宮外其他部位出現(xiàn)，具有侵襲能力強大、治療后復(fù)發(fā)率高等特點，對患者生育功能及生活質(zhì)量均造成不利影響。此疾病目前發(fā)病機制仍未研究清晰，其發(fā)生、發(fā)展過程與新生血管組織形成、炎性感染反應(yīng)、免疫系統(tǒng)功能紊亂等有一定相關(guān)性。巨噬細(xì)胞移動抑制因子(macrophage migration inhibitory factor,MMIF)是一種多功能的細(xì)胞因子，主要限制巨噬細(xì)胞的移動和增加病灶內(nèi)巨噬細(xì)胞的濃度，促進(jìn)巨噬細(xì)胞分泌多種細(xì)胞因子，促進(jìn)局部的炎癥反應(yīng)[1]。糖類抗原125(carbohydrate antigen 125,CA125)是目前最常用的卵巢上皮樣腫瘤標(biāo)志物，在盆腔感染性疾病、子宮肌瘤、妊娠等時出現(xiàn)升高[2]。血管內(nèi)皮生長因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)具有誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞增殖、增加血管通透性的生理活性，在子宮新生血管形成過程中發(fā)揮重要作用[3]。近些年的研究發(fā)現(xiàn)EMs患者血清MMIF、CA125及VEGF表達(dá)水平與正常育齡期婦女比較存在顯著差異性，因此，本文擬觀察其在EMs患者血清中的表達(dá)，并探討其臨床意義。

資料與方法

1.臨床資料：選擇本院婦產(chǎn)科2014年2月至2016年10月期間住院行腹腔鏡治療的60例EMs患者作為研究對象(EMs組)，經(jīng)病理組織檢查均已確診，且除外合并有子宮其他疾病，心肝腎等重要臟器功能障礙、近期使用激素類藥物治療及嚴(yán)重炎癥感染反應(yīng)者。EMs患者平均年齡為(34.2±7.5)歲，體重指數(shù)(BMI)為(24.4±4.2) kg/m2，月經(jīng)周期為(28.2±3.4) d；同期選擇40例門診健康體檢的育齡期婦女作為對照組，平均年齡為(33.8±7.1)歲，BMI為(24.5±4.0) kg/m2，月經(jīng)周期為(28.3±3.5) d。兩組在性別、BMI、月經(jīng)周期等方面比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義，所有患者及健康體檢者均簽署知情同意書，本研究方案已通過本院倫理委員會批準(zhǔn)。

2.分組：根據(jù)美國生殖協(xié)會分期標(biāo)準(zhǔn)(R-AFS)[4]將60例EMs患者分為Ⅰ期(n=15例)、Ⅱ期(n=16例)、Ⅲ期(n=16例)和Ⅳ期(n=13例)；根據(jù)痛經(jīng)評分標(biāo)準(zhǔn)[5]分為輕度(10～14分，n=18例)、中度(16～24分，n=21例)和重度(26～30分，n=21例)。

3.血清MMIF、CA125及VEGF表達(dá)水平檢測：所有EMs患者入院后第1天清晨，健康體檢者則在門診體檢時，抽取肘外周靜脈血液5 ml，在3 500 r/min離心機轉(zhuǎn)速下離心處理10 min，吸取上層血清置于-20℃冰箱中留存待測，采用酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)法檢測各組血清MMIF、CA125及VEGF表達(dá)水平，試劑盒購自北京中山生物技術(shù)有限公司，由專人根據(jù)試劑盒說明書步驟進(jìn)行檢測。

4.統(tǒng)計學(xué)處理：數(shù)據(jù)均采用SPSS16.0統(tǒng)計學(xué)軟件予以分析，計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，多組間比較采用方差分析，兩組間比較采用t檢驗，檢驗水準(zhǔn)α=0.05。

結(jié)果

1.兩組血清MMIF、CA125及VEGF表達(dá)水平比較：EMs組血清MMIF、CA125及VEGF表達(dá)水平均明顯高于對照組，組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義。見表1。

表1 兩組血清MMIF、CA125及VEGF表達(dá)水平比較

注：與對照組比較，*P<0.05

2.EMs組不同R-AFS分期血清MMIF、CA125及VEGF表達(dá)水平比較：隨著R-AFS分期逐漸升高，EMs組血清MMIF、CA125及VEGF表達(dá)水平呈逐漸升高趨勢(P<0.05)，見表2。

表2EMs組不同R-AFS分期血清MMIF、CA125及VEGF表達(dá)水平比較

R?AFS分期例數(shù)MMIF(ng/ml)CA125(U/ml)VEGF(pg/ml)Ⅰ期Ⅱ期Ⅲ期Ⅳ期151616131 2±0 21 8±0 3?2 3±0 4?#2 7±0 5?#△30 1±6 235 9±6 6?41 1±7 6?#46 4±8 8?#△351 2±60 4402 4±71 5?456 6±80 2?#512 7±91 2?#△

注：與Ⅰ期比較，*P<0.05；與Ⅱ期比較，#P<0.05；與Ⅲ期比較，△P<0.05

3.EMs組不同痛經(jīng)嚴(yán)重程度血清MMIF、CA125及VEGF表達(dá)水平比較：隨著痛經(jīng)嚴(yán)重程度逐漸加重，EMs組血清MMIF、CA125及VEGF表達(dá)水平呈明顯升高趨勢(P<0.05)，見表3。

表3EMs組不同痛經(jīng)嚴(yán)重程度血清MMIF、CA125及VEGF表達(dá)水平比較

痛經(jīng)程度例數(shù)MMIF(ng/ml)CA125(U/ml)VEGF(pg/ml)輕度中度重度1821211 5±0 32 1±0 3?2 5±0 4?#34 2±6 439 5±6 9?44 8±7 9?#386 4±68 6437 5±77 4?489 4±85 7?#

注：與輕度比較，*P<0.05；與中度比較，#P<0.05。

討論

目前，多數(shù)研究人員認(rèn)為，EMs主要是子宮內(nèi)膜樣組織和間質(zhì)細(xì)胞隨著血液循環(huán)系統(tǒng)出現(xiàn)逆流現(xiàn)象，進(jìn)而種植在卵巢或附件的盆腔腹膜組織上，并呈逐漸蔓延性增殖生長[6]。這些異位生長的子宮內(nèi)膜組織可刺激作用于腹膜組織，進(jìn)而導(dǎo)致巨噬細(xì)胞生物活性功能顯著性增強，大量合成和釋放炎癥細(xì)胞因子，而MMIF為其中重要的細(xì)胞因子[7]。相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)[8]，MMIF可明顯增強基質(zhì)金屬蛋白酶分解細(xì)胞外基質(zhì)的生理學(xué)功能，進(jìn)而有助于子宮內(nèi)膜細(xì)胞順利的侵襲和定植生長。還有研究證實[9]，MMIF可明顯增強血管組織生長相關(guān)基因的表達(dá)水平，進(jìn)而顯著性促進(jìn)新生血管組織的形成，此外還可抑制p53基因的表達(dá)水平，進(jìn)而起到阻止異位子宮內(nèi)膜細(xì)胞發(fā)生凋亡。

CA125則是一種糖蛋白表面抗原，主要分布于各種膜間皮細(xì)胞、苗氏管表面及婦科腫瘤細(xì)胞中，在血清中可檢測出較高水平表達(dá)[4]。血清CA125表達(dá)水平顯著性升高，主要為富含CA125組織出現(xiàn)異常增殖及生長所引起，臨床上常作為診斷婦科腫瘤的實驗室指標(biāo)。近些年研究發(fā)現(xiàn)[5]，EMs血清CA125表達(dá)水平明顯高于正常育齡期婦女，在診斷EMs方面也具有一定的價值。

異位子宮內(nèi)膜組織出現(xiàn)黏附和侵襲等惡性行為與新生血管組織形成之間存在密切的聯(lián)系，而VEGF是目前已知生物學(xué)功能最強大的促血管形成細(xì)胞因子，可顯著性增強微血管組織的通透性程度，進(jìn)而誘導(dǎo)血管內(nèi)皮細(xì)胞和新生血管組織的形成[10]。近些年研究證實[11]，EMs患者血清及內(nèi)膜組織中VEGF表達(dá)水平顯著性升高，后者可有效促進(jìn)異位內(nèi)膜病灶組織中新生血管形成，進(jìn)而呈充血病理狀態(tài)，最終出現(xiàn)月經(jīng)量過多，腹部疼痛不適等臨床癥狀及體征。

本研究顯示，EMs組患者不但血清MMIF、CA125及VEGF表達(dá)水平明顯高于對照組(P<0.05)，且其表達(dá)水平與R-AFS分期升高和痛經(jīng)嚴(yán)重程度加重有關(guān)，呈明顯升高趨勢。由此可知，血清MMIF、CA125及VEGF表達(dá)水平可作為EMs診斷、分期及痛經(jīng)嚴(yán)重程度評估的實驗室指標(biāo)。本研究不足之處在于病例數(shù)相對較少，還需將來增加大樣本量深入研究以探討其作用機制。

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