腦卒中患者血清可溶性CD14、同型半胱氨酸和7項血脂結果分析

張韶斌 陳斯亮 羅莞超 韋慶文 羅丹

腦卒中患者血清可溶性CD14、同型半胱氨酸和7項血脂結果分析

張韶斌★陳斯亮 羅莞超 韋慶文 羅丹

目的探討血清中可溶性CD14（sCD14）、同型半胱氨酸（HCY）和7項血脂指標與腦卒中的相關性。方法采用ELISA法檢測195例腦卒中患者及120例健康對照組血清sCD14；使用羅氏C7O2全自動生化分析儀檢測195例腦卒中患者及120例健康對照組血清HCY和7項血脂，并對檢測結果進行分析。結果腦卒中患者中sCD14、HCY、TG、CHOL、HDL、LDL?C、Apo A、Apo B、LP（a）含量分別為（79.98±36.67）μg/mL、（20.78±17.98）μmol/L、（1.48±0.78）mmol/L、（5.19±0.93）mmol/L、（1.15±0.31）mmol/L、（2.62±0.83）mmol/L、（1.34±0.26）g/L、（0.97±0.76）g/L、（188.07±167.68）mg/L；腦卒中患者血清sCD14、HCY、TG、CHOL、LDL?C含量明顯升高，與健康對照組比較，差異具有統計學意義（P＜0.05），而腦卒中患者HDL、Apo A、Apo B、LP（a）含量與健康對照組比較，差異無統計學意義（P＞0.05）。結論腦卒中患者血清sCD14、HCY和TG、CHOL、LDL?C明顯相關，對了解患者的發病和輔助診斷具有重要的臨床意義。

可溶性CD14；同型半胱氨酸；腦卒中

腦卒中是一種由腦部血液循環障礙而引起的疾病，是由各種誘因引發腦內血管狹窄、堵塞或者破裂導致的［1］。近年來腦卒中的發病率呈增加趨勢，其較高的致殘率給社會和家庭造成了巨大負擔［2］。CD14是位于單核?巨噬細胞表面的一種白細胞分化抗原，是細菌脂多糖（lipo?polysaccharides，LPS）的重要受體，有兩種存在形式：一種是位于細胞膜上的膜結合型CD14（mCD14）；另一種是游離于血清和尿液中的可溶性的 CD14（sCD14）［3?4］。在正常情況下，mCD14主要分布在單核細胞、巨噬細胞和樹突細胞的細胞膜上，sCD14則主要存在于血清中。近年來的研究表明，sCD14與一些疾病有較高的相關性，如敗血癥、白血病、冠心病等［5?7］，但有關sCD14與腦卒中的相關性研究較少。血液同型半胱氨酸（homocysteine，HCY）水平升高是缺血性腦血管病的一個重要的獨立危險因素，且血液HCY濃度與發生腦梗死的危險度呈量效關系，血漿HCY水平輕度增高即可致腦梗發病危險性增加 2倍［8?9］。本文通過對血清可溶性CD14（sCD14）、HCY及7項血脂指標進行檢測，探討血清sCD14、HCY和7項血脂指標與腦卒中的相關性。

1 材料與方法

1.1 一般資料

病例選取自深圳市龍崗中心醫院2014年11月至2016年10月之間，采取隨機卡片的方法，從符合1995年第4屆全國腦血管病學術會議制定的腦卒中診斷標準［10］的腦卒中患者病例中隨機選取195例，設為實驗組。所有患者均在發病后24 h內入院，并經CT、MRI等影像學診斷確診。排除標準：合并心肌梗死、心房顫動或冠心病者；有嚴重的肝、腎衰竭者；有嚴重創傷或在入院前3個月內有重大手術史患者；惡性腫瘤患者；血小板計數＜100×109/L或＞400×109/L。其中男性100例，女性95例，年齡41～80歲，平均年齡（56.3± 5.6）歲；健康對照組選取自2015年5月至2016年10月之間來我院進行健康體檢的健康體檢者120例，其中男性70例，女性50例，年齡30至60歲之間，平均年齡（54.3±4.6）歲。實驗組和健康對照組在性別、年齡等方面差異無統計學意義，具有可比性。

1.2 檢測方法

所有受檢者在空腹12 h的情況下于清晨7點采集靜脈血 3 mL。采用ELISA法測定血清sCD14，sCD14試劑盒批號為MEXN?H0032，由美國ADL公司提供，主要儀器為安途生物PHOMO型酶標儀，操作嚴格按照說明書進行。同時采用羅氏C7O2全自動生化分析儀檢測TG、CHOL、HDL、LDL?C、Apo A、Apo B和HCY水平，其中TG、CHOL、HDL、LDL?C、Apo A、Apo B、LP（a）檢測的試劑、質控和定標物由德國羅氏公司提供；HCY檢測的試劑、質控和定標物由廣州科方生物技術有限公司提供，試劑批號：150901，嚴格按照儀器操作和試劑使用說明進行檢測，確保結果的準確性。

1.3 統計學方法

應用SPSS 13.0統計軟件處理數據。計量資料以均數±標準差（±s）表示，兩組間比較采用t檢驗，計數資料組間比較采用χ2檢驗，P＜0.05為差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 腦卒中患者與健康對照組血清sCD14、HCY和7項血脂指標比較

腦卒中患者血清sCD14、HCY、TG、CHOL、LDL?C含量明顯升高，與健康對照組比較，差異具有統計學意義（P＜0.05），而腦卒中患者HDL、Apo A、Apo B、LP（a）含量與和健康對照組比較，差異無統計學意義（P＞0.05），見表1。

2.2 腦卒中患者與健康對照組不同性別間血清sCD14、HCY水平比較

腦卒中實驗組和健康對照組不同性別間血清sCD14、HCY水平進行比較。腦卒中男性sCD14水平和HCY水平與健康對照組男性相比，差異有統計學意義（P＜0.05）；腦卒中女性sCD14水平與對照組女性sCD14相比，差異有統計學意義（P＜0.05），見表2。實驗組和健康對照組兩組的男性血清HCY與女性的相比，差異也有統計學意義（P＜0.05）。實驗組的男性血清的sCD14與女性的相比，差異也有統計學意義（P＜0.05），見表3。

表1 腦卒中患者與健康對照組血清sCD14、HCY和7項血脂水平比較（±s）Table 1 Comparison of serum levels of sCD14，HCY and serum seven blood lipid indexes with stroke and healthy controls（±s）

表1 腦卒中患者與健康對照組血清sCD14、HCY和7項血脂水平比較（±s）Table 1 Comparison of serum levels of sCD14，HCY and serum seven blood lipid indexes with stroke and healthy controls（±s）

項目sCD14（μg/mL）HCY（μmol/L）TG（mmol/L）CHOL（mmol/L）LDL?C（mmol/L）Apo A（g/L）HDL（mmol/L）Apo B（g/L）LP（a）（mg/L）實驗組（n=195）72.98±36.67 20.78±17.98 1.48±0.78 5.19±0.93 2.62±0.83 1.34±0.26 1.15±0.31 0.97±0.76 188.07±167.68對照組（n=120）57.13±21.67 14.45±7.28 0.88±0.75 4.39±1.21 2.26±0.43 1.36±0.29 1.29±0.22 0.85±0.57 151.43±177.45 t 4.29 3.67 6.72 6.60 4.40 0.63 4.32 1.49 1.84 P值0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.53 0.06 0.14 0.07

表2 不同性別中腦卒中實驗組與健康對照組血清sCD14、HCY水平比較（±s）Table 2 Comparison of serum levels of sCD14 and HCY in stroke group and healthy control group with different gender（±s）

表2 不同性別中腦卒中實驗組與健康對照組血清sCD14、HCY水平比較（±s）Table 2 Comparison of serum levels of sCD14 and HCY in stroke group and healthy control group with different gender（±s）

性別n男100 70女組別實驗組對照組t P值實驗組對照組t P值95 50 sCD14（μg/mL）81.35±12.23 59.62±20.48 8.64＜0.01 60.21±9.53 53.33±23.53 2.49 0.014 HCY（μmol/L）22.3±8.62 15.3±7.69 5.44＜0.01 18.49±6.67 11.65±2.31 7.02＜0.01

表3 腦卒中實驗組與健康對照組不同性別間血清sCD14、HCY水平比較（±s）Table 3 Comparison of serum sCD14 and HCY levels between different genders of stroke patients and healthy controls（±s）

表3 腦卒中實驗組與健康對照組不同性別間血清sCD14、HCY水平比較（±s）Table 3 Comparison of serum sCD14 and HCY levels between different genders of stroke patients and healthy controls（±s）

指標sCD14（μg/mL）HCY（μmol/L）實驗組對照組男（n=100）81.35±12.23 22.3±8.62女（n=95）60.21±9.53 18.49±6.67 t t 13.42 3.44 P值0.00 0.00男（n=70）59.62±20.48 15.3±7.69女（n=50）53.33±23.53 11.65±2.31 1.56 3.25 P值0.12 0.00

3 討論

CD14是LPS受體復合物的主要成分，主要由單核細胞和巨噬細胞產生，具有膜結合性（mCD14）和可溶性（sCD14）兩種形式［11］。大量研究發現sCD14在人類多種疾病發生發展過程中都具有重要的病理生理意義，sCD14是一種糖蛋白，其蛋白質多肽鏈結構較mCD14少8個氨基酸，同時不含磷酸酰肌醇，分子量為48 KDa，較mCD14小。sCD14存在于人和動物的血液與尿液中，約占機體全部CD14含量的99%左右，其正常血清中的濃度為2～6 μg/mL［12］。

目前研究發現，sCD14在動脈粥樣硬化形成過程中起重要作用，在其病理生理變化中，sCD14促使內皮細胞活化，加速動脈粥樣硬化斑塊的形成［13］。Griga T等［14］研究發現CD14基因的多態性可以影響單核細胞表面以及分泌入血CD14的密度，且其與心肌梗死的發生具有一定的相關性。血管壁病變、血液和血液成份的流體動力學變化等是腦梗死的主要病因，有研究表明，產生動脈易損斑塊，隨后發生破裂和形成的血栓，這些是腦梗死發生的病理基礎，斑塊局部炎癥和免疫反應是易損斑塊形成的關鍵因素，CD14對于單核?巨噬細胞系統和動脈易損斑塊的發生發展至關重要［15］。本研究發現腦卒中患者血清sCD14水平明顯高于對照組，提示sCD14的水平與腦卒中的發生密切相關，有必要開展大樣本的臨床研究來進一步確認腦梗死患者sCD14與患者發病和進展的關系，而對于腦梗死后患者復發情況也可能與CD14單核細胞亞型相關，建立腦梗死患者和健康受試者的隊列研究意義重大，以探討CD14和其它單核細胞亞型在腦梗死患者和健康人群中的差異，通過這一途徑，可以為腦梗死患者提供一種新的治療策略。

研究認為，高HCY導致腦卒中的可能機制為促使氧自由基生成，引起血管內皮細胞損傷和促進動脈平滑肌細胞增生，加速低密度脂蛋白氧化，增加泡沫細胞形成，而后者是粥樣斑塊的主要成分；HCY參與了血管內皮毒性作用，使平滑肌細胞增殖，最終阻塞血流通路；HCY還可改變凝血因子功能，增加血栓的形成傾向，導致凝血機制的改變，最終誘發心腦血管疾病，在臨床上其病死率，病殘率均比較高［16］。正常人體每日產生15～20 μmol/L同型半胱氨酸，大部分在細胞內分解代謝，僅有1.5 μmol/L或更少被釋放到血液中。有研究表明，血清HCY濃度每增加5 μmol/L，腦卒中發生的危險性則增大了1.65倍；血清HCY濃度每降低3 μmol/L，腦卒中發生的危險性則降低15%～30%［16］。補充葉酸降低HCY可以顯著降低腦卒中風險，目前已知降低HCY最安全有效的方法是補充葉酸，可以合并或不合并使用維生素B12或維生素B6。本研究發現腦卒中患者血清HCY水平明顯高于對照組，提示HCY的水平與腦卒中的發生密切相關。另外高脂血導致脂質在血管內皮沉積所引起的動脈硬化，本研究發現腦卒中患者血清TG、CHOL、LDL?C含量明顯升高，與健康對照組比較，差異具有統計學意義（P＜0.05），提示血清TG、CHOL、LDL?C的水平與腦卒中的發生密切相關。

［1］柴偉，張春明.2型糖尿病并發冠心病患者血清同型半胱氨酸、氧化低密度脂蛋白及血小板參數的研究［J］.國際檢驗醫學雜志，2009，30（6）：826?827.

［2］吳竹青，群森，吳君倉.側支循環與缺血性腦卒中研究進展［J］.安徽醫學，2015，36（12）：1549?1551.

［3］Wright SD，Ramos RA，Tobias PS，et al.CD14，a receptor for complexes of lipopolysaccharide（LPS）and LPS binding protein［J］.Science，1990，249（4975）：1431.

［4］張化民，劉慶林.降低血同型半胱氨酸在腦血管病治療中的應用［J］.醫學倫理與實踐，2005，18（1）：9?11.

［5］劉波，李薇，殷勤，等.可溶性亞型CD14對膿毒癥患者彌漫性血管內凝血的預測研究［J］.中華醫院感染學雜志，2015，25（23）：5284?5289.

［6］賈雪芹，陳海濱，邱清華.血清可溶性CD14和肌酐在冠心病評估中的價值［J］.江蘇醫藥，2015，41（15）：1780?1782

［7］賈雪芹，杜秀麗，張海峰.血清可溶性CD14水平與冠脈病變的相關性研究［J］.第二軍醫大學學報，2014，35（12）：1404?1406.

［8］中華醫學會心血管病學分會，中華心血管病雜志編輯委員會.中國心血管病預防指南［J］.中華心血管病雜志，2011，39（1）：3?22.

［9］雷小平.血清同型半胱氨酸水平與冠狀動脈病變的相關性分析［J］.國際檢驗醫學雜志，2010，31（6）：619?620.

［10］中華神經科學會，中華神經外科學會.各類腦血管疾病診斷要點［J］.中華神經科雜志，1996，29（6）：379?380.

［11］Takai N.Kataoka M.Higuchi Y，et al.Primary struc?ture of rat CD14 and characteristics of rat CD14，cyto?kine，and NO sythase mRNA expression in mononucle?ar phagocyte system cells in response to LPS［J］.J Leukoe Biol，1997，61（6）：736.

［12］Frey EA，Miller DS，Jahr TG，et al.Soluble CD14 partticipate in the response of cells to lipopolysaccha?ride［J］.J Exp Med，1992，176（6）：1665.

［13］Palusinski R P，Vaisman D，Pasceri V.Synergy be?tween CD14 and Creactive protein（CRP）in endothelial cell activation［J］.Circulation，2002，106：533?534.

［14］Griga T，Klein W，Epplen JT，et al.CD14 expression on monocytes and soluble CD14 plasma levels in corre?lation to the promoter polymorphism of the endotoxin receptor CD14 gene in patients with inactive Crohn′s disease［J］.Hepatogato?gastroenterology，2005，52（63）：808?811.

［15］Hallenbeck J，Del Zoppo G，Jacobs T，et al.Immuno?modulation strategies for preventing vascular disease of the brain and heart workshop summary J［J］.Stroke，2006，37（12）：3035?3042.

［16］劉國峰，徐文儉，孫順成.不同年齡組急性腦梗死與血漿同型半胱氨酸水平的關系［J］.中風與神經疾病雜志，2010，27（7）：659.

Analysis of serum soluble CD14,homocysteine and 7 blood lipids in patients with stroke

ZHANG Shaobin★,CHEN Siliang,LUO Guanchao,WEI Qingwen,LUO Dan
(Department of Clinical laboratory,Longgang Central HospitalofShenzhen,Shenzhen,Guangdong,China, 518116)

ObjectiveTo investigate the correlation between serum soluble CD14(sCD14), homocysteine(HCY),blood lipids and cerebral stroke.MethodsELISA was used to detect the serum levels of sCD14 in 195 patients with stroke and 120 healthy controls.The Roche C7O2 automatic biochemical analyzer was used to detect the serum levels of HCY and serum lipids in 195 patients with stroke and 120 healthy controls,and the test results were analyzed.ResultsThe expression levels of sCD14,HCY,TG, CHOL,HDL,LDL?C,Apo A,Apo B,and LP(a)in the serum of stroke patients were(79.98±36.67)μg/mL, (20.78±17.98)μmol/L,(1.48±0.78)mmol/L,(5.19±0.93)mmol/L,(1.15±0.31)mmol/L,(2.62±0.83)mmol/L, (1.34±0.26)g/L,(0.97±0.76)g/L,and(188.07±167.68)mg/L,respectively.The expression levels of serum sCD14,HCY,TG,CHOL and LDL?C in the stroke patients were significantly increased compared with the levels in the healthy control group(P＜0.05).There were no significant differences in the levels of HDL,Apo A,Apo B,and LP(a)between the healthy control group and the stroke patients(P＞0.05).ConclusionThe serum levels of sCD14,HCY,TG,CHOL and LDL?C were significantly related to stroke patients,providing important clinical information in understanding the pathogenesis and diagnosis of these patients.

Soluble CD14;Homocysteine;Stroke

深圳市衛計委科研課題（201303209）

深圳市龍崗中心醫院檢驗科，廣東，深圳518116

★通訊作者：張韶斌，E?mail：13923856280@139.com