試管凝集試驗與虎紅平板凝集試驗在布魯氏桿菌病診斷中應用價值比較

石慶芬+劉學真+譚磊

[摘要] 目的 比較試管凝集試驗與虎紅平板凝集試驗在布魯氏桿菌病診斷中應用價值。方法 方便選取濟南市傳染病醫院及解放軍第404醫院普外科2014年8月—2016年8月收治的128例布魯士氏桿菌病患者為研究對象，均取靜脈血，再行試管凝集、虎紅平板凝集試驗，比較兩種檢測方法結果。 結果 該組128例患者血清中，結果顯示：RBPT呈陽性24例（18.75%）；SAT呈陽性20例（15.63%），其中1∶100有10例，1∶100以上有10例，可疑6例，兩種檢測方法的陽性符合率為93.81%，試管凝集試驗與虎紅平板凝集試驗的陽性檢出率比較差異無統計學意義（P>0.05），試管凝集試驗特異性高，虎紅平板凝集試驗敏感性高。結論 試管凝集試驗可用于確診初篩陽性及診治臨床患者，虎紅平板凝集試驗可用于初篩、調查流行病；若結合兩種方法用于診斷布魯氏桿菌病，可提高陽性檢出率，避免假陽性。

[關鍵詞] 試管；虎紅平板；凝集試驗；布魯氏桿菌病

[中圖分類號] R516.7 [文獻標識碼] A [文章編號] 1674-0742（2017）01（c）-0105-03

Comparison of Application Value of Tube Agglutination Test and Rpst in Diagnosis of Brucellosis

SHI Qing-fen1， LIU Xue-zhen2， TAN Lei1

1.Department of Clinical Laboratory， Jinan Infectious Disease Hospital， Jinan， Shandong Province， 250021 China；2.Department of General Surgery， PLA 404th Hospital， Weihai， Shandong Province， 264200 China

[Abstract] Objective To compare the application value of tube agglutination test and rpst in diagnosis of brucellosis. Methods 128 cases of patients with brucellosis admitted and treated in our hospital from August 2014 to August 2016 were convenient selected as the research objects and the vein blood was extracted for tube agglutination test and rpst， and the test results of the two methods were compared. Results In the serum of 128 cases of patients， the results showed that the RBPT of 24 cases was positive， accounting for 18.75%， the SAT of 20 cases were positive， accounting for 15.63%， 10 cases were 1∶100 and 10 cases were above 1∶100 and 6 cases were suspected， the positive coincidence rate of the two methods was 93.81%， and the difference in the positive test rate between the tube agglutination test and rpst had no statistical significance（P>0.05）， the specificity of tube agglutination test was high and the sensitivity of rpst was high. Conclusion The tube agglutination test can be used to diagnose the clinical positive patients， and the rpst can be used for preliminary screening and survey of epidemic diseases， and the application of the combination of the two methods in diagnosing the brucellosis can improve the positive test rate and avoid the false positive results.

[Key words] Tube； Rose-Bengal Plate； Agglutination test； Brucellosis

布魯氏桿菌病是一種傳染-變態反應性傳染病，由布魯氏菌屬細菌入侵人體所引起，屬人畜共患疾病[1]。人體內的布魯氏菌病來源于動物傳播，若人類患有該病，可造成公共衛生問題。布魯氏菌病的傳播根除關鍵在于撲殺患病動物，切斷傳播源及滅殺傳染源。因此，尋求布魯氏桿菌病的準確、快速的檢測方法，有助于疾病的防治，控制疾病發生與流行。該研究旨在分析試管凝集試驗與虎紅平板凝集試驗用于診斷布魯氏桿菌病的效果，現選取2014年8月—2016年8月于濟南市傳染病醫院、解放軍第404醫院收治的128例布魯士氏桿菌病患者臨床資料為研究對象，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

方便選取該院收治的128例布魯士氏桿菌病患者為研究對象，其中男63例，女65例，年齡21～78歲，平均（55.64±20.15）歲。所有患者均于患病前接觸過家畜或畜產品，存在持續高燒、發力、多汗及肌肉、關節酸痛等可疑癥狀。

1.2 方法

該組患者均于清晨空腹抽取靜脈血，存于-20℃冰箱內備用。先行虎紅平板凝集試驗（RBPT），再行試管凝集試驗（SAT），操作如下：①RBPT：在玻片上用蠟筆劃出方格，加入血清0.03 mL，再將0.03 mL布魯氏菌病虎紅平板抗原加入血清，搖勻后，在20℃室溫下觀察結果5 min，對照陽、陰性血清，若呈“+”以上反應，則為陽性。②SAT：血清裝于5支小試管內，第1支試管，加入0.5%石碳酸生理鹽水（國藥準字H14020458）2.3 mL，第2支試管無任何添加，第3、4、5支試管內各加入0.5 mL石碳酸生理鹽水。第1支試管中加入0.2 mL血清，搖勻；吸取0.5 mL第3管混合液加至第4管，搖勻；再吸取0.5 mL第4管混合液加至第5管，搖勻；再吸出0.5 mL第5管混合液丟棄。按此稀釋，自第2～5管的血清稀釋比分別是1：12.5、1∶25、1∶50、1∶100。予以0.5%石碳酸生理鹽水稀釋抗原1∶10，再將稀釋抗原加至各稀釋血清中，第1管作為血清對照不加入，其余加入0.5 mL，從第2～5管血清稀釋比為1∶25、1∶50、1∶100、1∶200；最后對照陽、陰性血清。

1.3 觀察指標與結果判定

觀察該組布魯氏菌抗體采取兩種方法檢測的結果。RBPT結果判定：陽、陰性血清試驗結果準確對照下，陽性：血清可見凝集反應；陰性：血清無凝集反應。SAT結果判定：判定依據以試驗配制比濁管為準，結果呈“++”為血清凝集最高稀釋度，陽性：1∶100（++）及以上；可疑：1∶50（++）[2-3]。

1.4 統計方法

數據用SPSS 21.0統計學軟件分析，正態計量資料用（x±s）表示，兩組間比用t檢驗，計數資料組間率采用χ2檢驗，計數資料用[n（%）]表示，P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

該組128例患者血清中，結果顯示：RBPT呈陽性24例（18.75%）；SAT呈陽性20例（15.63%），其中1∶100有10例，1∶100以上有10例，可疑6例，兩種檢測方法的陽性符合率為93.81%，試管凝集試驗與虎紅平板凝集試驗的陽性檢出率比較差異無統計學意義（P>0.05，χ2=0.4391），詳見表1。

3 討論

布魯氏桿菌病作為人畜共患的一種傳染病，疾病傳播范圍廣且快，目前，臨床診斷該病的常用方法為血清抗體檢測法。在該研究中，該院對收治的128例布魯氏桿菌病患者先后采取虎紅平板凝集試驗、試管凝集試驗，比較兩種檢測方法的結果，結果顯示：RBPT呈陽性24例（18.75%）；SAT呈陽性20例（15.63%），其中1∶100有10例，1∶100以上有10例，可疑6例，兩種檢測方法的陽性符合率為93.81%，但兩種檢測方法的陽性檢出率比較差異無統計意義。這與饒國利等[4]文獻研究結果比較一致性較高，RBPT陽性檢出率15.72%，SAT陽性檢出率12.23%。由此可知，虎紅平板凝集試驗敏感性好，試管凝集試驗特異性好。試管凝集試驗可用于早期診斷布魯氏桿菌病，亦可用于檢測布魯氏菌疫苗免疫后機體最早血清抗體，是國家診斷布魯氏桿菌病的正式法定試驗。考慮到兩種檢測方法的結果判定是通過肉眼觀察比較渾濁度，易受人為因素干擾，加上試驗結果需20 h后可獲得，時間長，故在無專業實驗室條件下，虎紅平板凝集試驗成本低，操作簡便，可快速、容易的判斷結果，加之其敏感性強，該檢測法適用于大范圍篩查布魯氏桿菌病或調查流行病學[5]。

血清抗體檢測是檢驗布魯氏菌病的有效途徑，包括虎紅平板與試管凝集試驗兩種，是人間診斷布魯氏菌病的常用血清學診斷法。RBPT檢出抗體屬IgG類，其操作簡便、迅速，特異性、敏感性均較高，可短時間定性分析出布魯氏菌病感染結果，適于大范圍初篩布魯氏菌病；非特異性抗體易干擾RBPT呈現出非特異性凝集，顯示假陽性，但假陽性率較低，試驗結果若呈陽性，還需通過SAT試驗以確診[6-7]。纖維蛋白原與虎紅試劑反應顯現非特異性凝集，故不可用血漿做RBPT試驗，否則結果為假陽性[8]。在檢測前，需觀察采血管內有無抗凝劑，若有則需重新采血。SAT檢出抗體屬IgM類，試驗時間需20～22 h，需大量患者血清及布魯氏菌凝集抗原，其為國際規定檢測法，特異性好，不受非特異因子干擾，可定性分析布魯氏菌病，還可定量測定抗體滴度，用于臨床診斷、觀察及評估療效[9-10]。布魯氏菌病出現特異性抗體的早晚、抗體的滴度高低、抗體消長速度均可用于診斷疾病，且對評估療效及預后具積極意義。

綜上所述，虎紅平板凝集試驗敏感性好，試管凝集試驗特異性好，將兩種檢測方法結合，可互補優劣，提高布魯氏桿菌病診斷準確性。對于大面積篩查，可先用虎紅平板凝集試驗檢測，再用試管凝集試驗確診陽性率，結合臨床體征、流行病學診斷布魯士桿菌病患者，有助于其臨床診治。

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