鄔溪芮 張珍珍/秦皇島市農產品質量安全監督檢驗中心
喹乙醇的危害及其檢測方法
鄔溪芮 張珍珍/秦皇島市農產品質量安全監督檢驗中心
2017年3月15日,央視“3·15”晚會曝光了另一種“瘦肉精”卷土重來,個別飼料生產企業在混合型飼料添加劑“造肉1號”、“ 味霸”、“ 速肥肽”中添加了喹乙醇,部分養殖戶也在飼料中直接非法添加喹乙醇。其實,在2009年中央電視臺《每周質量報告》曾報道過鯉魚飼料因含有違禁藥物“喹乙醇”,造成當地養殖鯉魚大量死亡的事件。而這些動物體內的獸藥殘留,直接關系到我們人類的健康,一時間引起了全社會的高度關注。為了使人們對喹乙醇及其危害有更深的認識,現將喹乙醇的理化性質、危害及其檢測方法綜述如下。
喹乙醇(olaquindox)又稱喹酰胺醇,商品名為倍育諾、快育靈,為淺黃色結晶性粉末,無臭,味苦,溶于熱水,微溶于冷水,在乙醇中幾乎不溶,化學名為2-[N-2-羥基-乙基]-氨基甲酰-3-甲基-喹惡啉-1,4-二氧化物。它是化學合成的喹惡啉類廣譜抗菌藥物,對革蘭氏陽性菌和陰性菌均有抑制作用,對大腸桿菌、沙門氏菌、志賀氏菌、變形桿菌屬等特別敏感,對金黃色葡萄球菌、肺炎雙球菌、綠膿桿菌、痢疾密螺旋體等也有抑制作用,喹乙醇與四環素、氯霉素、氨芐青霉素沒有交叉耐藥性,而對上述抗生素產生抵抗力的細菌也有效。此外,喹乙醇能促進蛋白同化作用,增加機體蛋白質合成,使更多的氮儲存于體內呈現促生長和多產瘦肉的作用。主要用作促生長及催肥的飼料添加劑,也可用于治療腸道炎癥、赤痢、巴氏桿菌病等。
喹乙醇是1965年由德國Bayer公司以鄰硝基苯胺為原料合成的一種抗菌促生長劑,1976年歐共體批準用于畜禽飼料添加劑,20世紀80年代初,喹乙醇作為飼料添加劑在我國開始推廣使用。近年來在水產飼料中,喹乙醇曾一度被稱為“水產瘦肉精”。有研究發現,大劑量喹乙醇對動物可產生毒性作用,且喹乙醇在體內具有蓄積性,在動物體內蓄積到一定程度時會對動物和人產生致畸、致癌、致突變的“三致”作用。但該藥物毒性隨動物種屬不同存在較大差異,特別對禽和魚類有中度至明顯蓄積毒性和一定遺傳毒性。因此,歐盟從1999年開始全面禁止使用喹乙醇。我國農業部批準的喹乙醇獸藥國家標準(《中華人民共和國獸藥典》)和2001年發布的《飼料藥物添加劑使用規范》中明確規定,喹乙醇作為抗菌促生長劑,僅限用于35公斤以下豬的促生長,以及防治仔豬黃痢、白痢,豬沙門氏菌感染,休藥期35日;禁用于體重超過35公斤以上的豬和禽、魚等其他種類動物。
(一)膠體金免疫層析法
膠體金免疫層析技術是近年發展起來的一種免疫學快速檢測方法,將已制備純化過的喹乙醇多克隆抗體與膠體金結合產生的金標抗體噴涂在玻璃纖維墊上,并將包被抗原和二抗分別結合在硝酸纖維素膜上,組裝成免疫層析快速檢測試紙條,將制備的試紙條用于檢測樣品。該方法操作簡單,檢測時間短,攜帶方便,用于快速檢測和現場篩查,更容易在基層推廣。
(二)酶聯免疫吸附檢測法
酶聯免疫吸附技術(ELISA)是酶聯免疫技術中最常用的一種,據抗原抗體特異性反應及酶聯反應放大作用原理,建立喹乙醇藥物殘留ELISA檢測方法,適用于喹乙醇的快速檢測和批量篩查。該方法可滿足簡便、快速、靈敏、低成本、大批量的檢測需求,適用于定性及超微量定量分析。
(三)高效液相色譜法
高效液相色譜法測定準確、重復性好,適用于喹乙醇殘留的定量檢測。樣品中的喹乙醇經適當溶劑提取、過濾后,用反相色譜柱分離測定,在固定波長處紫外檢測器檢測,繪制標準曲線,喹乙醇含量與吸光度值在一定濃度范圍內成正比,試樣與工作曲線比較定量。
(四)液相色譜-質譜聯用技術
液相色譜-質譜聯用技術又叫液質聯用技術(HLPC-MS),以液相色譜作為分離系統,質譜為檢測系統。樣品在質譜部分和流動相分離,被離子化后,經質譜的質量分析器將離子碎片按質量數分開,經檢測器得到質譜圖。液相色譜-串聯質譜技術將色譜的高分離性能和質譜的高選擇性、高靈敏度、極強的專屬性特點結合起來,已廣泛地應用于喹乙醇的檢測中,作為喹乙醇最可靠的確證方法。
(五)熒光微球免疫層析法
2016年裴星瑤等人報道了熒光微球免疫層析法,該方法是將新型標記物熒光微球與喹乙醇單克隆抗體偶聯,以該復合物為檢測試劑制備熒光微球免疫層析試紙條,在肉眼檢測的同時,將該裝置與熒光微球定量側向層析讀數儀聯合使用,可進行全價雞飼料中喹乙醇含量的定量快速檢測。該試紙條特異性強、準確性高,保存期長,定量檢測只需18 min左右,肉眼檢測需38 min左右,與相同抗原和抗體制備的膠體金試紙條相比,該方法可大大提高靈敏度。
此外,還有紫外分光光度法、近紅外光譜分析法及電化學分析法(電位分析法、電導法、極譜分析法、電位滴定法)等。