楊梅提取物緩解小鼠體力疲勞的作用

張穎++徐軍++陸羅定++劉協

摘要：為研究楊梅提取物緩解體力疲勞作用，經口給予健康ICR小鼠0、85、170、510 mg/kg劑量的楊梅提取物 32 d 后，分別進行負重游泳試驗、肝糖原測定、血乳酸測定和血清尿素氮測定。結果顯示，高劑量組小鼠游泳時間比對照組極顯著延長（P<0.01）；高劑量組小鼠運動后血清尿素氮值極顯著低于對照組（P<0.01）；高劑量組小鼠肝糖原含量極顯著高于對照組（P<0.01）；中、高劑量組小鼠運動前后血乳酸變化值與對照組小鼠運動前后血乳酸變化值比較均具有顯著性差異（P<0.01）。表明楊梅提取物在本試驗條件下具有緩解體力疲勞作用。

關鍵詞：楊梅提取物；緩解體力疲勞；小鼠

中圖分類號： R284.1文獻標志碼： A

文章編號：1002-1302（2016）12-0290-02

收稿日期：2016-04-12

作者簡介：張穎（1979—），女，江蘇句容人，碩士，副主任技師，主要從事衛生毒理學研究。E-mail：694763830@qq.com。

通信作者：劉協，主任醫師，主要從事衛生毒理學研究。Tel：（025）83759444；E-mail：865778939@qq.com。

楊梅（Myrica rubra）是中國南方特有水果之一，主產區在浙江、江蘇、福建等長江流域以南地區。楊梅果實色澤鮮艷、風味獨特、柔軟多汁、營養豐富，適合加工果汁和果酒等產品，備受消費者青睞。為促進楊梅產業的發展，人們已逐漸對楊梅進行深度開發。目前已有關于楊梅提取物抗氧化、抗腹瀉、抑菌抗菌等方面的研究，但其抗疲勞作用少見報道[1-5]。本研究通過小鼠負重游泳試驗，測定血清尿素氮、肝糖原含量和血乳酸變化值，檢驗楊梅提取物緩解體力疲勞的功效，以期為楊梅保健功能的開發利用提供依據。

1材料與方法

1.1材料

1.1.1試驗動物雄性健康ICR小鼠，清潔級，體質量 18.0～22.0 g，由上海斯萊克實驗動物有限責任公司提供，動物生產許可證號：SCXK（滬）2012-0002號。試驗動物環境設施合格證號：SYXK（蘇）2012-0037。試驗期間全部動物給予清潔級全價鼠顆粒飼料和滅菌水自由食用。

1.1.2受試物楊梅提取物是以楊梅成熟果實為原料，用乙醇溶液提取，經食品工業用吸附樹脂純化、濃縮、干燥后制得，由某研發有限公司提供。

1.1.3儀器與試劑游泳箱，電子天平，TU1810型分光光度計，SBA-40E型全自動生物傳感分析儀（乳酸儀），奧林巴斯AU640全自動生化分析儀，JY92-II 型超聲波細胞粉碎機等。尿素氮測定試劑盒（脲酶法），購自北京中生生物工程高技術公司；糖原測定試劑盒，購自南京建成生物工程研究所；其余試劑均為分析純。

1.2方法[6]

1.2.1劑量及分組游泳試驗及各項生化指標（血清尿素氮、肝糖原、血乳酸）測定所用動物均按體質量分成4組，每組12只，設為85、170、510 mg/kg 3個劑量組和溶劑（純凈水）對照組，各組受試液以每日20 mL/kg的量經口灌胃，連續32 d。

1.2.2受試物對動物體質量的影響各組動物于試驗前后稱量體質量。

1.2.3游泳時間測定末次經口灌胃給予受試物30 min后，置尾根部負荷5%體質量鉛皮的小鼠于游泳箱中，水深大于30 cm，水溫（25±1.0） ℃，記錄小鼠從游泳開始至死亡的時間，作為小鼠游泳時間。

1.2.4血清尿素氮含量的測定末次經口灌胃給予受試物30 min后，在溫度為30 ℃的水中游泳90 min，休息60 min后采血，分離血清后按有關試劑盒要求檢測。

1.2.5肝糖原含量測定末次給予受試物30 min后處死動物，取肝臟100 mg，置于5%三氯乙酸溶液中勻漿、離心，95%乙醇沉淀糖原，蒽酮法測定肝糖原含量。

1.2.6乳酸含量測定首先眼內眥采血測定安靜狀態下的血乳酸基礎值；末次給予受試物30 min后，在30 ℃水中游泳 10 min，撈起擦干，立即第2次眼內眥采血，休息30 min后第3次眼內眥采血，均用乳酸儀測定乳酸含量。

1.3統計方法

所有測量值均先進行方差齊性檢驗，滿足方差齊的要求，進行單因素方差分析，對P<0.05的數據用LSD多個試驗組與1個對照組間均數的兩兩比較。對方差不齊的數據進行變量轉換，經轉換后的數據未達到方差齊要求，用秩和檢驗進行統計處理。

2結果與分析

2.1楊梅提取物對小鼠體質量的影響

由表1可見，各劑量組小鼠的初始體質量差異不顯著（P>0.05），即小鼠的初始體重在各組間較為均衡。經口給予小鼠不同劑量的楊梅提取物32 d后，各組終末體質量滿足方差齊的要求，差異不顯著（P>0.05），即楊梅提取物對小鼠的體質量增長無明顯影響。

2.2楊梅提取物對小鼠負重游泳時間、肝糖原含量、血清尿素氮含量的影響

高劑量組小鼠平均游泳時間高于對照組小鼠平均游泳時間，差異極顯著（P<0.01），而低劑量和中劑量組小鼠平均游泳時間雖然也高于對照組，差異不顯著（P>0.05），提示楊梅提取物可以延長小鼠的負重游泳時間；低、中和高劑量組小鼠肝糖原含量均高于對照組小鼠肝糖原含量，而且高劑量組值與對照組值比較差異極顯著（P<0.01）；高劑量組小鼠游泳后的血清尿素氮值低于對照組，差異極顯著（P<001），而低劑量和中劑量組小鼠血清尿素氮值與對照組比較差異不顯著（P>0.05）（表2）。說明楊梅提取物能增加負重游泳時間、增加肝糖原含量和減少疲勞小鼠血清尿素氮產生。

2.3楊梅提取物對小鼠血乳酸含量的影響

由表3可知，中、高劑量組小鼠運動前后血乳酸變化值均低于對照組小鼠運動前后血乳酸變化值，差異極顯著（P<001），提示楊梅提取物能降低小鼠運動后血乳酸含量。說明楊梅提取物能抑制運動后乳酸的產生和積累，有利于減緩血乳酸的堆積。

3結論與討論

負重游泳試驗是評價藥物抗疲勞作用的動物模型，游泳時間的長短與運動耐力有關，可以反映動物運動疲勞的程度[7]。糖是機體的主要供能物質，肝糖原貯備的提高可維持長時間運動時血糖濃度，有利于機體耐力速度的提高，并減少蛋白質和含氮化合物的分解代謝，延緩疲勞的出現[8]。乳酸和尿素氮都是機體運動代謝的產物。血液中乳酸的變化情況和血清中尿素氮水平能反映機體無氧酵解和含氮化合物的代謝狀況，是評價機體運動負荷的指標[9]。

楊梅果實在成熟時呈紅色或紫色，這是由一類與黃酮類似結構的物質-花色苷所致[10]。楊梅提取物中也含有大量的花色苷[2，11-12]。花色苷是花青素與糖以糖苷鍵結合而成的一類化合物，是花青素主要的存在形式，廣泛存在于植物的細胞液中，是植物最主要的水溶性色素之一?；ㄉ兆鳛?種植物中提取的色素擁有多種活性[13-15]。本試驗結果表明，楊梅提取物能明顯延長小鼠負重游泳時間，加強肝糖原的儲備，抑制運動后乳酸的生產和積累，減輕運動時機體利用蛋白質供能的程度，緩解疲勞的發生，降低機體疲勞的程度，與有關報道[16]基本一致，提示楊梅提取物中含有的楊梅花色苷可能為抗疲勞作用的活性成分，其具體的作用機制還有待將楊梅花色苷提純后進一步研究。

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