齊栓柱/內蒙古通遼市科左中旗腰林毛都鎮動物防疫站
豬圓環病毒2型的流行特點及疫苗的研究現狀
王琳/哈藥集團生物疫苗有限公司
齊栓柱/內蒙古通遼市科左中旗腰林毛都鎮動物防疫站
豬圓環病毒(Porcine Circovirus,PCV)屬圓環病毒科(Circoviridae)圓環病毒屬,為已知的最小的動物病毒之一。PCV可以分為PCV1和PCV2兩種血清型。PCV1無致病性,但廣泛存在豬體內及豬源代細胞系,1974年,Tischer首次從PK-15豬腎傳代細胞系中分離。PCV2具有致病性,是引起豬圓環病毒病(PCVD)的病原,該病主要以多系統病理損傷為特征,以哺乳期和育成期的豬最易感,尤其是5~12周齡的仔豬,一般在斷奶后2~3 d開始發病,急性發病豬群中,病死率高達10%;PCV2是一種重要的豬病病原,與近年來在各地廣泛流行的斷奶仔豬多系統衰竭綜合征(PMWS)、仔豬先天性震顫(CT)、豬皮炎與腎病綜合征(PDNS)、豬呼吸道疾病綜合征(PRDC)以及豬繁殖系統障礙等多種疾病密切相關,給養豬業造成嚴重經濟損失。目前PCVD在世界各國的豬群中廣泛存在,已經嚴重危害世界養豬業的健康發展,有調查顯示,該病在我國已廣泛流行。
豬是PCV2的天然宿主,PCV2對豬有極強的感染能力,不同品種、各種年齡的豬都可以被感染,但在其他動物檢測不到該病毒抗體的存在。PCV2傳播方式多樣,主要通過消化道和呼吸道等水平途徑傳播,但病毒也可以通過胎盤屏障垂直傳播傳染給胎兒,也有研究表明,公豬精液可能是傳播PCV2的途徑之一,并從豬的精液中檢測到了PCV2病毒。
PCVD在我國流行廣泛,感染范圍較大,流行時間較長。郎洪武等對北京、河北、天津、吉林、山東、江西、河南等7個省市不同生長階段的豬群采集了559份血清,ELISA方法檢測發現總體陽性率為42.9%。王忠田等對北京、天津、廣東、深圳、山西、山東等地規模化養豬場的臨床發病情況進行調查, PCR檢測結果表明,12個豬場中有11個豬場發生了由PCV2引起的PMWS,1個豬場發生了PDNS。近年來,我國各地區也有相應的報道,崔亞蘭等收集貴州省9個市(州)2007—2011年不同飼養規模(養豬戶)及屠宰場未免疫豬血清樣本共4 980頭份,2011年19個豬場(屠宰場)的可疑病料133份,采用PCR及ELISA方法對PCV2抗體及病原核酸進行檢測。結果表明:貴州省9個市(州)不同飼養規模 (養豬戶)生豬屠宰場及不同生長階段均可檢出PCV2抗體,總體陽性率達43.45%(2164/4980),且2007—2011年PCV2抗體陽性率呈上升趨勢。采用PCR檢測19個豬場133份可疑病料,結果顯示:有16個豬場PCV2檢測為陽性,檢出率為84.21%(16/19),其中103份病料檢出PCV2病原核酸,陽性率為77.44%(103/133)。
1.滅活疫苗。PCV2滅活疫苗是應用PK-15傳代細胞培養PCV2,經滅活、濃縮后按一定比例加入佐劑制成的疫苗,經肌肉注射,可誘導產生體液免疫,以獲得保護力。該類疫苗無毒、安全,穩定,但存在刺激時間短,需多次重復接種的缺點。目前,國、內外對PCV2滅活疫苗的研究已取得了巨大進展。法國梅利亞公司研究開發的PCV2油包水乳劑滅活疫苗,在一些歐洲國家已經注冊上市,免疫母豬或經產母豬,所產小豬可從初乳中獲得母源抗體,實驗和臨床結果表明,該疫苗免疫效果較好,可有效預防PCV2的感染。國內現有3種自主研發的PCV2常規滅活疫苗已獲準生產上市。其中,哈爾濱獸醫研究所研制的PCV2滅活疫苗LG株,免疫應答快,免疫效果較好。另有南京農業大學研發的PCV2滅活疫苗SH株和北京大北農集團研制的PCV2滅活疫苗DBN—SX07株。
2.弱毒疫苗。本類疫苗可刺激機體產生細胞免疫、體液免疫和黏膜免疫,免疫力持久,但其儲存和運輸需在冷凍條件下,且存在毒力返強的風險。Fenaux等將PCV2在PK15細胞上傳至120代時,發現病毒滴度較第1代有所提高。將其接種豬后,免疫豬血液病毒載量明顯下降,且所造成的組織損傷明顯減弱。經全基因組序列分析,發現PCV2傳至120代后,在衣殼蛋白基因中有兩處發生突變,氨基酸水平上體現為P110A 和R191S,表明這兩處突變可顯著提高PCV2的體外生長力,并降低其毒力。該發現對PCV2弱毒疫苗的開發研究具有重要意義。
3.亞單位疫苗。此類疫苗只含有病原微生物的抗原成分,而不含有核酸,可刺激機體產生特異性免疫應答,勃林格公司開發的PCV2亞單位疫苗Ingelvac CircoFlex 在美國的田間實驗結果表明,免疫豬在育肥期死亡率從9.5%下降至2.4%。
4.嵌合疫苗。將PCV2的ORF2克隆到缺失ORF2的PCVl的骨架中,從而獲得PCVI-PCV2 嵌合病毒,具有與PCV2 類似的免疫原性,能刺激機體產生特異性免疫反應,且具備不易發生毒力返強的優勢。如美國富道動物保健公司、輝瑞制藥有限公司的滅活嵌合病毒(PCV2a)疫苗。
PCVD在我國流行廣泛,對養豬業影響較大,疫苗免疫是預防本病的有效手段。近幾年,國內外科學家一直致力于對PCV2疫苗的研究開發,并已取得了巨大的成效,相信隨著科學技術的發展及對PCV2疫苗的深入開發研究,獲得新型高效的PCV2疫苗必將實現,PCVD也將更好地被控制。
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