ABO疑難血型鑒定的分析與報告

楊永懷+++曾媛媛

[摘要]目的 研究ABO疑難血型的鑒定方法及效果，為臨床輸血的安全性和有效性提供重要保障。方法 于2012年1月～2015年12月，在37 264份無償獻血者的血液標本中選取83份ABO疑難血型的血液標本作為研究對象，對這83份ABO疑難血型血液標本進行血清學檢測，分別采用鹽水試管法、聚凝胺法以及吸收放散試驗對血型正、反定型進行檢測，計算鹽水試管法、鹽水試管法+聚凝胺法、鹽水試管法+聚凝胺法+吸收放散試驗對血型正、反定型的符合率，并對鹽水試管法檢測ABO疑難血型正、反定型不符合的原因進行分析。結果 83份ABO疑難血型血液標本中，鹽水試管法檢測共37份標本血型正、反型符合，符合率為44.58%，鹽水試管法+聚凝胺法的符合率為50.60%，鹽水試管法+聚凝胺法+吸收放散試驗的符合率為75.90%，三種檢測方法聯合檢測的符合率高于單一的鹽水試管法、鹽水試管法+聚凝胺法（P<0.05）。鹽水試管法鑒定ABO疑難血型正反型不符合的原因主要為AB亞型、弱A抗原、弱B抗原、不規則抗體陽性等。結論 采用鹽水試管法、聚凝胺法、吸收放散試驗聯合檢測對ABO疑難血型進行鑒定，能夠準確鑒定血型正、反型。

[關鍵詞]ABO疑難血型；鑒定；輸血

[中圖分類號] R446.11 [文獻標識碼] A [文章編號] 1674-4721（2017）02（c）-0112-03

Analysis and report of ABO difficult blood group identification

YANG Yong-huai1 ZENG Yuan-yuan2

1.Clinical Laboratory，People′s Hospital of Shanwei City in Guangdong Province，Shanwei 516600，China；2.Blood Center of Shanwei City in Guangdong Province，Shanwei 516600，China

[Abstract]Objective To study the method and effect of identification of suspicious ABO blood group，to provide an important guarantee for the safety and effectiveness of clinical blood transfusion.Methods From January 2012 to December 2015，83 cases of suspicious ABO blood samples in 37 264 blood specimens of blood donors were selected as the research object，the 83 suspicious ABO blood specimens were carried out serological detection，saline tube method，Polybrene method and absorption elution test of blood group positive and negative stereotypes were detected. The coincidence rate of saline tube method，saline tube method+Polybrene method，saline tube method+Polybrene method+absorption elution test of blood group positive and negative stereotypes were calculated，the inconformity reason of saline tube method in detecting suspicious ABO blood group positive and negative stereotypes was analyzed.Results In the 83 cases of suspicious ABO blood samples，a total of 37 specimens of blood samples were consistent of positive and negative， and the coincidence rate was 44.58%，the coincidence rate of saline tube method and Polybrene method was 50.60%，the coincidence rate of saline tube Polybrene method+absorption elution test was 75.90%.The coincidence rate of combined detection of the three methods was higher than that of the single saline test tube method，the saline tube test method and the Polybrene method （P<0.05）.The main inconformity cause of saline tube test identification of ABO blood group were the AB subtype，weak A antigen，weak B antigen，irregular antibody positive.Conclusion The saline tube method，Polybrene method，absorption elution test of combined detection of suspicious ABO blood group identification can accurately identify the positive and negative blood type.

[Key words]ABO difficult blood group；Identification；Blood transfusionABO血型的鑒定較為困難，被稱為ABO疑難血型。據調查數據顯示，ABO血型的鑒定失誤導致輸血無效的概率>4%，容易造成嚴重后果。由于ABO血型的準確鑒定是確保臨床輸血安全及治療有效的重要前提，因此，臨床上應對ABO疑難血型的鑒定方法進行積極研究，以保障臨床輸血的安全和有效[1-2]。本研究選取我院ABO疑難血型的血液標本進行鑒定和分析，分別采取鹽水試管法、聚凝胺法以及吸收放散試驗對血型正、反定型進行檢測，旨在探討ABO疑難血型的鑒定方法及效果，以期能夠為臨床輸血的安全性和有效性提供重要保障，現報道如下。

1資料與方法

1.1一般資料

于2012年1月～2015年12月在我院37 264份無償獻血者的血液標本中選取83份ABO疑難血型的血液標本作為研究對象，血液標本來源包括男性41例，女性42例；年齡為25～49歲，平均（37.15±10.62）歲；其中血站送檢標本65份，醫院送檢標本18份。

1.2方法

試劑分別為抗-A試劑、抗-B試劑、抗-IgG試劑、聚凝胺試劑、C3d試劑，均購自上海血液生物醫藥有限責任公司。對這83份ABO疑難血型血液標本進行血清學檢測，分別采用鹽水試管法、聚凝胺法以及吸收放散試驗對血型正、反定型進行檢測，先對血液標本進行鹽水試管法檢測，進一步采用聚凝胺法、吸收放散試驗進行檢測，均按照《全國臨床檢驗操作規程》《中國輸血技術操作規程》中的規范流程進行操作。

1.3觀察指標

計算鹽水試管法、鹽水試管法+聚凝胺法、鹽水試管法+聚凝胺法+吸收放散試驗對血型正、反定型的符合率，并對鹽水試管法檢測ABO疑難血型正、反定型不符合的原因進行分析。

1.4統計學方法

采用SPSS 19.0統計學軟件對數據進行分析，計數資料以百分數表示，采用χ2檢驗，以P<0.05為差異有統計學意義。

2結果

2.1不同檢測方法對ABO血型正、反型檢測結果符合情況的比較

83份ABO疑難血型血液標本中，鹽水試管法檢測共37份標本血型正、反型符合，符合率為44.58%；鹽水試管法+聚凝胺法共有42例符合，符合率為50.60%；鹽水試管法+聚凝胺法+吸收放散試驗共有63例符合，符合率為75.90%。三種檢測方法聯合檢測的符合率高于單一的鹽水試管法、鹽水試管法+聚凝胺法，差異有統計學意義（P<0.05）。

2.2鹽水試管法檢測ABO血型正、反型不符合的原因分析

對46例鹽水試管法鑒定血型正、反型不符合的標本進行分析后發現，鹽水試管法鑒定ABO疑難血型正反型不符合的原因主要為AB亞型、弱A抗原、弱B抗原、不規則抗體陽性等，分別有9例（19.57%）、7例（15.22%）、6例（13.04%）、7例（15.22%），其余原因還有無抗-B抗體A型、無抗體O型、低抗-B效價、低抗-A效價、低抗-B效價O型、B亞型，分別有5例（10.87%）、4例（8.70%）、3例（6.52%）、2例（4.35%）、2例（4.35%）、1例（2.17%）。

3討論

ABO血型是一種血型系統，在輸血過程中，這種血型容易引發溶血性輸血反應，進而導致貧血、腎功能衰竭、休克等嚴重后果的發生，嚴重時還會導致死亡[3]。在臨床輸血過程中，常能遇到ABO血型正、反型出現不一致的情況，這給ABO血型的鑒定和臨床血液輸注均帶來嚴重影響，ABO血型鑒定失誤，容易造成輸血無效，對臨床治療較為不利，尤其是部分危急重癥患者，可能會導致患者發生失血性休克，進而導致患者死亡[4-5]。相關數據顯示，ABO血型的鑒定失誤導致的輸血無效率約為4%。對ABO血型進行準確鑒定是保障臨床輸血安全有效的重要前提，因此，臨床上應對ABO血型的鑒定進行深入研究，以尋求有效的鑒定方法，提高ABO血型鑒定的準確性，進而提高臨床輸血的安全性[6-7]。

目前，臨床上鑒定ABO血型主要采取血清學檢測方法，主要是通過對紅細胞以及血清的正、反定型不一致進行檢測，檢測方法主要有鹽水試管法、聚凝胺法、吸收放散試驗。本研究采取這三種檢測方法進行血型鑒定后發現，83份ABO疑難血型血液標本中，鹽水試管法檢測共37份標本血型正、反型符合，符合率為44.58%；鹽水試管法+聚凝胺法的符合率為50.60%，鹽水試管法+聚凝胺法+吸收放散試驗的符合率為75.90%，三種檢測方法聯合檢測的符合率高于單一的鹽水試管法、鹽水試管法+聚凝胺法（P<0.05）。三種檢測方法聯合鑒定的符合率最高，且高于單一的鹽水試管法、鹽水試管法聯合聚凝胺法檢測，提示在對ABO血型鑒定時，應采取多種檢測方法進行綜合鑒定，以減少誤差，進一步提高ABO血型鑒定的準確性，以確保臨床輸血的安全性和搶救的有效性[8-9]。

在ABO血型鑒定過程中，由于紅細胞抗原出現異常，如紅細胞表面抗原減弱，往往會導致血型正、反型鑒定出現差錯，而血型正、反型鑒定準確是ABO血型鑒定準確的重要前提，故有必要對血型正、反型鑒定出現差錯的原因進行分析，以采取有效的控制措施，確保血型正、反型鑒定的準確性。臨床諸多研究顯示，血型正、反型鑒定差錯的原因較為復雜，通過洗滌紅細胞、延長反定型反應時間、反定型加做O型混合紅細胞和不規則抗體檢測以及吸收放散試驗后發現，血型正、反型差錯主要和冷凝集素、紅細胞表面抗原減弱、血清抗體缺失、紅細胞致敏等有關[10-13]。本研究對46份經鹽水試管法檢測后血型正、反型不符合的標本進行分析后發現，鹽水試管法鑒定ABO疑難血型正反型不符合的原因主要為AB亞型、弱A抗原、弱B抗原、不規則抗體陽性等，其占比分別為19.57%、15.22%、13.04%、15.22%，這主要是因為ABO正、反定型檢測時采用的反定型細胞以混合細胞為主，ABO以外抗原成分相對復雜，一旦血液標本血清中存在不規則抗體或自身抗體，容易導致反定型細胞發生凝集反應，對血型鑒定結果造成影響，這提示在ABO血型鑒定過程中，應注意對AB亞型、弱A抗原、弱B抗原、不規則抗體陽性等問題予以重視，嚴格按照規范流程進行操作，對于存在不規則抗體的血液標本，應在對其不規則抗體進行鑒定的基礎上，選用與不規則抗體相應抗原陰性的紅細胞作為鑒定對照物；在紅細胞洗滌時，應采用溫度為37℃的生理鹽水對紅細胞進行5～6次反復洗滌，直至洗滌到顯微鏡下未出現紅細胞凝集后才可進行ABO血型正、反定型檢測；對于含自身抗體或AB亞型的血清標本，其紅細胞容易發生致敏效應，該類血液標本的鑒定較為困難，因此，在這類血清標本的血型正、反型進行檢測時，往往會出現血清學檢測結果誤差或疑問，此時，應適當結合分子生物學基因分型技術進行輔助鑒定，以進一步減少其檢測誤差，提高血型正、反型鑒定的準確性[14-18]。

綜上所述，采用鹽水試管法、聚凝胺法、吸收放散試驗聯合檢測對ABO疑難血型進行鑒定，能夠準確鑒定血型正、反型，對于部分ABO正、反型檢測較為困難的血液標本，可適當結合分子生物學基因分型技術進行輔助鑒定，以對ABO疑難血型進行快速準確的鑒定，避免ABO疑難血型鑒定結果受到自身抗體、不規則抗體等干擾。

[參考文獻]

[1]馬紅麗，贠中橋，楊波，等.ABO疑難血型3步分析法實踐應用[J].臨床血液學雜志，2011，24（2）：75-77.

[2]Yoneyama T，Hatakeyama S，TobisawaY，et al.Blood group antigen-targeting peptide suppresses anti-blood group antibody binding to antigen in renal glomerular capillaries after ABO-incompatible blood reperfusion[J].Transplantation，2013， 95（3）：418-425.

[3]伍鋼，杜海林.ABO疑難血型鑒定方法的建立與應用[J].臨床輸血與檢驗，2015，17（1）：68-70.

[4]胡曉玉，吳學忠，呂蓉，等.83例疑難ABO血型鑒定及分析[J].國際檢驗醫學雜志，2013，34（18）：2396-2397.

[5]華洪葳，宿軍，楊春晴，等.54例無償獻血者ABO疑難血型檢測結果分析[J].中國輸血雜志，2015，28（12）：1509-1511.

[6]黃璐，歐小懂，古力，等.ABO疑難血型鑒定情況分析[J].中國實驗診斷學，2014，18（7）：1190-1191.

[7]臨床輸血規范流程協作組.紅細胞ABO疑難血型檢測分析與記錄流程[J].中國輸血雜志，2014，27（2）：127-129.

[8]王峰，趙蒲宇，蘭炯采，等.ABO疑難血型三步分析法的臨床應用[J].中國輸血雜志，2012，25（5）：459-460.

[9]王欣，劉澤林，盧博，等.血液病性貧血患者紅細胞參數的分布規律及其相互關系[J].中國醫藥科學，2015，5（14）：171-173.

[10]Berséus O，Boman K，Nessen SC，et al.Nessen et al.Risks of hemolysis due to anti-A and anti-B caused by the transfusion of blood or blood components containing ABO-incompatible plasma[J].Transfusion，2013，53（Suppl 1）：S114-S123.

[11]蘭炯采，陳靜嫻，馬紅麗，等.推薦ABO疑難血型三步分析法[J].中國輸血雜志，2010，23（3）：165-168.

[12]陳志忠，廖揚勛，陳尚良，等.PCR-SSP基因分型技術在ABO疑難血型定型中的應用[J].現代檢驗醫學雜志，2011， 26（4）：53-55.

[13]鐘青，許業棟.骨髓形態檢驗在難治性貧血與巨幼細胞性貧血鑒別診斷中的臨床價值[J].中國醫藥科學，2016， 6（7）：172-174.

[14]蘇明珍，黃勁柏，陸雯靜，等.輕型α地中海貧血與缺鐵性貧血的臨床鑒別[J].中國醫藥科學，2015，5（12）：10-12.

[15]夏富益.紅細胞ABO疑難血型檢測分析與處理方案[J].當代醫學，2015，21（35）：77-78.

[16]范瑾，張玨.ABO血型鑒定中正反定型不一致時的分析與探討[J].上海醫藥，2013，34（17）：37-39.

[17]楊松.南充市無償獻血者ABO定型困難原因分析[J].川北醫學院學報，2016，31（4）：579-581.

[18]汪芳.疑難血型的臨床分析和處理方法[J].國際檢驗醫學雜志，2013，34（23）：3254-3255.

（收稿日期：2016-12-22 本文編輯：祁海文）