血清DNMT1、DNMT3a、DNMT3b和HDAC1蛋白在肺癌患者中的表達(dá)及意義

肖海勵(lì)　王　靜魏海霞　(鄭州大學(xué)附屬鄭州中心醫(yī)院呼吸內(nèi)科，河南　鄭州　450000)

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血清DNMT1、DNMT3a、DNMT3b和HDAC1蛋白在肺癌患者中的表達(dá)及意義

肖海勵(lì)王靜1魏海霞(鄭州大學(xué)附屬鄭州中心醫(yī)院呼吸內(nèi)科，河南鄭州450000)

〔摘要〕目的探討血清甲基化轉(zhuǎn)移酶(DNMT)1、DNMT3a、DNMT3b和組蛋白脫乙酰酶(HDAC1)蛋白在肺癌患者中的表達(dá)及意義。方法選取2013年2月至2014年10月于該院呼吸內(nèi)科收治的肺癌患者104例，按其組織學(xué)分型分別為鱗癌35例，腺癌39例，其他類型30例，正常對(duì)照組選擇100例健康志愿者。所有入選者均于清晨休息狀態(tài)下采集空腹外周靜脈血3 ml，采用酶聯(lián)免疫法測(cè)定血清中DNMT1、DNMT3a、DNMT3b和HDAC1的表達(dá)。結(jié)果實(shí)驗(yàn)組患者DNMT1、DNMT3a、DNMT3b和HDAC1的蛋白表達(dá)水平均高于對(duì)照組(P＜0. 05);各肺癌分型中，患者的DNMT1、DNMT3a、DNMT3b和HDAC1的蛋白表達(dá)水平差異小(P＞0. 05);通過Logistic回歸分析顯示其與肺癌的發(fā)生發(fā)展關(guān)系密切。結(jié)論肺癌患者血清DNMT1、DNMT3a、DNMT3b和HDAC1蛋白表達(dá)升高，并隨著肺癌的發(fā)生發(fā)展升高，對(duì)臨床有指導(dǎo)意義，值得臨床推廣。

〔關(guān)鍵詞〕甲基化轉(zhuǎn)移酶;組蛋白脫乙酰酶;肺癌

1鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院呼吸內(nèi)科

第一作者:肖海勵(lì)(1977-)，男，碩士，主治醫(yī)師，主要從事呼吸系統(tǒng)疾病及肺癌的研究。

肺癌亦稱支氣管癌，常見有鱗形細(xì)胞癌和腺癌兩種〔1，2〕。因至今尚不明確。研究發(fā)現(xiàn)，甲基化轉(zhuǎn)移酶(DNMT)1、DNMT3a、DNMT3b和組蛋白脫乙酰酶(HDAC1)的活性異常導(dǎo)致了腫瘤的發(fā)生，但其在肺癌發(fā)展過程中相關(guān)的利害因素研究較少。為了選擇合理的治療方案治療肺癌，改善其預(yù)后。肺癌患者血清DNMT1、DNMT3a、DNMT3b和HDAC1蛋白濃度變化對(duì)肺癌的意義。

1　資料與方法

1. 1一般資料選取2013年2月至2014年10月于我院呼吸內(nèi)科收治的肺癌患者104例，實(shí)驗(yàn)組按其組織學(xué)分型分別為鱗癌35例，男19例，女16例，年齡(60. 3±10. 7)歲;腺癌39例，男22例，女17例，年齡(57. 8±8. 21)歲;其他類型30例，男17例，女13例，年齡(62. 29±11. 24)歲;正常對(duì)照組選擇100例健康志愿者，男53例，女47例，年齡(57. 14±9. 33)歲。兩組患者的性別組成、年齡、職業(yè)等一般資料差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0. 05)。

1. 2納入標(biāo)準(zhǔn)肺癌患者入選條件滿足《內(nèi)科學(xué)》擬定的肺癌診斷標(biāo)準(zhǔn)，經(jīng)病理或細(xì)胞學(xué)證實(shí)的初治肺癌，患者均未接受放、化療和免疫治療。患者自愿參與本實(shí)驗(yàn)，并簽署知情同意書。1. 3排除標(biāo)準(zhǔn)排除急慢性感染、肝臟疾病、腎動(dòng)脈狹窄、心力衰竭、糖尿病、低血容量、多器官功能衰竭及接受過放、化療的患者。排除不愿意接受調(diào)查者和交流有障礙者。

1. 4觀察指標(biāo)及檢測(cè)方法采集所有入選者均于清晨休息狀態(tài)下空腹外周靜脈血3 ml，分離血清于EP管中，－80℃冰箱凍存。試劑盒北京鼎國(guó)生物研究有限公司DNMT1、DNMT3a、DNMT3b和HDAC1試劑盒的說明采用酶聯(lián)免疫法測(cè)定血清中DNMT1、DNMT3a、DNMT3b和HDAC1的表達(dá)。

1. 5統(tǒng)計(jì)學(xué)方法應(yīng)用SPSS19. 0軟件進(jìn)行t檢驗(yàn)、χ2檢驗(yàn)及Logistic回歸分析。

2　結(jié)果

2. 1兩組DNMT1、DNMT3a、DNMT3b和HDAC1的蛋白表達(dá)水平實(shí)驗(yàn)組患者DNMT1〔(24. 89±4. 91)μg/L〕、DNMT3a 〔(598. 14±89. 73)μg/L〕、DNMT3b〔(257. 82±63. 56)μg/L〕和HDAC1〔(451. 12±102. 26)μg/L〕的蛋白表達(dá)水平均高于對(duì)照組〔(51. 19±6. 43)μg/L，(411. 16±102. 21)μg/L，(128. 34± 37. 74)μg/L，(275. 38±87. 74)μg/L〕(P＜0. 05)。

2. 2各臨床分型的肺癌患者DNMT1、DNMT3a、DNMT3b和HDAC1的蛋白表達(dá)水平鱗癌患者、腺癌患者以及其他類型的肺癌患者血清DNMT1、DNMT3a、DNMT3b和HDAC1的蛋白表達(dá)水平差異小，無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0. 05)。見表1。

表1　各臨床分型的肺癌患者DNMT1、DNMT3a、DNMT3b和HDAC1的蛋白表達(dá)水平(x±s，μg/L)

2. 3相關(guān)性分析以血清中DNMT1、DNMT3a、DNMT3b、HDAC1作為因變量，結(jié)果表明DNMT1、DNMT3a、DNMT3b、HDAC1與肺癌發(fā)生發(fā)展呈密切正相關(guān)(r = 0. 231 4、0. 142 5、0. 215 2、0. 182 6，均P＜0. 01)。

3　討論

肺癌是常見的惡性腫瘤。其中鱗形細(xì)胞癌約占肺癌的50%，一般發(fā)展速度比較緩慢，病程較長(zhǎng)，對(duì)放射和化學(xué)療法較敏感〔3〕。多數(shù)腺癌起源于較小的支氣管，發(fā)病率比鱗癌低，發(fā)病年齡較小，為周圍型肺癌，早期一般沒有明顯的臨床癥狀〔4〕。由于自然環(huán)境、醫(yī)療費(fèi)用、工作環(huán)境、對(duì)疾病的認(rèn)識(shí)不夠等原因，許多患者患病后不能及時(shí)就醫(yī)，失去了早期診斷、早期治療的最佳時(shí)期。近50年來肺癌的發(fā)病率顯著增高〔5〕。根據(jù)2010年的衛(wèi)生統(tǒng)計(jì)年鑒顯示，2005年肺癌死亡率占我國(guó)惡性腫瘤死亡率榜首〔6〕。肺癌病人大多數(shù)是男性，男女比例約為4～8∶1，患者年齡大多在40歲以上。鱗癌的5年生存率為15. 3%，腺癌為11. 6%〔7〕。DNMT為DNA甲基化關(guān)鍵酶〔8〕。目前發(fā)現(xiàn)的DNMT家族，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了3種有活性的DNMT，即DNMT1、DNMT3a和DNMT3b，其在DNA甲基化及其維持過程中發(fā)揮了重要作用〔9〕，幾乎可在所有的正常組織中呈共同表達(dá)〔10〕。腫瘤患者體內(nèi)的DNMT1、DNMT3a和DNMT3b蛋白表達(dá)均顯著增高，并且DNMT1蛋白的高表達(dá)提示患者預(yù)后不良〔11〕。HDAC1 是1996年由美國(guó)哈佛大學(xué)發(fā)現(xiàn)的第一個(gè)組蛋白去乙酰化的酶，具有抑制基因轉(zhuǎn)錄的作用〔12〕。DNMT1抑制常氧條件下腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)〔13〕，在細(xì)胞的分化和周期進(jìn)展過程中也發(fā)揮了重要作用，與DNA結(jié)合后會(huì)使染色質(zhì)呈阻抑結(jié)構(gòu)，抑制基因的轉(zhuǎn)錄，導(dǎo)致腫瘤發(fā)生。

本研究結(jié)果證明肺癌患者血清中的DNMT1、DNMT3a、DNMT3b和HDAC1呈高表達(dá)，而在其各分型中無差異，并且隨著肺癌的發(fā)生發(fā)展升高，對(duì)臨床有指導(dǎo)意義，值得臨床推廣。

4參考文獻(xiàn)

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13 Robertson KD. DNA methylation and human disease〔J〕．Nat Rev Genet，2005; 6(8): 597-61.

〔2015-05-11修回〕

(編輯袁左鳴/滕欣航)

通訊作者:王靜(1958-)，女，博士，博士生導(dǎo)師，主任醫(yī)師，主要從事呼吸內(nèi)科疾病研究。

〔文章編號(hào)〕1005-9202(2015)20-5825-02;

doi:10. 3969/j. issn. 1005-9202. 2015. 20. 068

〔文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼〕A

〔中圖分類號(hào)〕R734. 2