徐 玉 石鎮東 鄭小偉
浙江中醫藥大學基礎醫學院 浙江 杭州 310053
中藥研究
液質聯用測定芍藥甘草湯中3種有效成分的含量*
徐 玉 石鎮東 鄭小偉#
浙江中醫藥大學基礎醫學院 浙江 杭州 310053
目的:采用高效液相色譜聯用三重四級桿質譜(HPLC-MS/MS)測定芍藥甘草湯中芍藥苷、甘草酸及甘草次酸三種成分的含量。方法:色譜柱采用Eclipse Plus C18(2.1mm×50mm,1.8mm);流動相為0.1%甲酸乙腈和0.1%甲酸水溶液,流速設定為0.3mL·min-1,柱溫為35℃,進行梯度洗脫。根據待檢測化合物的性質,優化相關定量分析的質譜參數,多重反應監測(MRM),進行數據的采集。結果:芍藥甘草湯中芍藥苷、甘草酸及甘草次酸的含量分別為:160.46±3.82mg·ml-1,115.66±3.13mg·ml-1,8.34±0.34mg·ml-1。結論:本實驗精密性良好,重現性高,分析方法準確,定量數據可靠。
HPLC-MS/MS 芍藥甘草湯 芍藥苷 甘草酸 甘草次酸
芍藥甘草湯是《傷寒論》中配伍嚴謹、藥簡效佳的經典方劑,為后世醫家所推崇。本方僅由芍藥、甘草兩味中藥組成,具有柔肝止痙、緩急止痛的功效[1]。對芍藥甘草湯入血原型成分進行測定,發現芍藥甘草湯的藥效物質基礎為芍藥苷、甘草酸、甘草次酸[2]。本文采用高效液相色譜聯用三重四級桿質譜(HPLC-MS/MS)同時測定芍藥甘草湯中芍藥苷、甘草酸和甘草次酸的含量,為芍藥甘草湯藥效物質研究提供理論基礎。
1.1 實驗儀器:1290 HPLC-6460 QQQ/MS(Agilent,美國);BS124S電子分析天平(賽利多斯科學儀器有限公司);Milli-Q Biocel純水儀(美國Millipore公司);SHB-Ⅲ循環水式多用真空泵(鄭州長城科工貿有限公司);RV10旋轉蒸發儀(德國IKA公司);Freezone 6L冷凍干燥機(英國Labconco公司)。
1.2 實驗材料:甲酸(色譜級)購于阿拉丁公司;……