UPLC法測定氫溴酸加蘭他敏片的含量

龐 滂 牛建功

（西安楊森制藥有限公司，陜西 西安 710043）

UPLC法測定氫溴酸加蘭他敏片的含量

龐 滂 牛建功

（西安楊森制藥有限公司，陜西 西安 710043）

目的建立氫溴酸加蘭他敏片的含量的UPLC方法。方法采用Waters ACQUITY UPLC BEH C18色譜柱（2.1 mm×50 mm，1.7 μm），磷酸氫二鈉緩沖液-甲醇（95∶5）和乙腈-甲醇（95∶5）為流動相，梯度洗脫，流速為0.6 mL/min，檢測波長為230 nm，柱溫35 ℃。結(jié)果氫溴酸加蘭他敏對照品溶液線性范圍為：0.1～150 μg/mL，r=0.9999（n=9）；回收率為98.5%～100.2%，RSD為0.6%（n=6）。結(jié)論UPLC法簡便、靈敏、準確、重復性好，可用于氫溴酸加蘭他敏片的質(zhì)量控制。

氫溴酸加蘭他敏片；超高效液相色譜法；含量

氫溴酸加蘭他敏片是用于治療輕度到中度阿爾茨海默型癡呆癥狀[1]，其主要成分都為氫溴酸加蘭他敏。采用超高效液相色譜法（UPLC）同時測定氫溴酸加蘭他敏片中氫溴酸加蘭他敏的含量，結(jié)果滿意，該法可用于控制制劑的質(zhì)量。

1 儀器與試藥

Waters ACQUITY型UPLC，氫溴酸加蘭他敏對照品（中國藥品生物制品檢定所，批號為100050-200802，校正因子：1.000）；磷酸氫二鈉（縮寫DSP，分析純）；乙二胺四乙酸二鈉（縮寫EDTA，分析純）；乙腈（色譜純）；甲醇（色譜純）；氫溴酸加蘭他敏片（西安楊森制藥有限公司，批號為100414298）。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件。色譜柱：Waters ACQUITY UPLC BEH C18色譜柱 (2.1 mm ×50 mm，1.7 μm）；流動相：0.03 mol/L DSP緩沖液pH6.5-甲醇（95∶5）和乙腈-甲醇（95∶5）為流動相，梯度洗脫（表1）；柱溫：35 ℃；流速：0.6 mL/min；檢測波長：230 nm；進樣量：2 μL。

2.2 溶液制備：取氫溴酸加蘭他敏對照品適量，精密稱定，加0.1 mol/L EDTA溶液-甲醇（95∶5）制成0.6 mg/mL的溶液作為對照品溶液。取氫溴酸加蘭他敏片劑適量，按規(guī)格用0.1 mol/L EDTA溶液-甲醇（95∶5）制成0.6 mg/mL的溶液作為氫溴酸加蘭他敏片的供試品溶液。按照處方及工藝制備不含氫溴酸加蘭他敏的空白樣品適量，照上述方法制備成空白輔料溶液。

2.3 方法學考察

2.3.1 專屬性試驗：陰性對照品溶液測定結(jié)果表明，在與氫溴酸加蘭他敏的保留時間相應位置上無吸收，表明其他成分對本品的含量測定無干擾，方法專屬性良好（圖1）。

圖1 超高效液相色譜圖

2.3.2 線性關(guān)系考察：分別稱取氫溴酸加蘭他敏對照品適量，分別制成150、125、100、50、25、10、5、1、0.1 μg/mL系列溶液，進樣量2 μL。按照上述色譜條件測定峰面積，以峰面積對溶液質(zhì)量濃度進行線性回歸，得回歸方程Y=5×106X+680.34，r=0.9999（n=9）。結(jié)果表明，氫溴酸加蘭他敏質(zhì)量濃度在0.1～150 μg/mL與峰面積線性關(guān)系良好。

2.3.3 重復性試驗：取供試品溶液6份，依法測定。測得RSD分別為0.6%（n=6），表明方法重復性良好。

2.3.4 穩(wěn)定性試驗：取供試品溶液1份，在制備后0、4、8、24、48 h時進樣測定。測得RSD分別為0.2%，表明供試品溶液在48 h內(nèi)基本穩(wěn)定。

2.3.5 中間精密度試驗：取供試品溶液6份，分別由A、B、C 3人分別在不同的時間用同一臺設備，依法測定。測得RSD分別0.6%，表明中間精密度良好。

2.3.6 回收率試驗：取空白樣品6份，分別精密加入氫溴酸加蘭他敏對照品適量，依法測定。測得回收率分別為為99.5%～101.4%，RSD為0.7%（n=6）。

表1 梯度表

2.3.7 含量測定：取“溶液制備”下對照品溶液和供試品溶液，按上述色譜條件進樣5 μL，按外標法計算其標示含量，測得結(jié)果為：片劑97.8%，RSD為0.2%（n=6）；乳膏劑100.4%，RSD為0.3%（n=6）；和2%洗劑103.4%，RSD為0.7%（n=6）。

3 討 論

3.1 流動相梯度比例的選擇：對流動相梯度比例進行了系列試驗，結(jié)果表明選用0.03 mol/L DSP緩沖液pH6.5-甲醇（95∶5）和乙腈-甲醇（95∶5）的梯度比例洗脫最佳。

3.2 檢測波長和柱溫的選擇：經(jīng)試驗表明，氫溴酸加蘭他敏在230 nm處峰形最好，且在柱溫35 ℃時分離度和峰形最佳。

3.3 輔料的影響：專屬性試驗結(jié)果表明，空白輔料對氫溴酸加蘭他敏片的含量測定無影響。

3.4 小結(jié)：實驗表明，采用UPLC方法對氫溴酸加蘭他敏進行含量測定，快速、簡便、靈敏、重現(xiàn)性好，利于更好地控制產(chǎn)品質(zhì)量。

[1] 國家藥典委員會.中國藥典(二部)[M].2010版.北京：中國醫(yī)藥科技出版社,2010：781.

Determination of Assay in Galantamine Hydrobromide tablets by UPLC

PANG Pang, NIU Jian-gong
(Xian-Janssen Pharmaceutical Ltd., Xi’an 710043, China)

ObjectiveTo establish a UPLC method for determination of galantamine hydrobromide tablets.MethodsUse Waters ACQUITY UPLC BEH C18column (2.1 mm×50 mm, 1.7 μm), gradient elution with the mobile phase consisted of di-sodium hydrogen phosphate buffer solution-methanol (95∶5) and acetonitrile-methanol (95∶5), the fl ow rate was 0.6 mL/min, detection wavelength at 230 nm, the column temperature was 35 ℃。ResultsThe linear range of the method was 0.1-150 μg/mL, r=0.9999 (n=9), the recovery was 98.5%-100.2%, with RSD of 0.6% (n=6).ConclusionThe UPLC method is simple, sensitive, and accurate and can be used for the determination of galantamine hydrobromide tablets.

Galantamine hydrobromide tablets; Ultra performance liquid chromatography; Content

R917

B

1671-8194（2017）09-0012-02