三陰性乳腺癌中p53和Ki67的表達情況及臨床意義

蔣麗 張建平

·論著·

三陰性乳腺癌中p53和Ki67的表達情況及臨床意義

蔣麗 張建平

目的 研究三陰性乳腺癌中p53和Ki67的表達情況及臨床意義。方法 選擇接受治療的經病理確診為浸潤性乳腺癌患者102例，隨機分為2組，其中三陰性乳腺癌51例(觀察組)，非三陰性乳腺癌51例(對照組)，比較2組患者p53和Ki67的陽性表達情況，分析三陰性乳腺癌p53和Ki67表達與年齡、組織學分級、脈管浸潤、腫瘤直徑以及淋巴結轉移之間的關系，同時研究p53和Ki67表達與乳腺癌生存率之間的相關性。結果 觀察組患者的p53和Ki67的陽性表達率高于對照組患者，差異有統計學意義(P<0.05)。觀察組的p53表達與組織學分級、脈管浸潤、腫瘤直徑、淋巴結轉移有密切聯系(P<0.05)，Ki67表達與組織學分級有密切聯系(P<0.05)。102例浸潤性乳腺癌患者中，p53表達陽性的生存率低于p53表達陰性者，且Ki67表達陽性的生存率低于Ki67表達陰性者，差異有統計學意義(P<0.05)。三陰性乳腺癌中p53和Ki67為陽性患者的生存率低于陰性表達者，差異有統計學意義(P<0.05)。結論 三陰性乳腺癌中p53和Ki67的陽性表達率較高，p53和Ki67的表達情況對腫瘤增殖能力、腫瘤惡性程度以及預后有著重要意義。

三陰性乳腺癌；p53；Ki67；治療結果

三陰性乳腺癌是乳腺癌的類型之一，占乳腺癌所有病例的20%左右，主要是指患者孕激素受體(PR)、雌激素受體(ER)和人類表皮生長因子受體2(HER-2) 均呈現出陰性[1]。三陰性乳腺癌具有組織學分級高、惡性程度較高、容易轉移以及預后差的特點，因而患者的復發率高、生存率低，是臨床上十分棘手的疾病。現階段，臨床上對三陰性乳腺癌仍缺乏有效的治療方案，有研究發現三陰性乳腺癌與p53、Ki67表達狀況之間存在密切的聯系，通過了解p53和Ki67的表達有利于評估患者的腫瘤增殖能力、腫瘤惡性程度以及預后情況，具有十分重要的臨床意義[2]。本文主要研究三陰性乳腺癌中p53和Ki67的表達情況及臨床意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2013年5月至2015年5月在江蘇省潭陽市人民醫院接受治療的乳腺癌患者102例，均經病理確診為浸潤性乳腺癌。隨機分成2組，每組51例。對照組:年齡31～56歲，平均年齡(41.6±5.9)歲；月經情況：絕經前期41例，絕經后期10例；腫瘤大小：低于2 cm 13例，2～5 cm 15例，超過5 cm 23例；病理類型：浸潤性導管癌40例，浸潤性微乳頭狀癌7例，浸潤性小葉癌4例。觀察組：年齡33～58歲，平均年齡(41.9±5.2)歲；月經情況：絕經前期40例，絕經后期11例；腫瘤大小：低于2 cm 15例，2～5 cm 14例，超過5 cm 22例；病理類型：浸潤性導管癌38例，浸潤性微乳頭狀癌8例，浸潤性小葉癌5例。2組患者年齡、月經情況、腫瘤大小、病理類型比較，差異無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。見表1。

1.2 納入與排除標準

1.2.1 納入標準：女性患者；乳腺癌的組織病理學分級G2～G3；無精神疾病，認知功能正常者；簽署知情同意書且積極配合者。

1.2.2 排除標準：精神障礙者；不配合研究者；嚴重臟器功能異常者。

1.3 方法 接受新輔助化療的乳腺癌患者于化療前通過粗針穿刺的方式收集癌組織標本，而未接受新輔助化療的乳腺癌患者則是在手術過程中收集癌組織標本。將標本放置在10%甲醛中固定，通過免疫組織化學二步法展開測定。病理標準常規處理，片厚切成3μm，脫蠟水化，置于枸櫞酸中煮沸8min，然后保溫10min左右，待其冷卻后滴加鼠抗人Ki67單克隆抗體和鼠抗人p53單克隆抗體(均由上海賓智生物科技有限公司生產提供)，置于溫度控制在5℃的濕盒內過夜，第2天應用磷酸緩沖液水洗，然后放置生物素標記的二抗，并且在室溫下孵育20min，室溫下通過二氨基聯苯胺(DAB)顯色10min，再次使用磷酸緩沖液沖洗，最后蘇木精復染并封片。測定過程中均包含陽性對照，將辣根酶標記鏈霉卵白素作為陰性對照組。細胞核著淺黃色、棕黃色以及棕褐色顆粒可判定為p53和Ki67陽性表達。同時根據陽性細胞的比例計算p53和Ki67的表達程度，其中p53陽性細胞比例0～25%為陰性，0～10%為“-”，10%～25%為“+”，p53陽性細胞比例>25%則為陰性，26%～50%為“++”，而>50%則為“+++”；Ki67陽性細胞的比例>14%屬于高表達，判定為陽性，而Ki67陽性細胞的比例≤14%則屬于低表達，判定為陰性。見圖1、2。

圖1 乳腺癌患者P53的陽性表達(HE×400)

圖2 乳腺癌患者Ki-67的陽性表達(HE×400)

1.4 觀察指標 比較2組患者p53和Ki67的陽性表達情況；分析三陰性乳腺癌p53和Ki67表達與年齡、組織學分級、脈管浸潤、腫瘤直徑以及淋巴結轉移之間的關系；同時研究p53和Ki67表達與乳腺癌生存率之間的相關性，隨訪時間為3年。

2 結果

2.1 p53和Ki67的陽性表達率比較 觀察組p53和Ki67的陽性表達率高于對照組，差異有統計學意義(P<0.05)。見表2。

2.2p53和Ki67表達與相關因素的關系 三陰性乳腺癌患者的p53表達與組織學分級、脈管浸潤、腫瘤直徑、淋巴結轉移有密切聯系(P<0.05)，Ki67表達與組織學分級有密切聯系(P<0.05)。見表3。

表2 p53和Ki67的陽性表達率比較 n=51,例(%)

表3 p53和Ki67表達與相關因素的關系 例(%)

3 討論

三陰性乳腺癌的發病率相對較低，約占乳腺癌的15%～25%[3]。由于三陰性乳腺癌PR、ER和HER-2均為陰性的特點[4]，使得患者無法接受針對HER-2 陽性的靶向治療和激素受體PR、ER的內分泌治療[5]，目前臨床上缺乏標準的治療措施，因而醫學界給予高度的重視。有研究認為p53、Ki67高表達是三陰性乳腺癌特點之一，與患者病情的發展、預后存在密切聯系[3]，但是臨床上相關的報道并不多見。

有研究發現乳腺癌患者發生p53基因突變的風險十分高，約為60%左右，然而發生p53突變的乳腺癌腫瘤組織具有侵襲性強、易轉移、預后差的特點，且容易對化療藥物形成耐藥[6]。調查發現乳腺癌p53表達為陽性患者的生存率受到嚴重影響，p53的表達情況是評估患者預后的重要指標[7]。本研究結果顯示三陰性乳腺癌患者的p53的陽性表達率高于非三陰性乳腺癌患者，且三陰性乳腺癌患者的p53表達與組織學分級、脈管浸潤、腫瘤直徑、淋巴結轉移有密切聯系(P<0.05)，一方面提示三陰性乳腺癌的病情更為嚴重，同時說明p53 可能與三陰性乳腺癌轉移率高、易復發、預后差存在關聯[8]。

Ki67抗原屬于核抗原，影響細胞的有絲分裂。Ki67的表達能夠體現出腫瘤的增殖能力，與腫瘤的進展、轉移存在密切聯系，對于乳腺癌患者病情的評估、診治方面具有重要意義[9]。本次研究結果顯示三陰性乳腺癌患者的Ki67的陽性表達率高于非三陰性乳腺癌患者，且三陰性乳腺癌患者的p53表達與組織學分級有密切聯系(P<0.05)，這說明三陰性乳腺癌患者的Ki67表達高，同時Ki67的表達受到組織學分級的影響，充分說明三陰性乳腺癌的細胞分化差、細胞增殖程度相對較高[10]，腫瘤細胞的轉移和侵襲能力更強；Ki67的高表達是三陰性乳腺癌發生與發展的重要因素，也是誘導腫瘤細胞增殖、轉移的關鍵因素，能夠有效評估三陰性乳腺癌的惡性程度[11]。

本研究結果顯示102例浸潤性乳腺癌患者中，p53、Ki67表達陽性患者的生存率低于p53、Ki67表達陰性性患者，且51例三陰性乳腺癌中p53和Ki67為陽性患者的生存率更低，進一步驗證了三陰性乳腺癌的病情更加危重，且p53和Ki67的表達情況直接影響患者的預后。因而臨床上需要重視對乳腺癌患者p53和Ki67表達情況的檢測，尤其是三陰性乳腺癌患者，從而準確掌握患者的病情、制定針對性的治療方案[12]。

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2 管小青，鄭向欣，顧書成，等.三陰性乳腺癌組織中Ki67、p53的表達及臨床意義.現代腫瘤醫學，2015，23:786-791.

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4 閆順朝，焦昕，李悅，等.p53 突變型乳腺癌中Ki67表達水平的臨床意義.現代腫瘤醫學，2014，22:310-313.

5 王齊敏，于香莉，呂麗，等.靶向治療藥物的分子靶點蛋白在三陰性乳腺癌中的表達及臨床意義.腫瘤學雜志，2014，20:710-714.

6 李志華，雷秋模，熊建萍.乳腺癌組織p53表達與新輔助化療療效相關性Meta分析.中華腫瘤防治雜志，2015，22:221-226.

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9 宋魏，于慶凱.三陰乳腺癌組織中Ki67、KAI-1、c-kit的表達及臨床病理意義.中國衛生標準管理，2016，7:182-183.

10 李鎖嚴，李占勇，李蕾，等.PARP-1和p53在三陰性乳腺癌中表達的相關性及臨床意義.現代腫瘤醫學，2014，22:70-74.

11KongB，LvZD，WangY，etal.Down-regulationofBRMS1byDNAhypermethylationanditsassociationwithmetastaticprogressionintriple-negativebreastcancer.Internationaljournalofclinicalandexperimentalpathology，2015，8:11076-11083.

12 程維剛，劉九洲，靳夢琳，等.三陰性乳腺癌中p53蛋白產物的表達及其臨床意義.中華實驗外科雜志，2016，33:939-941.

Expression and clinical significance of p53 and Ki67 in triple negative breast cancer

JIANGLi*,ZHANGJianping.

*DepartmentofPathology,People’sHospitalofLiyangCity,Jiangsu,Liyang213300,China

Objective To investigate the expression and clinical significance of p53 and Ki67 in patients with triple negative breast cancer.Methods One hundred and two patients with infiltrating breast carcinoma who were diagnosed by pathological examination in our hospital were randomly divided into two groups,in which 51 patients with triple negative breast cancer were in observation group,however, the other 51 patients with non-triple negative breast cancer were in control group.The expression levels of p53 and Ki67 were detected and compared between two groups.Moreover the correlation between the expressions of p53,Ki67 and patient’s age,histological grading,vascular invasion,tumor diameter and lymph node metastasis was analyzed,at the same time, the correlation between the expressions of p53,Ki67 and patient’s survival rate was analyzed.Results The positive expression rates of p53 and Ki67 in observation group were significantly higher than those in control group (P<0.05).Theexpressionofp53inobservationgroupwascloselycorrelatedtohistologicalgrading,vascularinvasion,tumordiameterandlymphnodemetastasis(P<0.05),andtheexpressionofKi67wascloselyrelatedwithhistologicalgrading(P<0.05).Among102patientswithinfiltratingbreastcarcinoma,thesurvivalrateinpatientswithpositiveexpressionofp53wasobviouslylowerthanthatofpatientswithnegativeexpressionofp53,moreover,thesurvivalrateinpatientswithpositiveexpressionofki67wassignificantlylowerthanthatofpatientswithnegativeexpressionofKi67 (P<0.05).Amongthepatientswithtriplenegativebreastcancer,thesurvivalrateinpatientswithpositiveexpressionofp53andki67wassignificantlylowerthanthatofpatientswithnegativeexpressionofp53andKi67 (P<0.05). Conclusion The positive expression rates of p53 and Ki67 are higher in patients with triple negative breast cancer,and the expressions of p53 and Ki67 play an important role in the ability of tumor proliferation,malignant degree of tumor and patient’s prognosis.

triple negative breast cancer; p53; Ki67;treatment outcome

10.3969/j.issn.1002-7386.2017.08.012

項目來源：上海市衛生局青年科研項目(編號:2011144)

213300 江蘇省溧陽市人民醫院病理科(蔣麗)；復旦大學附屬華山醫院(張建平)

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A

1002-7386(2017)08-1165-04

2016-11-11)