超氧化物歧化酶聯(lián)合細(xì)胞學(xué)檢查在結(jié)核性和惡性胸腹水鑒別診斷中的應(yīng)用價(jià)值

覃海媚 王榮 王春芳 韋葉生++王茂水++王新鋒++王俊玲++王俊利

【摘要】目的探究超氧化物歧化酶（SOD）檢測(cè)聯(lián)合細(xì)胞學(xué)檢查在結(jié)核性和惡性胸腹水鑒別診斷中的應(yīng)用價(jià)值。

方法利用酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)方法檢測(cè)經(jīng)臨床確診的200例胸腹水（其中惡性102例，結(jié)核性98例）的SOD含量，并與細(xì)胞學(xué)檢查結(jié)果進(jìn)行對(duì)比。

結(jié)果經(jīng)細(xì)胞學(xué)在結(jié)核性和惡性胸腹水中的檢查結(jié)果得出的敏感性為68.6%，特異性為98.0%，準(zhǔn)確度為83.0%；SOD法檢測(cè)得出的敏感性為66.7%，特異度為59.2%，準(zhǔn)確度為63.0%，這兩種方法的準(zhǔn)確度比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.001）；最后經(jīng)SOD聯(lián)合細(xì)胞學(xué)檢查分析得出的敏感性為89.2%，特異性為99.2%，準(zhǔn)確度為94.0%。

結(jié)論SOD檢測(cè)方法可作為細(xì)胞學(xué)的重要輔助手段，臨床上應(yīng)用SOD聯(lián)合細(xì)胞學(xué)方法可以提高鑒別結(jié)核性胸腹水和惡性胸腹水的準(zhǔn)確度。

【關(guān)鍵詞】超氧化物歧化酶；惡性胸腹水；結(jié)核性胸腹水

中圖分類(lèi)號(hào)：R561.3；R442.5文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：ADOI：10.3969/j.issn.10031383.2017.01.009

Application value of superoxide dismutase combined with cytology in differential diagnosis of tuberculous and malignant pleural effusion and ascites

[HJ1*2][HJ]

QIN Haimei1，WANG Rong1，WANG Chunfang1，WEI Yesheng1，WANG Maoshui2，WANG Xinfeng2，WANG Junling2，WANG Junli1▲

（1.Affiliated Hospital of Youjiang Medical University for Nationalities， Baise 533000， China； 2.Shandong Provincial Chest Hospital， Jinan 250013， China）

[HJ1*2][HJ]

【Abstract】ObjectiveTo explore application value of superoxide dismutase （SOD） detection combined with cytology in differential diagnosis of tuberculous and malignant pleural effusion and ascites.

MethodsContent of SOD in 200 cases of confirmed pleural effusion and ascites in clinic （included 102 malignant cases and 98 tuberculosis cases） were detected by enzymelinked immunosorbent assay （ELISA）， and compared with the results of cytology.

ResultsSensitivity， specificity and accuracy of cytological detection in tuberculous and malignant pleural effusion and ascites was 68.6%， 98.0% and 830%， respectively， while the sensitivity， specificity and accuracy of SOD detection was 66.7%， 59.2% and 63.0%， respectively， difference of accuracy of the two methods was statistically significant（P<0.001）. Combined detection of SOD and cytology analysis showed that sensitivity， specificity and accuracy was 892%， 99.2% and 94.0%， respectively.

ConclusionThe detection of SOD can be used as an important auxiliary cytology means， SOD combined with cytology methods can enhance accuracy in the identification of tuberculous and malignant pleural effusion and ascites.

【Key words】SOD； malignant pleural effusion and ascites； tuberculous pleural effusion and ascites

胸腹水產(chǎn)生機(jī)制比較復(fù)雜，可由多種病因引起，通常可分為良性（即非結(jié)核性和結(jié)核性）和惡性。鑒別這兩者的方法普遍是常規(guī)脫落細(xì)胞學(xué)檢查或者各種生化指標(biāo)的檢測(cè)[1]，但易受主客觀(guān)因素影響，敏感性比較低。因此早期準(zhǔn)確地鑒別惡性和結(jié)核性胸腹水對(duì)疾病的治療和預(yù)后具有重要意義。超氧化物歧化酶（Superoxide Dismutase，SOD）是一種抗氧化酶，可催化超氧離子轉(zhuǎn)化為過(guò)氧化物和氧氣，當(dāng)前SOD的檢測(cè)主要應(yīng)用于結(jié)核、腫瘤以及缺血性心腦血管等疾病的診斷。我們課題組的前期研究發(fā)現(xiàn)SOD是鑒別惡性和結(jié)核性胸腔積液的重要診斷指標(biāo)，并明確了其診斷標(biāo)準(zhǔn)[2～3]，但SOD檢測(cè)聯(lián)合細(xì)胞學(xué)分析在惡性和結(jié)核性胸腹水診斷中的應(yīng)用價(jià)值如何，目前鮮見(jiàn)報(bào)道。因此，本研究通過(guò)評(píng)價(jià)細(xì)胞學(xué)、SOD檢測(cè)及兩種方法聯(lián)合在惡性和結(jié)核性胸腹水中鑒別診斷的價(jià)值，進(jìn)而尋找出準(zhǔn)確度高且經(jīng)濟(jì)實(shí)用的聯(lián)合診斷指標(biāo)。

1資料與方法

1.1臨床資料

收集200例于2015年5月～2016年11月在右江民族醫(yī)學(xué)院細(xì)胞室檢查并確診為胸腹水標(biāo)本，其中女性90例，男性110例，年齡為18～82歲，中位年齡58.5歲。200例胸腹水標(biāo)本均經(jīng)過(guò)病理學(xué)分析、實(shí)驗(yàn)室檢查、影像學(xué)或結(jié)合臨床確診，其中102例為惡性胸腹水（肺癌60例，肝癌19例，胃癌10例，胰腺癌6例，賁門(mén)癌4例，乳腺癌2例，卵巢癌1例），98例為結(jié)核性胸腹水。

1.2方法

收集剛?cè)朐呵?4 h內(nèi)未經(jīng)任何治療的患者的新鮮胸腹水約150 ml，混勻后分為兩份，50 ml胸腹水標(biāo)本離心后制成細(xì)胞片再進(jìn)行常規(guī)巴氏染色，以便用于細(xì)胞學(xué)檢查；另一份100 ml胸腹水標(biāo)本備用于SOD檢測(cè)。

1.2.1細(xì)胞學(xué)檢查

經(jīng)3位細(xì)胞學(xué)診斷專(zhuān)家實(shí)行盲法閱片，綜合判定結(jié)果。如存在疑惑的胸腹水標(biāo)本，需由3位細(xì)胞病理學(xué)專(zhuān)家一起會(huì)診判定。診斷結(jié)果可分為2類(lèi)：①見(jiàn)到癌細(xì)胞，即惡性胸腹水；②未見(jiàn)癌細(xì)胞，即非惡性胸腹水。

1.2.2胸腹水SOD的測(cè)定

將收集的100 ml胸腹水經(jīng)低速離心機(jī)1200 r/min離心15 min，吸取500 μL上清液于干凈的EP管中，立即入-80℃中凍存?zhèn)溆茫诿嘎?lián)免疫吸附試驗(yàn)設(shè)備（美國(guó)伯樂(lè)化學(xué)發(fā)光系統(tǒng)）檢測(cè)SOD的水平。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

運(yùn)用 SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行分析，兩組率的比較采用χ2檢驗(yàn)，檢驗(yàn)水準(zhǔn)：α=0.05。

2結(jié)果

2.1細(xì)胞學(xué)檢查結(jié)果

經(jīng)專(zhuān)家盲法閱片及會(huì)診判定，在102例惡性胸腹水中診斷為惡性70例，98例結(jié)核性胸腹水中診斷為良性96例，經(jīng)計(jì)算得出細(xì)胞學(xué)檢查在惡性和結(jié)核性胸腹水中的敏感性為68.6%，特異性為98.0%，準(zhǔn)確度為83.0%。結(jié)果見(jiàn)表1。

2.2SOD檢測(cè)結(jié)果

經(jīng)儀器檢測(cè)后，發(fā)現(xiàn)102例惡性胸腹水中SOD含量為（37.5±14.5） U/L，98例結(jié)核性胸腹水SOD含量為（48.5±18.5） U/L，即結(jié)核性胸腹水中的SOD 含量高于惡性胸腹水，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=4.690，P<0.001）。以SOD含量高于41 U/L判定為結(jié)核性，否則為惡性。因此，在102例惡性胸腹水中68例診斷為惡性，98例結(jié)核性胸腹水中58例診斷為結(jié)核性，可計(jì)算出其敏感性為66.7%，特異性為59.2%，準(zhǔn)確率為63.0%。見(jiàn)表1。

表1惡性和結(jié)核性胸腹水細(xì)胞學(xué)檢查與SOD檢測(cè)的結(jié)果比較[n=200，n（%）]

檢測(cè)方法惡性胸腹水組結(jié)核性胸腹水組敏感度（%）特異度（%）準(zhǔn)確度（%）

+70（68.6）2（2.0）

細(xì)胞學(xué)檢查68.698.083.0

-32（31.4）96（98.0）

+68（66.7）40（40.8）

SOD檢測(cè)66.759.263.0a

-34（33.3）58（59.2）

細(xì)胞學(xué)檢查+91（89.2）1（1.0）

+SOD檢測(cè)89.299.294.0ab

-11（10.8）97（99.0）

注：與細(xì)胞學(xué)檢驗(yàn)比較， aP<0.001；與SOD檢測(cè)比較，bP<0.001。

2.3細(xì)胞學(xué)診斷與SOD檢測(cè)的比較

細(xì)胞學(xué)診斷的準(zhǔn)確率為83.0%，SOD檢測(cè)的準(zhǔn)確率為63.0%，這兩種方法的準(zhǔn)確率比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=20.294，P<0.001）。經(jīng)聯(lián)合分析，其敏感性以這兩種方法中出現(xiàn)一種方法呈陽(yáng)性即診斷為陽(yáng)性；特異性則以?xún)煞N方法中出現(xiàn)有一種為陰性即診斷為陰性。因此，其聯(lián)合后的敏感度為89.2%，特異度為99.2%，準(zhǔn)確度達(dá)到94.0%（見(jiàn)表1）。細(xì)胞學(xué)檢查漏診的32例惡性胸腹水標(biāo)本經(jīng)SOD檢測(cè)20例可判斷為惡性；再經(jīng)過(guò)細(xì)胞學(xué)重復(fù)診斷有15例發(fā)現(xiàn)存在少量的可疑癌細(xì)胞。102例惡性胸腹水SOD的檢測(cè)有34例（34/102，33.3%）為陰性，故SOD的檢測(cè)也存在假陰性；而經(jīng)細(xì)胞學(xué)診斷誤診的2例結(jié)核性胸腹水中，經(jīng)再次SOD檢測(cè)發(fā)現(xiàn)這2例均為結(jié)核性胸腹水，故SOD的檢測(cè)具有良好的特異性。

3討論

臨床上結(jié)核性和惡性胸腹水的鑒別診斷主要依靠臨床細(xì)胞學(xué)病理診斷，但準(zhǔn)確率不高，易漏診或誤診，仍為臨床難題，急需找尋新的診斷標(biāo)志物提高診斷準(zhǔn)確性[1，4]。鑒別胸腹水的方法除了傳統(tǒng)的細(xì)胞學(xué)檢查外，目前已有研究發(fā)現(xiàn)DNA倍體分析、CA125、CYFRA21、CEA等多種腫瘤標(biāo)志物指標(biāo)可有效提高鑒別診斷的準(zhǔn)確率[5]，其中DNA倍體分析準(zhǔn)確率最高，但因?yàn)闄z測(cè)技術(shù)要求和成本高額等原因，臨床應(yīng)用范圍不大，因此，需繼續(xù)研究尋找更好的輔助臨床細(xì)胞學(xué)提高胸腹水性質(zhì)鑒別診斷的準(zhǔn)確性。

超氧化物歧化酶（SOD）為自由基清除劑，廣泛存在于機(jī)體各種組織細(xì)胞中，通過(guò)清除自由基，在防御氧的毒性、抑制老年疾病以及細(xì)胞損傷、預(yù)防衰老等方面起著重要作用。有研究證實(shí)SOD在肺癌[6]、大腸癌[7]、膽管癌[8]、胃癌[9]等多種腫瘤中低表達(dá)，且與其發(fā)生發(fā)展具有一定相關(guān)性。同時(shí)，秦立龍[10]的系列研究表明SOD在結(jié)核性胸腔積液中顯著高表達(dá)，且與ADA聯(lián)合檢測(cè)對(duì)早期結(jié)核病的診斷有較好價(jià)值。我們研究發(fā)現(xiàn)SOD檢測(cè)診斷惡性和結(jié)核性胸腹水時(shí)的敏感度為66.7%，特異度為59.2%，準(zhǔn)確度為63.0%，與秦立龍[10]相關(guān)結(jié)果一致。我們還應(yīng)用SOD檢測(cè)聯(lián)合細(xì)胞學(xué)鑒別診斷惡性和結(jié)核性胸腹水，準(zhǔn)確度大幅提高，達(dá)到94.0%，證實(shí)SOD為輔助臨床細(xì)胞學(xué)診斷胸腹水性質(zhì)的較好指標(biāo)。此外，我們還分析了SOD對(duì)細(xì)胞學(xué)漏診與誤診的輔助診斷價(jià)值，發(fā)現(xiàn)在漏診的32例惡性胸腹水標(biāo)本中，經(jīng)過(guò)SOD檢測(cè)發(fā)現(xiàn)20例為陽(yáng)性結(jié)果；在誤診的2例結(jié)核性胸腹水中，經(jīng)SOD的檢測(cè)發(fā)現(xiàn)這2例SOD含量均明顯高于41 U/L，提示為結(jié)核性。

綜上所述，采用SOD檢測(cè)聯(lián)合細(xì)胞學(xué)診斷的方法可提高惡性和結(jié)核性胸腹水鑒別診斷的準(zhǔn)確度，且具有操作簡(jiǎn)便、成本低廉、適宜推廣等優(yōu)點(diǎn)，更符合臨床診斷需求。今后我們將進(jìn)一步擴(kuò)大研究樣本數(shù)，予以驗(yàn)證和明確對(duì)于不同檢測(cè)要求的最佳SOD診斷點(diǎn)。

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（收稿日期：2016-12-04修回日期：2017-02-10）

（編輯：潘明志）