親水作用色譜固定相的發(fā)展及應(yīng)用研究

李寒松

摘 要：隨著我國科技的不斷發(fā)展與進(jìn)步，親水作用色譜固定相在我國受到廣泛的應(yīng)用，具有十分寬廣的發(fā)展前景。本文我們將從色譜材料結(jié)構(gòu)的角度進(jìn)行探討和研究，同時，本文還對親水作用色譜材料的色譜給予了一定的評價，希望可以對其未來的發(fā)展起到促進(jìn)作用。

關(guān)鍵詞：親水作用色譜；固定相；發(fā)展及應(yīng)用

在親水作用色譜固定相中，反相液相色譜起著十分重要的作用，首先，它是一種高效的液相色譜技術(shù)，其次，它具有著非常好的選擇性和分辨率，應(yīng)用的范圍比較廣，其唯一的不足就是，在一些離子型強(qiáng)極性化合物中，這項技術(shù)很難達(dá)到預(yù)想的效果。而正相色譜技術(shù)雖然可以對極性化合物進(jìn)行良好的分離和保留，但是，它依然有不足之處，即重現(xiàn)性非常差，同時，它的質(zhì)譜和溶劑根本無法友好的同時存在。親水作用色譜固定相的應(yīng)用比較成功，可以說它很好的解決了反相液相色譜和正相液相色存在的問題。

1親水作用色譜固定相的發(fā)展及應(yīng)用

1.1在 HILIC 中，當(dāng)屬純硅膠的應(yīng)用是最為廣泛的，其色譜固定相在酸性環(huán)境當(dāng)中

硅膠柱之所以受到廣泛關(guān)注，是因?yàn)槠渥陨碛泻芏嗟膬?yōu)點(diǎn)，譬如，穩(wěn)定性比較好，和經(jīng)過化學(xué)修飾的HILIC 固定相進(jìn)行比較之后，我們會發(fā)現(xiàn)，硅膠柱根本不可能出現(xiàn)鍵合相流失的現(xiàn)象。同時，它在質(zhì)譜之間的兼容性也非常好，沒有一些不良的現(xiàn)象產(chǎn)生，因此，在對極性藥物進(jìn)行分析、分離的領(lǐng)域中，硅膠柱取得了非常廣泛的應(yīng)用。除此之外，硅膠柱在其他方面也有著普遍應(yīng)用，譬如，在生物學(xué)以及非生物學(xué)領(lǐng)域內(nèi)的藥物檢測中，硅膠柱就起著十分重要的作用。這是因?yàn)楣枘z柱自身所具備的一些優(yōu)勢，首先，它可以對藥物制劑中的一些活性藥物成分，進(jìn)行適當(dāng)?shù)姆治觯缓筮€可以對藥物合成過程中的活性藥物等進(jìn)行分離，雖然硅膠柱的優(yōu)點(diǎn)比比皆是，但是我們不可以否認(rèn)的是，純硅膠柱目前依然存在一定的弊端，其中較為常見的就是，它非常容易對一些強(qiáng)堿性化合物產(chǎn)生不可逆的吸附功能。在中性或者堿性的環(huán)境中，有時候因?yàn)槿狈︽I合相的相應(yīng)保護(hù)，很容易就發(fā)生硅膠顆粒溶解的現(xiàn)象，導(dǎo)致其自身的穩(wěn)定性特別差。在此基礎(chǔ)上，硅膠顆粒得到了研發(fā)和應(yīng)用，而且通過取得的成果我們可以看出，它明顯的提高了硅膠柱在堿性和中性環(huán)境中的穩(wěn)定性。雖然取得的效果比較可觀，但是我們要知道，硅膠柱的親水性是有限的，所以沒有辦法完全的把極性化合物保留下來，而且它的分離選擇性功能也非常差，有待提高。

1.2 其實(shí)，氨基鍵合相在最早的 HILIC 材料的極性鍵合固定相中，采用的就是氨基鍵合相

在HILIC真正問世之前，我們最初在乙腈和水的混合流動相體系中，使用的是氨基修飾硅膠，利用它去對碳水化合物進(jìn)行適當(dāng)?shù)姆蛛x。在對單糖和多糖進(jìn)行分離時，我們通常采用氨基鍵合相，因?yàn)樗梢猿浞值募涌於嘶钕虍悩?gòu)體的轉(zhuǎn)換速度，很大程度上，避免了雙峰的形成，進(jìn)而在分離糖的階段，可以形成比較好的峰型。事實(shí)上，氨基柱和酸性化合物兩者之間，有著非常穩(wěn)固的結(jié)合能力，對一些酸性較強(qiáng)的化合物可以很簡單的就產(chǎn)生死吸附。而且，在分離一些還原糖的時候，醛基和氨基等，很可能就形成了席夫堿，進(jìn)而就造成一些分析物以及鍵合相的性質(zhì)發(fā)生變化。

1.3 如果要分類的話，氰基以及二醇基鍵合相氰基鍵合相算是比較傳統(tǒng)的正相色譜固定相，可以用于HILIC中

不過，就這兩者而言，氰基鍵合相極性相對而言比較弱，所以很難留下親水性化合物。然而，二醇基鍵合相和氰基相比，占有一定的優(yōu)勢，首先它表面的極性就比較強(qiáng)。但是，如果和硅膠柱進(jìn)行比較的話，它的親水性就比較差。由此可知，氰基和二醇基鍵合相各有不足之處，所以應(yīng)用范圍比較狹窄。之后，我們在乙烯基硅的表面，會利用巰基點(diǎn)擊反應(yīng)把 1-硫代甘油和 2-巰基乙醇進(jìn)行適當(dāng)?shù)逆I合，最終使其成為醇羥基型鍵合相。然后我們還需要采取措施，就是把硫氧化，為其形成TGO和MEO的鍵合相做好準(zhǔn)備。通過以往的一些分析，我們可以看出，把亞砜基團(tuán)引入到氰基鍵合相和二醇基鍵合相中，可以非常有效的提升強(qiáng)極性化合物的保留選擇性。

2親水作用色譜材料的色譜評價

近幾年來，隨著HILIC在我國應(yīng)用領(lǐng)域的逐漸擴(kuò)大，其固定相的類型也在日益增多。對于各種不同的色譜固定相而言，它們在分離效率以及分離選擇性方面存在著很大的差異，這種差異的存在，為離子性極強(qiáng)型化合物的分析、分離，提供了很多的選擇方式。同時，我們會適當(dāng)?shù)娜ソY(jié)合反相色譜評價體系，在此基礎(chǔ)上，去設(shè)計HILIC評價體系，經(jīng)過長時間的思索之后，最后將其建立出來。它的基本骨架結(jié)構(gòu)是由極性化合物尿嘧啶構(gòu)成，在這里，堿性選擇性的評價和酸性選擇性的評價所采用的物質(zhì)存在一定的差異，對于色譜柱的堿性選擇性評價而言，我們采用的是含有堿性基團(tuán)的胞嘧啶，而對于酸性選擇性評價而言，我們采用的是含有酸性基團(tuán)的乳清酸，然后，我們需要對色譜分離階段出現(xiàn)的靜電作用進(jìn)行適當(dāng)?shù)乜疾旌脱芯俊τ诓捎媚蜞奏ず桶奏さ纳V柱親水選擇性的檢驗(yàn)中，在分子中要放入糖單元的尿苷和胞苷這兩種物質(zhì)。通過分析這一評價體系，我們可以獲得一些信息，譬如，不同的HILIC色譜柱具有不同的分離選擇性，它可以很好地體現(xiàn)出HILIC材料的色譜峰形以及分離選擇性。不過，我們也必須意識到一個問題，那就是這個色譜評價體系相對而言比較交單，因此對于不同的色譜柱而言，它們之間的作用機(jī)理雖然存在很大的差異，但是依然無法進(jìn)行準(zhǔn)確的體現(xiàn)。所以，在對HILIC材料的未來評價中，我們一定要高度重視發(fā)展有效的色譜評價方法，爭取在這方面取得更大的成就，進(jìn)而為親水作用色譜固定相的發(fā)展提供更多的幫助。

3結(jié)語

隨著我國科研人員對親水作用色譜的深入研究，目前，親水作用色譜已經(jīng)得到了很廣泛的應(yīng)用，受到了各個領(lǐng)域人員的高度重視。親水作用色譜材料對于色譜技術(shù)的發(fā)展具有十分重要的影響，可以說是高效液相色譜的核心部分，起著決定性的作用。眼下雖然我們已經(jīng)擁有了以硅膠為基質(zhì)的親水作用色譜固定相，但是，我們必須要意識到自身存在的不足。只有這樣，才可能進(jìn)一步的取得成就。我們現(xiàn)在的任務(wù)就是，堅持不懈的去研究一種新型的色譜固定相，然后不斷地進(jìn)行完善，使其可以擁有更寬廣的發(fā)展空間。

參考文獻(xiàn)：

[1]劉甜甜，趙珺.親水作用色譜研究及環(huán)糊精固定相的應(yīng)用[J].化學(xué)研究與應(yīng)用，2014，（05）：615-622

[2]用天，吳凡，肖紅斌，萬伯順.木糖醇和麥芽糖醇型親水作用色譜固定相的制備及其分離性能的評價[J].色譜，2015，（09）：910-916

[3]劉士佳，喬曉強(qiáng)，楊艷軍，閆宏遠(yuǎn).新型咪唑嵌合氨基親水作用色譜固定相的制備及其色譜性能[J].色譜，2014，（10）：1079-1083

[4]郭志謀，張秀莉，徐青，梁鑫淼.親水作用色譜固定相及其在中藥分離中的應(yīng)用[J].色譜，2009，（05）：675-681