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親水作用色譜固定相的發展及應用研究

2017-05-09 13:28:20李寒松
速讀·下旬 2016年8期

李寒松

摘 要:隨著我國科技的不斷發展與進步,親水作用色譜固定相在我國受到廣泛的應用,具有十分寬廣的發展前景。本文我們將從色譜材料結構的角度進行探討和研究,同時,本文還對親水作用色譜材料的色譜給予了一定的評價,希望可以對其未來的發展起到促進作用。

關鍵詞:親水作用色譜;固定相;發展及應用

在親水作用色譜固定相中,反相液相色譜起著十分重要的作用,首先,它是一種高效的液相色譜技術,其次,它具有著非常好的選擇性和分辨率,應用的范圍比較廣,其唯一的不足就是,在一些離子型強極性化合物中,這項技術很難達到預想的效果。而正相色譜技術雖然可以對極性化合物進行良好的分離和保留,但是,它依然有不足之處,即重現性非常差,同時,它的質譜和溶劑根本無法友好的同時存在。親水作用色譜固定相的應用比較成功,可以說它很好的解決了反相液相色譜和正相液相色存在的問題。

1親水作用色譜固定相的發展及應用

1.1在 HILIC 中,當屬純硅膠的應用是最為廣泛的,其色譜固定相在酸性環境當中

硅膠柱之所以受到廣泛關注,是因為其自身有很多的優點,譬如,穩定性比較好,和經過化學修飾的HILIC 固定相進行比較之后,我們會發現,硅膠柱根本不可能出現鍵合相流失的現象。同時,它在質譜之間的兼容性也非常好,沒有一些不良的現象產生,因此,在對極性藥物進行分析、分離的領域中,硅膠柱取得了非常廣泛的應用。除此之外,硅膠柱在其他方面也有著普遍應用,譬如,在生物學以及非生物學領域內的藥物檢測中,硅膠柱就起著十分重要的作用。這是因為硅膠柱自身所具備的一些優勢,首先,它可以對藥物制劑中的一些活性藥物成分,進行適當的分析,然后還可以對藥物合成過程中的活性藥物等進行分離,雖然硅膠柱的優點比比皆是,但是我們不可以否認的是,純硅膠柱目前依然存在一定的弊端,其中較為常見的就是,它非常容易對一些強堿性化合物產生不可逆的吸附功能。在中性或者堿性的環境中,有時候因為缺乏鍵合相的相應保護,很容易就發生硅膠顆粒溶解的現象,導致其自身的穩定性特別差。在此基礎上,硅膠顆粒得到了研發和應用,而且通過取得的成果我們可以看出,它明顯的提高了硅膠柱在堿性和中性環境中的穩定性。雖然取得的效果比較可觀,但是我們要知道,硅膠柱的親水性是有限的,所以沒有辦法完全的把極性化合物保留下來,而且它的分離選擇性功能也非常差,有待提高。

1.2 其實,氨基鍵合相在最早的 HILIC 材料的極性鍵合固定相中,采用的就是氨基鍵合相

在HILIC真正問世之前,我們最初在乙腈和水的混合流動相體系中,使用的是氨基修飾硅膠,利用它去對碳水化合物進行適當的分離。在對單糖和多糖進行分離時,我們通常采用氨基鍵合相,因為它可以充分的加快端基差向異構體的轉換速度,很大程度上,避免了雙峰的形成,進而在分離糖的階段,可以形成比較好的峰型。事實上,氨基柱和酸性化合物兩者之間,有著非常穩固的結合能力,對一些酸性較強的化合物可以很簡單的就產生死吸附。而且,在分離一些還原糖的時候,醛基和氨基等,很可能就形成了席夫堿,進而就造成一些分析物以及鍵合相的性質發生變化。

1.3 如果要分類的話,氰基以及二醇基鍵合相氰基鍵合相算是比較傳統的正相色譜固定相,可以用于HILIC中

不過,就這兩者而言,氰基鍵合相極性相對而言比較弱,所以很難留下親水性化合物。然而,二醇基鍵合相和氰基相比,占有一定的優勢,首先它表面的極性就比較強。但是,如果和硅膠柱進行比較的話,它的親水性就比較差。由此可知,氰基和二醇基鍵合相各有不足之處,所以應用范圍比較狹窄。之后,我們在乙烯基硅的表面,會利用巰基點擊反應把 1-硫代甘油和 2-巰基乙醇進行適當的鍵合,最終使其成為醇羥基型鍵合相。然后我們還需要采取措施,就是把硫氧化,為其形成TGO和MEO的鍵合相做好準備。通過以往的一些分析,我們可以看出,把亞砜基團引入到氰基鍵合相和二醇基鍵合相中,可以非常有效的提升強極性化合物的保留選擇性。

2親水作用色譜材料的色譜評價

近幾年來,隨著HILIC在我國應用領域的逐漸擴大,其固定相的類型也在日益增多。對于各種不同的色譜固定相而言,它們在分離效率以及分離選擇性方面存在著很大的差異,這種差異的存在,為離子性極強型化合物的分析、分離,提供了很多的選擇方式。同時,我們會適當的去結合反相色譜評價體系,在此基礎上,去設計HILIC評價體系,經過長時間的思索之后,最后將其建立出來。它的基本骨架結構是由極性化合物尿嘧啶構成,在這里,堿性選擇性的評價和酸性選擇性的評價所采用的物質存在一定的差異,對于色譜柱的堿性選擇性評價而言,我們采用的是含有堿性基團的胞嘧啶,而對于酸性選擇性評價而言,我們采用的是含有酸性基團的乳清酸,然后,我們需要對色譜分離階段出現的靜電作用進行適當地考察和研究。對于采用尿嘧啶和胞嘧啶的色譜柱親水選擇性的檢驗中,在分子中要放入糖單元的尿苷和胞苷這兩種物質。通過分析這一評價體系,我們可以獲得一些信息,譬如,不同的HILIC色譜柱具有不同的分離選擇性,它可以很好地體現出HILIC材料的色譜峰形以及分離選擇性。不過,我們也必須意識到一個問題,那就是這個色譜評價體系相對而言比較交單,因此對于不同的色譜柱而言,它們之間的作用機理雖然存在很大的差異,但是依然無法進行準確的體現。所以,在對HILIC材料的未來評價中,我們一定要高度重視發展有效的色譜評價方法,爭取在這方面取得更大的成就,進而為親水作用色譜固定相的發展提供更多的幫助。

3結語

隨著我國科研人員對親水作用色譜的深入研究,目前,親水作用色譜已經得到了很廣泛的應用,受到了各個領域人員的高度重視。親水作用色譜材料對于色譜技術的發展具有十分重要的影響,可以說是高效液相色譜的核心部分,起著決定性的作用。眼下雖然我們已經擁有了以硅膠為基質的親水作用色譜固定相,但是,我們必須要意識到自身存在的不足。只有這樣,才可能進一步的取得成就。我們現在的任務就是,堅持不懈的去研究一種新型的色譜固定相,然后不斷地進行完善,使其可以擁有更寬廣的發展空間。

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