北沙參莖葉的紫外—可見(jiàn)光譜和薄層色譜鑒別分析

葉國(guó)華+許一平

摘要：采用紫外-可見(jiàn)光譜法分別對(duì)石油醚、乙醚、氯仿、無(wú)水乙醇、甲醇和水6種溶劑的北沙參（Glehnia littoralis）莖葉提取液進(jìn)行紫外-可見(jiàn)光譜掃描，并測(cè)定其吸收峰數(shù)目和峰位置；以不同配比的石油醚-乙醚-冰醋酸為展開(kāi)劑，用硅膠G預(yù)制薄層板，對(duì)上述6種溶劑的北沙參莖葉提取液進(jìn)行薄層展開(kāi)，觀察其成分的分離情況。結(jié)果表明，紫外-可見(jiàn)光譜中，所得的吸收峰數(shù)目及峰位置都有差異；薄層色譜主斑點(diǎn)位置有明顯差異，且集中、分離度好，均能使其成分得到較好的分離。這兩種方法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、靈敏，可用于北沙參莖葉的快速鑒別。

關(guān)鍵詞：北沙參（Glehnia littoralis）莖葉；紫外-可見(jiàn)光譜；薄層色譜；分析

中圖分類號(hào)：S567.5+3；O657.7 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：0439-8114（2017）07-1345-03

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2017.07.037

Ultraviolet-Visible Spectroscopy and Thin-Layer Chromatography Identification of Stems and Leaves of Glehnia littoralis

YE Guo-hua， XU Yi-ping

（Shandong College of Traditional Chinese Medicine， Yantai 264199， Shandong， China）

Abstract：The UV-visible spectra was used to scan the extracts from stems and leaves of Glehnia littoralis with petroleum ether，ethyl ether，chloroform，absolute alcohol，methanol and water，as well as determine the number and position of the absorption peaks. With different ratio of petroleum ether-ethyl ether-glacial acetic acid as developing agent，and using silica gel G to prefabricate thin layer plates，the TLC of the extracts by above 6 kinds of solvent was carried out and the separation of components were observed. The results showed that in UV-visible spectra，there were different number and position of absorption peaks，and the main spot locations had significant differences，with good concentrated and separating degree， both could make a good separation of components of Glehnia littoralis. The two methods were found to be simple，accurate and sensitive，can be used for rapid identification of stems and leaves of Glehnia littoralis.

Key words：stems and leaves of Glehnia littoralis； ultraviolet-visible spectrum（UV-visible spectra）； thin layer chromatography

北沙參（Glehnia littoralis）又名萊陽(yáng)沙參[1]、香草菜根[2]， 性甘味微苦、微寒，歸肺、胃經(jīng)，具有養(yǎng)陰清肺、益胃生津之功效[3]。因傳統(tǒng)藥用部分是根，而其莖葉部分被廢棄。近年來(lái)國(guó)內(nèi)外學(xué)者對(duì)北沙參進(jìn)行了大量的研究[4]。但對(duì)北沙參莖葉的研究報(bào)道很少。本試驗(yàn)主要對(duì)傘形科植物北沙參莖葉的6種溶劑（石油醚、乙醚、氯仿、乙醇、甲醇、水）提取液進(jìn)行UV-Vis吸收光譜和TLC色譜掃描并進(jìn)行研究，為北沙參莖葉的鑒別提供快速、簡(jiǎn)便的方法。也為北沙參莖葉開(kāi)發(fā)利用、擴(kuò)大藥用和食用資源提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 儀器與試藥

紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)UV-2450型，日本島津公司；BSA224S-CW電子天平，德國(guó)賽多利斯公司；101-2A型數(shù)顯電熱鼓風(fēng)干燥箱（上海滬南科學(xué)儀器聯(lián)營(yíng)廠）；超聲波儀（Vltrasonic Cleaner）；電熱恒溫水浴箱，龍口市先科儀器公司；FZ102型微型植物粉碎機(jī)，天津市泰斯特儀器有限公司；硅膠G板，青島海洋化工廠；微量點(diǎn)樣器。

石油醚、乙醚、氯仿、乙醇、甲醇均為分析純，蒸餾水（新制備）。

1.2 方法

1.2.1 樣品的采取 北沙參植株為人工栽培品，經(jīng)山東中醫(yī)藥高等專科學(xué)校劉波教授鑒定為傘形科植物珊瑚菜（Glehnia littoralis Fr.Schmidtex Miq）大紅袍品種。于2015年10月采自山東省萊陽(yáng)市高格莊鎮(zhèn)胡城村，摘下北沙參莖葉，備用。

過(guò)篩→精密稱重→乙醇浸泡12 h→不同條件下超聲處理→趁熱抽濾→旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至干（回收）→定性鑒別→乙醇溶解定容至100 mL容量瓶→測(cè)吸光度。

1.2.2 樣品的制備 北沙參莖葉→洗凈→陰干→60 ℃的干燥箱中干燥48 h→粉碎→過(guò)篩→裝袋備用。

1.2.3 試液的制備 精密稱取上述樣品10 g，準(zhǔn)確加入石油醚（沸程60～90 ℃）200 mL，在75 ℃水浴上進(jìn)行回流提取2 h后過(guò)濾，揮去石油醚，定容于50 mL容量瓶中備用；在殘?jiān)屑尤?00 mL乙醚，在58 ℃水浴上回流提取2 h后過(guò)濾，濾液濃縮定容于50 mL容量瓶中備用；在殘?jiān)屑尤?00 mL氯仿，在60 ℃水浴上回流提取2 h后過(guò)濾，濾液濃縮定容于50 mL容量瓶中備用；在殘?jiān)屑尤?5%乙醇200 mL，85 ℃水浴回流提取2 h后過(guò)濾，濾液濃縮定容于50 mL容量瓶中備用。

另準(zhǔn)確稱取樣品10 g于帶塞的錐形瓶中，精密加入甲醇200 mL，浸泡3 h，超聲提取1 h后過(guò)濾，濾液濃縮定容于50 mL的容量瓶中備用；在殘?jiān)屑尤胝麴s水200 mL，微沸1 h后過(guò)濾，濾液濃縮定容于50 mL的容量瓶中備用。

1.2.4 北沙參莖葉紫外-可見(jiàn)光譜鑒別 用紫外可見(jiàn)吸收分光光度儀，在200～800 nm進(jìn)行掃描測(cè)定。先對(duì)溶劑進(jìn)行基線掃描，然后對(duì)各種提取液進(jìn)行光譜掃描，得到各種提取液的UV-Vis吸收光譜。

1.2.5 北沙參莖葉薄層鑒別 薄層色譜法是一種微量分離分析技術(shù)，設(shè)備簡(jiǎn)單，測(cè)定快速，分離效果好，靈敏度高，適應(yīng)范圍廣，是中藥材有效成分分離、鑒定和雜質(zhì)檢查的有力工具[5]。將上述6種提取液分別點(diǎn)樣10 μL于硅膠G板上，放于盛有不同展開(kāi)劑的展開(kāi)缸中展開(kāi)，上行展開(kāi)15 cm，在熒光燈下觀看。

2 結(jié)果與分析

2.1 北沙參莖葉紫外-可見(jiàn)光譜鑒別

用紫外可見(jiàn)吸收分光光度儀，在200～800 nm進(jìn)行掃描測(cè)定。先對(duì)溶劑進(jìn)行基線掃描，然后對(duì)各種提取液進(jìn)行光譜掃描，得到各種提取液的UV-Vis吸收光譜。光譜情況見(jiàn)圖1至圖6。由圖1至圖6可知，提取液不同，所得的吸收峰數(shù)目及峰位置都有差異。

2.2 北沙參莖葉薄層鑒別

將上述6種提取液分別取10 μL點(diǎn)樣于硅膠G板上，在不同比例的展開(kāi)劑中展開(kāi)，上行展開(kāi)15 cm，在熒光燈下觀看，結(jié)果見(jiàn)圖7和圖8。圖7的展開(kāi)劑為石油醚-乙醚-冰醋酸（30∶5∶1），圖8的展開(kāi)劑為石油醚-乙醚-冰醋酸（5∶5∶1）。比較圖7和圖8可以看出，展開(kāi)劑極性增加，薄層色譜（TLC）中的色斑增多，說(shuō)明提取液中極性大的組分較多。

3 小結(jié)與討論

由紫外-可見(jiàn)吸收光譜特征圖譜數(shù)據(jù)可以看出，不同的提取溶劑提取同一種樣品時(shí)，所得的吸收峰數(shù)目及峰位置都有差異，即所得到的化學(xué)成分不完全相同。在紫外和可見(jiàn)光區(qū)均有吸收，且在可見(jiàn)光區(qū)的吸收光譜有相似之處，在紫外光區(qū)的吸收較為強(qiáng)烈，說(shuō)明北沙參莖葉的物質(zhì)基礎(chǔ)較為豐富。其中，甲醇超聲提取液和石油醚提取液的紫外-可見(jiàn)光譜可供鑒別的吸收峰較多，蒸餾水的超聲提取液吸收峰的吸收度很小，可供鑒別的吸收峰意義不大。

紫外-可見(jiàn)光譜鑒定取樣量少，靈敏性高，為北沙參莖葉的鑒別與質(zhì)量控制提供了新的方法和依據(jù)。

從薄層色譜圖可以看出， 在不同配比的展開(kāi)系統(tǒng)中，乙醚提取液的斑點(diǎn)最多；氯仿提取液和甲醇超聲提取液都至少4個(gè)斑點(diǎn)；乙醇提取液最少3個(gè)斑點(diǎn)；石油醚提取液最少2個(gè)斑點(diǎn)；水超聲提取液斑點(diǎn)最少為1個(gè)。這些構(gòu)成了北沙參莖葉各種提取液的特征色譜。乙醚提取液展開(kāi)斑點(diǎn)數(shù)量最多，分離效果好，因此建議北沙參莖葉的研究中選用乙醚作為提取液。本研究采用硅膠G板，采用不同配比的石油醚-乙醚-冰醋酸作為展開(kāi)劑用于北沙參莖葉成分的分離，分離效果好。

紫外-可見(jiàn)光譜和薄層色譜都能對(duì)樣品進(jìn)行較好的分析，為以后北沙參莖葉的鑒別提供了快速、簡(jiǎn)便的方法。

參考文獻(xiàn)：

[1] 蔡永敏.中藥藥品辭典[M].北京：中國(guó)中醫(yī)藥出版社，1996.

[2] 中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部藥政管理局，中國(guó)藥品生物制品檢定所.中藥材手冊(cè)[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，1959.

[3] 國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典[M].北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2015.

[4] 呂方軍，張欽德.萊陽(yáng)沙參的研究現(xiàn)狀與思考[J].遼寧中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2008，10（5）：146-148.

[5] 王 雷，李 祥，朱 晨.薄層色譜法在中藥定性定量研究中的應(yīng)用[J].天津藥學(xué)，2004，16（8）：50-51.