地中海貧血兒童體內微量元素的探討

劉冰 饒雪飛 曾赤佳

地中海貧血兒童體內微量元素的探討

劉冰 饒雪飛 曾赤佳★

目的 探討地中海貧血兒童全血中鈣、銅、鐵、鎂、鋅、鎘、鉛元素含量，為營養膳食提供依據。 方法 選取2015年1～12月在佛山市禪城區中心醫院門診兒童333例，其中疾病組133例，對照組200例。采用廣東凱普生物科技股份有限公司α和β地中海貧血基因檢測試劑盒進行診斷，采用北京博暉創新光電技術股份有限公司的BH5100T型與H100T型微量元素分析儀測定微量元素含量。 結果 疾病組與對照組微量元素Ca、Fe、Mg、Pb、Zn呈正態分布，而Cd、Cu呈偏態分布。疾病組兒童全血中Ca、Cu、Zn含量明顯高于對照組，而Fe、Mg含量則低于對照組，差異有統計學意義（P＜0.05）。Cd、Pb含量無統計學差異（P＞0.05）。 結論 地中海貧血兒童微量元素鈣、鋅及銅與正常對照相比升高，鐵、鎂降低，提示地中海貧血兒童體內微量元素分布異常，臨床需采取干預措施，避免微量元素異常引發疾病。

兒童；地中海貧血；微量元素

地中海貧血（簡稱地貧）是危害極大的遺傳性溶血性貧血之一，在我國南方特別是廣西、廣東、海南、云南、貴州等地區高發［1］，區域性流行病學調查顯示，兩廣地區地中海貧血病例數占全國的40%以上。由于貧血，地貧患兒生長發育遲緩是常見的并發癥之一［2］，微量元素雖然在人體內的含量不多，但與生存和健康息息相關，攝入過量、不足、不平衡或缺乏都會不同程度地引起人體生理的異常或發生疾病，嚴重者可導致智力低下或發育異常［3］。因此，地中海貧血患兒全血微量元素水平的檢測可以及時發現其異常，通過采取干預措施，可有效避免微量元素異常引發的各類疾病。

1 資料與方法

1.1 研究對象

疾病組：根據《兒科學》（第7版）關于地中海貧血的診斷標準［4］，選取本院2015年1～12月兒保體檢確診為地中海貧血的兒童133例，年齡4～12個月，所有確診為地中海貧血的患兒均無輸血史。對照組：選取本院2015年1～12月兒保體檢年齡介于4～12個月的兒童，按照體檢日期，選取每月就診的前15名兒童，2015年12月選取當月就診的前35名兒童，共200例，該組兒童血常規、生化常規、小便常規均在正常參考范圍，研究對象基本資料見表1。

表1 333例研究對象基本資料Table 1 The basic data of 333 subjects in the study

1.2 方法

1.2.1 地中海貧血基因檢測

采集EDTA抗凝靜脈血2 mL，采用廣東凱普生物科技股份有限公司的α和β地中海貧血基因檢測試劑盒進行檢測。可檢測中國人常見的3種缺失型α地貧（--SEA、-α3.7和-α4.2），2種突變型α地貧（CS、QS）及11種突變型β地貧（CD41-42、CD43、IVS-II-654、CD17、CD14-15、-28、-29、CD71-72、βE、IVS I-1、CD27-28）。

1.2.2 微量元素檢測

采集肝素鈉抗凝靜脈血2 mL，全血鐵、鈣、鋅、鎂和銅采用BH5100T型北京博暉全血多元素分析儀測定；鉛、鎘元素采用BH2100T型北京博暉鎢舟元素分析儀測定，北京博暉生物有限公司提供配套試劑盒。

1.3 判讀標準

此次研究所用的試劑盒采用生物素標記的引物分別對α-珠蛋白基因缺失及基因突變區域和β-珠蛋白基因突變區域進行特異性擴增，將擴增產物與標記不同缺失或突變類型地中海貧血探針的尼龍膜特定位置上，制成檢測膜條，然后通過分子雜交反應及顯色反應，觀察檢測膜條上各位點信號的有無（信號為藍色斑點），判斷該探針是否與PCR產物雜交，從而確定待檢樣品基因型。

1.4 統計學處理

數據分析采用SPSS 17.0統計軟件進行分析，微量元素結果以均值±標準差表示，用Kolmogorov-Smirnov法進行正常態性檢驗，正態分布數據采用t檢驗，偏態分布數據采用Mann-Whitney U檢驗，P＜0.05有統計學意義。

2 結果

2.1 地中海貧血基因類型分型

133例地貧有86例為α地貧，占64.66%，以東南亞缺失雜合子（--SEA/α α）為主；β地貧44例，占33.08%，以β41-42突變雜合子（β41-42/β）為主；α合并β地貧3例，占2.26%。地中海貧血基因類型及構成比結果見表2。

2.2 地中海貧血兒童全血微量元素含量

對兩組兒童的微量元素結果進行正態性檢驗，顯示Ca、Fe、Mg、Pb、Zn呈正態分布，而Cd、Cu呈偏態分布。疾病組兒童Ca、Cu、Pb、Zn高于對照組，而Cd、Fe、Mg則低于對照組，兩組比較Ca、Cu、Fe、Mg、Zn，差異有統計學意義（P＜0.05），而Cd、Pb比較，差異無統計學意義（P＞0.05），見表3。

3 討論

地中海貧血是由于遺傳基因缺陷致使血紅蛋白中一種或一種以上珠蛋白鏈合成缺如或不足所導致的貧血或病理狀態，除了常見的Hb電泳的檢測方法，分子診斷技術對地中海貧血的診斷已十分成熟［5］。本研究通過基因檢測了133例地中海貧血標本，其中α地貧有86例，占64.66%；β地貧有44例，占33.08%；α合并β地貧3例，占2.26%，與林業輝等［6］研究結論相似。

本研究發現，地中海貧血兒童體內微量元素含量的異常主要表現為鈣、銅、鋅元素升高，而鐵、鎂元素降低。其中，鐵、鈣、鎂、銅元素結論與李牡艷等［7］研究一致；鈣、鐵、鎂元素結論與王毅［8］、蔡敏敏等［9］研究一致。

表2 133例地中海貧血基因類型Table 2 The genotype of 133 patients with thalassemia

鐵元素在人體的功能表現有許多方面，鐵缺乏可引起兒童心理活動和智力發育的損害及行為改變，甚至可引起兒童不可逆的認知能力損害。本研究中地貧兒童鐵元素低于對照組（P＜0.05），可能與紅細胞血紅蛋白的珠蛋白肽鏈基因突變有關，導致珠蛋白肽鏈的合成抑制、失衡，引起無效造血和溶血性貧血，從而使地貧兒童對鐵的吸收量增多，由于鐵的利用率很低，因此造成貯存鐵增多而全血中鐵元素含量減少。輕型地貧兒童鐵負荷水平已有明顯升高，若長期不斷攝入鐵，必定會累積更高的鐵負荷，導致鐵在體內的調節失代償［10］，但地貧患兒可能并發缺鐵，地貧并發缺鐵時，貧血的發生率會增高，且加重貧血的程度［11］。因此地貧兒童需密切關注體內鐵負荷的狀態，選擇血清學相關的鐵代謝指標進行監測。

鈣元素主要以骨鹽形式存在于骨骼和牙齒中，是神經傳遞、肌肉收縮、血液凝結、激素釋放和乳汁分泌等所必需的元素，含量不足或過剩都會影響生長發育和健康。地貧兒童全血鈣元素含量高于正常對照組（P＜0.05），可能與兒童過量補鈣存在一定聯系，兒童多鈣使鐵鹽沉淀，妨礙鐵的吸收，引起血紅蛋白的合成減少，導致全血鐵下降，引發貧血［12］。

表3 地中海貧血兒童全血微量元素含量Table 3 The level of trace elements in thalassemia children

本研究顯示，地貧兒童銅元素高于對照組（P＜0.01）。分析原因：第一，地貧在合并缺鐵狀態下，機體內多種依賴銅的活性酶受抑制，反射性地促進其他部位的銅代謝釋放入血以維持重要酶的活性，從而導致血銅升高［12］；第二，銅元素參與多種酶及蛋白的合成，在鐵離子的氧化、運輸、利用及催化血紅蛋白合成方面發揮重要作用［13］，而地貧患者鐵吸收和紅血蛋白合成均是增加的，這導致對銅的吸收增加，最終導致全血銅升高；第三，地貧患者體內存在氧化應激反應，可導致Cu、Zn、SOD代償性升高［13］。

本研究還顯示，地貧兒童鋅元素含量高于對照組（P＜0.05），與以往的研究（無統計學差異）結論［7-9］不一致，查找支持本結論的文獻結論有Kajanachumpol S［14］報道兒童地貧紅細胞鋅升高；人體內鐵和鋅存在協同吸收效應，地貧兒童鐵吸收增加，促進對鋅的吸收增強；地貧患者體內存在氧化應激反應，可導致Cu、Zn、SOD代償性升高［13］。

地貧兒童鎂元素低于對照組（P＜0.05），原因可能為鎂元素同鐵元素均為二價陽離子，地貧兒童鐵元素吸收增加會干擾鎂元素的吸收，導致全血鎂降低。鎘、鉛元素均為有毒元素，危害極大，本次結果顯示地貧兒童與對照組鎘、鉛含量無明顯差異（P＞0.05）。

綜上所述，地貧兒童體內微量元素與正常兒童之間存在明顯的差異，臨床在糾正貧血的同時還應注意微量元素的情況，做到早期測定、合理指導膳食、持續監測，最大程度提高地貧兒童的生存質量。由于個別地中海貧血基因類型病例數量較少，我們將會在日后的工作積累中繼續深入研究地貧患兒不同基因類型分型與微量元素分布情況之間的關系，更加全面地為臨床醫生提供數據資料。

［1］ 林梅雙，許娟.MCV、MCH、MCHC、RDW-SD和HbA2在地貧篩查中的意義［J］.醫學理論與實踐，2014，27（10）：1274-1276.

［2］ M Delvecchio，L Cavallo.Growth and endocrine function in thalassemiama or in childhood and adolescence ［J］.Journal of Endocrinological Investigation，2010，33（1）：61-68.

［3］ 李冰，谷強.微量元素對學齡前兒童身體發育影響研究［J］.中國婦幼保健，2014，29（20）：3287-3288.

［4］ 薛辛東.兒科學［M］.北京：人民衛生出版社，2009：389-393.

［5］ 徐祥虎，朱寶生.珠蛋白生成障礙性貧血的分子診斷研究進展［J］.分子診斷與治療志，2011，3（4）：283-288

［6］ 林業輝，潘志偉，周杏，等.廣東佛山地區兒童地中海貧血基因型分析［J］.貴州醫藥，2015，39（10）：931 -932.

［7］ 李牡艷，陳萍，廖寧，等.地中海貧血兒童全血中6種元素的含量分析［J］.中國兒童保健雜志，2008，16 （3）：333-334

［8］ 王毅，陳燕娜，張力，等.對不同基因型地中海貧血兒童全血中9種金屬元素的研究［J］.臨床血液學雜志（輸血與檢驗版），2011，24（2）：68-71.

［9］ 蔡敏敏，黃鈺君，伍紹國，等.不同基因型地中海貧血患兒全血元素的分析［J］.解剖學研究，2010，32 （1）：25-27.

［10］ 白海波，陳海，歐少鉉，等.健康教育干預對嬰幼兒輕度地中海貧血危險因素的預防研究［J］.臨床醫藥文獻雜志，2014，1（12）：2189-2190.

［11］ 夏威夷，譚蓉，覃西.不同基因型珠蛋白生成障礙性貧血患兒血清鐵代謝指標分析［J］.國際檢驗醫學雜志，2015，36（20）：2947-2949.

［12］ 劉建雷，曾赤佳，趙東，等.輕型地中海貧血孕婦全血元素影響因素的研究［J］.暨南大學學報（自然科學與醫學版），2016，37（3）：267-271，276.

［13］ Mohammadreza Rashidi， Maryam Aboomardani，Maryam Rafraf，et al.Effects of Vitamin E and Zinc Supplementation on Antioxidants in Beta thalassemia major［J］.PatientsIran J Pediatr，2011，21（1）：8-14.

［14］ Kajanachumpol S，Tatu T，Sasanakul W，et al.Zinc and copper status of thalassemic children［J］.Southeast Asian J Trop Med Public Health，1997，8（4）：877-880.

Study on trace elements in thalassemia children

LIU Bing，RAO Xuefei，ZENG Chijia★
（Department of Clinical Laboratory，Chancheng Centre Hospital，The Affiliated of Guangdong Medical University，Foshan，Guangdong，China，528031）

Objective To study the contents of calcium,copper,iron,magnesium,zinc,cadmium in whole blood of children with thalassemia,and to provide the basis for a nutritional diet. Methods From January to December in 2015,333 outpatients in Central Hospital of Foshan Chancheng District were selected, which included 133 cases in the disease group and 200 cases in control group.The α-and β-thalassemia genetic test kit of Hybribio was used for the diagnosis,and trace element content was determined by BH5100T and H100 T trace element analyzer of BoHui. Results The contents of Ca,Fe,Mg,Pb and Zn in 333 subjects were normally distributed,while Cd and Cu were skewed.The levels of Ca,Cu and Zn in the disease group were higher than levels of those in the control group,while the contents of Fe and Mg were lower(P＜0.05).There were no significant differences in the contents of Cd and Pb between the two groups(P＞0.05). Conclusion The levels of calcium,zinc and copper were increased compared with normal elements in thalassemia children, iron and magnesium levels were decreased.It is suggested that the distribution of trace elements in children with thalassemia is abnormal,and clinical intervention measures should be taken to avoid the disease caused by trace elements.

Children;Thalassemia;Trace elements

廣東醫科大學附屬佛山禪城中心醫院檢驗科，廣東，佛山528031

★通訊作者：曾赤佳，E-mail：zcjiacy@126.com