膀胱內(nèi)翻性乳頭狀瘤和膀胱尿路上皮癌CEUS與微血管密度的相關(guān)性

郭素萍，周愛(ài)云，徐 盼，肖 帆

(南昌大學(xué)第一附屬醫(yī)院超聲科，江西 南昌 330006)

膀胱內(nèi)翻性乳頭狀瘤和膀胱尿路上皮癌CEUS與微血管密度的相關(guān)性

郭素萍，周愛(ài)云*，徐 盼，肖 帆

(南昌大學(xué)第一附屬醫(yī)院超聲科，江西 南昌 330006)

目的 探討膀胱內(nèi)翻性乳頭狀瘤(IPB)與膀胱尿路上皮癌的(BUC)CEUS時(shí)間-強(qiáng)度曲線(TIC)參數(shù)與微血管密度(MVD)的相關(guān)性。方法 回顧性分析經(jīng)病理證實(shí)的IPB患者30例和BUC患者50例的臨床和CEUS表現(xiàn)，采用QLab分析軟件獲得IPB和BUC的TIC參數(shù)，包括上升時(shí)間(RT)、平均渡越時(shí)間(MTT)、峰值強(qiáng)度(PI)、半洗漱時(shí)間(TPH)、上升斜率(WIS)、達(dá)峰時(shí)間(TP)、半降支斜率(DS)，并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。對(duì)手術(shù)標(biāo)本進(jìn)行抗CD34因子免疫組化染色測(cè)量MVD，分析CEUS的TIC參數(shù)與MVD的相關(guān)性。結(jié)果 IPB和BUC的CEUS定量參數(shù)中，PI、TPH、TP、DS比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。BUC的MVD明顯高于IPB(P<0.05)。各TIC參數(shù)中，TPH和DS與MVD均存在相關(guān)性(rs=0.74、-0.81，P均<0.05)。結(jié)論 CEUS在IPB與BUC的鑒別診斷中具有一定的臨床價(jià)值；TIC參數(shù)可定量評(píng)估腫瘤內(nèi)微血管生成情況。

乳頭狀瘤，內(nèi)翻性；膀胱尿路上皮癌；微血管密度；造影劑；超聲檢查

根據(jù)膀胱尿路上皮癌惡性程度分級(jí)系統(tǒng)，膀胱尿路上皮腫瘤分為乳頭狀瘤、低度惡性傾向尿路上皮乳頭狀瘤、低分級(jí)和高分級(jí)乳頭狀尿路上皮癌[1]。膀胱尿路上皮癌(bladder urothelial carcinoma， BUC)在膀胱癌病理類型中最常見(jiàn)，約占90%以上，易轉(zhuǎn)移且復(fù)發(fā)率高，預(yù)后差[2]。膀胱內(nèi)翻性乳頭狀瘤(inverted papilloma of bladder， IPB)是一種少見(jiàn)的尿路移行上皮良性腫瘤，不易復(fù)發(fā)和惡變，僅約占膀胱腫瘤的6.0%。由于IPB和BUC的臨床及影像學(xué)表現(xiàn)均有明顯相似之處，術(shù)前IPB易誤診為BUC[3]。近年來(lái)，隨著CEUS技術(shù)的快速發(fā)展，目前已廣泛應(yīng)用于肝臟、甲狀腺等部位的檢查[4-5]，但采用CEUS鑒別IPB和BUC的報(bào)道鮮見(jiàn)。微血管密度(microvessel density, MVD)作為評(píng)價(jià)腫瘤血管生成的一個(gè)重要指標(biāo)，與腫瘤的浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移及預(yù)后有密切關(guān)系[6]。本研究通過(guò)CEUS定量分析IPB和BUC，并探討CEUS與其MVD的相關(guān)性。

1 資料與方法

1.1一般資料 收集2009年9月—2016年3月我院術(shù)前接受CEUS檢查且經(jīng)手術(shù)或膀胱鏡活檢病理證實(shí)為IPB和BUC的患者，均為單發(fā)，排除既往有膀胱癌病史和檢查前接受任何手術(shù)及其他治療，或有嚴(yán)重藥物過(guò)敏、心腦血管疾病患者。IPB組30例，男25例，女5例，年齡27～66歲，平均(53.5±5.2)歲，24例臨床表現(xiàn)為無(wú)痛性肉眼血尿，6例有排尿困難和尿路刺激癥狀；BUC組50例，男38例，女12例，年齡34～76歲，平均(64.3±8.2)歲，臨床表現(xiàn)為無(wú)痛性血尿33例，尿路刺激癥7例，無(wú)痛性血尿合并尿路刺激癥6例，無(wú)明顯癥狀4例。

1.2儀器與方法 采用Philips iU22型彩色多普勒超聲診斷儀，C5-1凸陣探頭，頻率3.0～5.0 MHz，配有實(shí)時(shí)CEUS匹配成像技術(shù)，機(jī)械指數(shù)0.08。檢查前囑患者適度充盈膀胱，先行常規(guī)超聲選取最佳切面后切換至造影模式，經(jīng)肘靜脈快速團(tuán)注造影劑(SonoVue)2.4 ml，后跟注生理鹽水5.0 ml，囑患者盡量屏氣或減慢呼吸幅度，采集動(dòng)態(tài)圖像時(shí)間3 min，并自動(dòng)保存于儀器硬盤。

1.3圖像處理 選擇腫塊內(nèi)灌注最豐富區(qū)作為ROI(5.0 mm×5.0 mm)，盡量避開(kāi)液化壞死及鈣化，采用QLab分析軟件獲得時(shí)間-強(qiáng)度曲線(time-intensity curve, TIC)定量參數(shù)，包括上升時(shí)間(rise time, RT)、平均渡越時(shí)間(mean transit time, MTT)、峰值強(qiáng)度(peak intensiy, PI)、峰值強(qiáng)度降半時(shí)間(time from peak to one half, TPH)、達(dá)峰時(shí)間(time to peak, TP)、上升斜率(wash in slope, WIS)、半降支斜率(semi-descending slope, DS)絕對(duì)值。

1.4免疫組化染色 術(shù)后對(duì)所有標(biāo)本行SP法免疫組化染色(由福州邁新生物技術(shù)開(kāi)發(fā)公司提供試劑)，按照試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行操作。MVD計(jì)數(shù)參照Weider等[7]提出的方法，先于100倍光鏡下整體觀察切片，選擇5個(gè)腫瘤內(nèi)血管密度最高的區(qū)域，稱為“熱點(diǎn)”，隨后在200倍鏡下計(jì)數(shù)，任何黃染的細(xì)胞簇都計(jì)數(shù)為1個(gè)MVD值，但血管腔大于8個(gè)紅細(xì)胞直徑或有明顯平滑肌包繞的較大血管不納入記數(shù)范圍，取平均值作為MVD計(jì)數(shù)。

2 結(jié)果

2組CEUS表現(xiàn)及TIC曲線見(jiàn)圖1A、2A，2組CEUS的TIC參數(shù)分析見(jiàn)表1，IPB組的PI、TPH和TP低于BUC組，而DS大于BUC組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均<0.05)，RT、MTT、WIS組間比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均>0.05)。

表1 BUC組與IPB組CEUS TIC中定量參數(shù)、MVD值的比較

圖1 患者男，55歲，IPB A.CEUS示腫瘤呈相對(duì)“快進(jìn)快退”低增強(qiáng)(箭示腫瘤)； B.免疫組化(CD34染色，×200)示微血管分布較稀疏，棕黃色區(qū)域?yàn)镃D34陽(yáng)性(箭) 圖2 患者男，72歲，BUC A.CEUS示腫瘤呈“快進(jìn)慢退”高增強(qiáng)(箭示腫瘤)； B.免疫組化(CD34染色，×200)示微血管分布較密集，棕黃色區(qū)域?yàn)镃D34陽(yáng)性(箭)

2組腫瘤CD34標(biāo)記的MVD見(jiàn)圖1B、2B。BUC組MVD明顯高于IPB組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)(表1)。

CEUS的TIP參數(shù)中，TPH、DS與MVD存在相關(guān)性(rs=0.74、-0.81，P均<0.05)。

3 討論

IPB是一種少見(jiàn)的泌尿系統(tǒng)上皮良性腫瘤，惡變、復(fù)發(fā)較少見(jiàn)，預(yù)后好，好發(fā)于中老年人，男性多見(jiàn)，其發(fā)病率約占膀胱腫瘤的6.0%，泌尿系統(tǒng)腫瘤的2.2%[8]。IPB發(fā)病機(jī)制尚不明確，一般認(rèn)為由慢性炎癥長(zhǎng)期刺激及下尿路梗阻等引起膀胱黏膜局部上皮異常增生導(dǎo)致，并推測(cè)吸煙等化學(xué)因素與本病有密切關(guān)系[9]。臨床表現(xiàn)主要為無(wú)痛性肉眼血尿，尿路刺激癥狀，亦可因腫瘤堵塞膀胱頸部產(chǎn)生尿路梗阻癥狀，或無(wú)明顯癥狀由體檢偶然發(fā)現(xiàn)。膀胱癌是我國(guó)男性泌尿生殖系統(tǒng)常見(jiàn)的惡性腫瘤，易轉(zhuǎn)移且復(fù)發(fā)率高，預(yù)后較差。IPB臨床表現(xiàn)與BUC的臨床癥狀較為類似，缺乏特征性。且兩者在治療方面存在較大差異，IPB常采用經(jīng)尿道腫瘤電切術(shù)，而BUC需進(jìn)行開(kāi)放手術(shù)。故術(shù)前對(duì)IPB與BUC的鑒別診斷有重要的臨床價(jià)值。

本研究采用CEUS定量分析造影劑在膀胱腫瘤的灌注過(guò)程，旨在鑒別IPB與BUC。有研究[10]表明，由于腫瘤的生長(zhǎng)依賴于血管生成，腫瘤分化程度不同可表現(xiàn)為其新生血管的生長(zhǎng)及畸形也不同，包括有無(wú)動(dòng)靜脈瘺、血管紆曲、管徑大小、分布情況、間質(zhì)水腫等均可影響造影劑在病灶內(nèi)不同灌注情況，CEUS TIC主要灌注參數(shù)可客觀反映腫瘤微血管的異質(zhì)性。本研究發(fā)現(xiàn)，在2組病灶CEUS參數(shù)中，RT、WIS、MTT差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均>0.05)，而PI、TP、TPH、DS差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均<0.05)，IPB組的PI低于BUC組，IPB組TPH和TP均小于BUC組，而DS大于BUC組，表明相對(duì)于BUC，IPB多表現(xiàn)為相對(duì)“快進(jìn)快退”的低增強(qiáng)，分析原因可能與以下幾個(gè)因素有關(guān)：①BUC病變級(jí)別較高且血供豐富，而IPB為良性腫瘤，分級(jí)較低，血供較少，故IPB的PI低于BUC；②IPB良性腫塊內(nèi)新生血管紆曲尚輕，血管走行尚規(guī)則，扭曲不嚴(yán)重，可出現(xiàn)造影劑到達(dá)時(shí)間較惡性腫塊快，即IPB組的TP小于BUC組；③BUC為惡性腫瘤，新生血管紆曲，間質(zhì)水腫明顯，致造影劑在血管內(nèi)聚集滯留，形成BUC“慢退”的表現(xiàn)，即IPB組TPH小于BUC組，DS大于BUC組。

實(shí)體瘤在無(wú)自身血供的狀態(tài)下，可自行生長(zhǎng)至1～2 mm3，若繼續(xù)生長(zhǎng)則需新生血管的滋養(yǎng)[11]。腫瘤的MVD與其浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移及預(yù)后有密切的關(guān)系，臨床通常將MVD作為一項(xiàng)評(píng)價(jià)腫瘤血管生成的良好指標(biāo)[6]。研究[12]發(fā)現(xiàn)MVD是膀胱癌患者的一個(gè)獨(dú)立預(yù)后因素，微血管增加的患者其死亡危險(xiǎn)性可增加2.5倍。文進(jìn)等[13]研究表明，隨著膀胱癌病理分級(jí)遞增，MVD隨之上升，MVD可作為一項(xiàng)評(píng)價(jià)膀胱癌的浸潤(rùn)及轉(zhuǎn)移能力和預(yù)后判斷的重要指標(biāo)。本研究發(fā)現(xiàn)BUC組MVD明顯高于IPB組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (P<0.05)，與既往報(bào)道[14]一致。但臨床評(píng)估腫瘤MVD一般采用病理免疫組化法檢測(cè)，常通過(guò)活檢或手術(shù)后獲得，但為有創(chuàng)性檢查，不可重復(fù)，且方法繁瑣、耗時(shí)。因此，尋找一種無(wú)創(chuàng)、快捷且在活體上可重復(fù)實(shí)施的檢查方法評(píng)估膀胱腫瘤血管生成顯得尤為重要。

目前診斷膀胱腫瘤的常規(guī)檢查包括超聲、CT、MRI及膀胱鏡。CT和MRI對(duì)評(píng)價(jià)BUC分期有明顯優(yōu)勢(shì)，尤其是向外浸潤(rùn)生長(zhǎng)的程度、有無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，但仍不能病理分級(jí)，且費(fèi)時(shí)、價(jià)格昂貴、非實(shí)時(shí)。膀胱鏡可獲得病變組織并進(jìn)行病理分級(jí)，但其有創(chuàng)，易出現(xiàn)感染、出血、尿道狹窄等并發(fā)癥，同時(shí)膀胱鏡活檢易受操作者的經(jīng)驗(yàn)不足、取材較少或取材部位不足的影響造成誤診或漏診。由于CEUS中所采用的造影劑是一種純血池顯影劑，不進(jìn)入組織間隙，與紅細(xì)胞直徑類似，故CEUS可清晰反映腫瘤內(nèi)的微血流灌注情況。本研究發(fā)現(xiàn)BUC組MVD明顯高于IPB組(P<0.05)，提示MVD計(jì)數(shù)越高，分級(jí)程度愈重，與既往研究[15]結(jié)果相符。同時(shí)本研究發(fā)現(xiàn)TPH、DS與MVD均存在相關(guān)性(rs=0.74、-0.81，P均<0.05)，提示CEUS可較好地推測(cè)兩種腫瘤血管生成的情況，即膀胱腫瘤分級(jí)程度愈高，腫瘤內(nèi)血流愈豐富，MVD的增加有利于腫瘤的生長(zhǎng)和侵襲。因此，CEUS定量分析亦可用于反映術(shù)前膀胱腫瘤微血管灌注及血管生成情況。

本研究的不足：為回顧性研究且樣本量較少，今后仍需擴(kuò)大樣本量進(jìn)行多中心、前瞻性等研究，進(jìn)一步證實(shí)研究結(jié)果。

總之，CEUS定量分析可較好地反映IPB和BUC的微血管異質(zhì)性及血流灌注情況，在鑒別診斷兩者方面有較高的臨床價(jià)值。同時(shí)，CEUS可作為一項(xiàng)在活體可重復(fù)、相對(duì)無(wú)創(chuàng)、快捷地評(píng)估腫瘤血管生成的新技術(shù)。

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Correlation of CEUS and microvessel density in inverted papilloma of bladder and bladder urothelial carcinoma

GUOSuping,ZHOUAiyun*,XUPan,XIAOFan

(DepartmentofUltrasound,theFirstAffiliatedHospitalofNanchangUniversity,Nanchang330006,China)

Objective To explore the correlation between time-intensity curve (TIC) parameters of CEUS and microvessel density (MVD) of inverted papilloma of bladder (IPB) and bladder urothelial carcinoma (BUC). Methods Clinical and CEUS characteristics of 30 patients with IPB and 50 patients with BUC confirmed by pathology were retrospectively analyzed. CEUS TIC parameters included rise time (RT), mean transit time (MTT), peak intensiy (PI), time from peak to one half (TPH), wash in slope (WIS), time to peak (TP), semi-descending slope (DS) were acquired by QLab software and statistical analysis was carried out. The MVD of the resectioned tissue specimens were quantified via immunohistochemistry for CD34 and the correlation with CEUS TIC parameters was investigated. Results In CEUS quantitative parameters, PI, TPH, TP and DS had statistical significance in IPB and BUC (allP<0.05). MVD of BUC was obviously higher than that of IPB (P<0.05); TPH and DS both correlated with MVD (rs=0.74, -0.81, bothP<0.05). Conclusion CEUS characteristics has certain clinical value in identification of IPB and BUC. TIC parameters of CEUS can reflect the MVD of IPB and BUC.

Papilloma, inverted; Bladder urothelial carcinoma; Microvessel density; Contrast media; Ultrasonography

江西省科技計(jì)劃項(xiàng)目(2015BBG70234)。

郭素萍(1992—)，女，江西九江人，在讀碩士。研究方向：腹部超聲造影診斷。E-mail： 411525626@qq.com

周愛(ài)云，南昌大學(xué)第一附屬醫(yī)院超聲科，330006。E-mail: zhouaiyun1960@163.com

2016-09-26

2017-02-16

10.13929/j.1003-3289.201609111

R737.14; R445.1

A

1003-3289(2017)05-0756-04