同型半胱氨酸水平對晚期孕婦血栓前狀態標志物的影響

汪成麗，張志堅，彭濤，李新琳，向彬彬

(重慶市巴南區人民醫院產科1、重癥醫學科2、檢驗科3，重慶401320)

同型半胱氨酸水平對晚期孕婦血栓前狀態標志物的影響

汪成麗1，張志堅2，彭濤1，李新琳1，向彬彬3

(重慶市巴南區人民醫院產科1、重癥醫學科2、檢驗科3，重慶401320)

目的分析同型半胱氨酸(HCY)水平對晚期孕婦血栓前狀態(PTS)標志物的影響。方法收集2015年1月至2016年7月在巴南區人民醫院產科就診的289例晚期孕婦，按照HCY水平分為高HCY水平組(HHCY組：HCY≥15 μmol/L，n=69)和低HCY水平組(LHCY組：HCY<15 μmol/L，n=220)。檢測兩組晚期孕婦血栓前狀態標志物指標，分析HCY水平與血栓前狀態標志物的相關性。結果與LHCY組比較，HHCY組晚期孕婦的抗凝血酶Ⅲ(AT-Ⅲ)含量明顯降低[(68.45±12.37)mg/L vs(91.23±9.29)mg/L]；血栓調節蛋白(TM)、血小板α顆粒膜蛋白140 (GMP-140)含量明顯升高[TM：(5.38±1.17)ng/mL vs(3.58±1.09)ng/mL；GMP-140：(20.12±6.32)ng/mL vs(15.28± 5.15)ng/mL]，差異均有統計學意義(P<0.05)。兩組晚期孕婦間的D-二聚體(D-dimer)、纖維蛋白原(Fib)、紅細胞壓積(Hct)比較差異均無統計學意義(P>0.05)。相關性分析結果顯示，血漿HCY水平與AT-Ⅲ呈負相關(r=-0.213，P= 0.018)，與TM呈正相關(r=0.278，P=0.021)。結論HCY可能通過改變晚期孕婦PTS介導對機體產生損傷作用。

晚期妊娠；同型半胱氨酸；血栓前狀態；抗凝血酶；血栓調節蛋白；血小板α顆粒膜蛋白140；

血栓前狀態(prothrombosis state，PTS)又稱血液高凝狀態，是多種因素引起的止血、凝血和抗凝系統失調的一種綜合病理過程，臨床中易致血栓形成的狀態。同型半胱氨酸(homocysteine，HCY)是一種含硫氨基酸，既往研究已證實機體HCY水平異常與心腦血管疾病、自身免疫病、炎癥性疾病及妊娠相關性疾病均密切相關[1-3]。妊娠期婦女因機體內激素等一系列變化會導致諸如凝血活性顯著增強等現象發生，這也是正常妊娠期的一種生理現象，當機體內促凝因子水平的增高、抗凝物質水平的降低和纖維蛋白溶解功能低下幾個因素的相互作用下，妊娠期血液形成高凝狀態，是血栓及出血性疾病高發人群。本研究以晚期孕婦為研究對象，旨在分析HCY水平對晚期孕婦血PTS標志物的影響，為晚期孕婦高凝狀態形成原因提供新的理論基礎。

1 資料與方法

1.1 一般資料納入2015年3月至2016年3月在本院門診或住院的晚期孕婦。入組標準：晚期孕婦(孕37～40周)，年齡20～40歲，同意進行該研究者。排除標準：肝腎功能異常者；有心腦血管疾病、甲狀腺疾病、腫瘤、出血及血栓性疾病病史者；吸煙、酗酒等嗜好者。最終納入研究289例，其中高HCY水平組(HHCY組，HCY≥15 μmol/L)69例，低HCY水平組(LHCY組，HCY<15 μmol/L)220例。本研究經醫院倫理委員會批準，所有患者均自愿參加本研究，并簽署知情同意書。

1.2 觀察指標與檢測方法所有參加研究的晚期孕婦均于晨起空腹未服藥的前提下采集靜脈抗凝血標本。采用酶循環法檢測血清中的HCY含量。微量離心法測定血細胞比容(Hct)。酶聯免疫(ELISA)雙抗體夾心法測定纖維蛋白原(Fib)、血栓調節蛋白(TM)、血小板α顆粒膜蛋白(GMP)-140、D-二聚體(D-Dimer)。免疫比濁法測定抗凝血酶Ⅲ(AT-Ⅲ)。

1.3 統計學方法應用SPSS16.0統計軟件進行數據分析，計量資料以均數±標準差(x-±s)表示，兩獨立樣本的比較采用t檢驗，對兩個正態分布的連續變量間相關關系檢驗采用Pearson直線相關分析，均以P< 0.05表示差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組晚期孕婦的一般資料、HCY及PTS指標比較兩組晚期孕婦的年齡、體質量、D-Dimer、Fib、Hct比較差異均無統計學意義(P>0.05)；HHCY組晚期孕婦的AT-Ⅲ明顯低于LHCY組，而TM、GMP-140均明顯高于LHCY組，差異均有統計學意義(P<0.01或P<0.05)，見表1。

表1 兩組晚期孕婦的一般資料、HCY及PTS相關指標比較

表1 兩組晚期孕婦的一般資料、HCY及PTS相關指標比較

組別HHCY組LHCY組t值P值例數69 220年齡(歲) 24.31±3.75 23.59±3.18 0.387 0.698體質量(kg/m2) 23.67±4.14 24.02±3.18 0.978 0.287 AT-Ⅲ(mg/L) 68.45±12.37 91.23±9.29 9.542 0.001 TM(ng/mL) 5.38±1.17 3.58±1.09 2.678 0.018 GMP-140(ng/mL) 20.12±6.32 15.28±5.15 3.219 0.012 D-Dimer(ng/L) 0.41±0.17 0.40±0.15 1.105 0.387 Fib(g/L) 4.12±1.57 4.10±1.59 1.003 0.418 Hct(%) 0.48±0.05 0.47±0.03 1.568 0.075

2.2 HCY與PTS相關指標的相關性對納入晚期孕婦HCY與PTS指標進行Pearson直線相關分析，結果顯示：HCY與AT-Ⅲ呈負相關(r=-0.213，P=0.018)；HCY與TM呈正相關(r=0.278，P=0.021)；HCY與GMP-140、D-Dimer、Fib、Hct無相關性(rGMP-140=0.064，P=0.578；rD-Dimer=0.044，P=0.756；rFib=-0.149，P=0.179；rHct= 0.080，P=0.443)。

3 討論

婦女在妊娠期間為適應妊娠及分娩的需要，機體各項機能將出現一系列的適應性變化，凝血及纖溶系統的交化是其中重要的體現之一。的凝血因子在妊娠期被各種原因激活，這就使得婦女在妊娠期，特別是在妊娠晚期處于明顯高凝狀態，這種狀態被稱為血栓前狀態(PTS)。PTS對于減少產婦產后出血風險具有積極意義，是機體所產生的一種保護性機制，但持續的高凝狀態也可引起一系列的不良后果，可能增加妊娠高血壓綜合征、胎盤早剝、胎盤梗死及深靜脈血栓形成等許多產科并發癥的發生，嚴重者可導致孕產婦和圍產兒的死亡，嚴重威脅孕產婦的安全[4-6]。因此妊娠期婦女PTS的研究尤其重要，可以為臨床防治妊娠期及圍生期PTS導致的危害提供指導。近年來各項研究表明妊娠期PTS發生的機制涉及眾多方面，如促凝水平增高、抗凝物質下降、纖維蛋白溶解減少或凝血因子改變不平衡，同時還與先天遺傳、后天獲得、免疫失調、炎癥反應及多種缺陷等因素有關，但仍未完全闡明其發生機制，需要研究者們繼續探尋[7-8]。

HCY是一種含巰基氨基酸，主要來源于飲食攝取的蛋氨酸，是蛋氨酸和半胱氨酸代謝過程中重要的中間產物。研究表明HCY有促進血液流變學變化的作用，也是血栓形成的危險因素之一[9-10]。HCY導致血栓形成的機制比較復雜，研究表明HCY能損傷血管內皮細胞、促進血管平滑肌細胞增殖、增加血小板活性、促進炎癥反應、導致基因突變[11-12]。故我們可以認為HCY是通過綜合因素促進血栓形成，而這些因素中部分與妊娠期PTS的形成有關，因此HCY可能在妊娠期PTS發生發展中也占據一定的地位。

AT-Ⅲ是機體中重要的生理性抗凝物質之一，其在機體活性可有效反映抗凝系統的功能狀態，AT-Ⅲ活性降低，血液抗凝作用明顯減弱。TM是由血管內皮細胞合成的位于血管內皮細胞膜表面的糖蛋白，是凝血活化蛋白所必需的輔助因子，可作為血管內皮細胞損傷的有效評估指標。GMP-140在是位于血小板α顆粒的糖蛋白，可直接反映血小板的活化程度；D-Dimer及Fib是纖維蛋白的降解產物之一；他們都是反應PTS變化的重要參照指標。本研究結果顯示HHCY組晚期孕婦PTS相關指標與LHCY晚期孕婦組比較有顯著差異，主要表現在AT-Ⅲ明顯低于LHCY組；而TM、GMP-140均明顯高于LHCY組。這些結果表明HHCY晚期孕婦較LHCY晚期孕婦處于更嚴重的PTS，表明HCY對晚期孕婦PTS的確有一定的促進作用。我們在研究中通過分析整個晚期孕婦相關指標可以發現HCY與AT-Ⅲ呈負相關，與TM呈正相關，進一步證實了HCY與PTS存在明確的相關性，提示HCY可能通過影響PTS的程度介導對機體產生損傷，提示我們不僅要關注妊娠婦女的PTS狀態，還要關注血HCY情況，利于早期判斷并及時調整治療。

[1]I Al-Gareeb A,Abd Al-Amieer WS,M Alkuraishy H,et al.Effect of body weight on serum homocysteine level in patients with polycystic ovarian syndrome:A case control study[J].Int J Reprod Biomed (Yazd),2016,14(2):81-88.

[2]Kundi H,Kiziltunc E,Ates I,et al.Association between plasma homocysteine levels and end-organ damage in newly diagnosed type 2 diabetes mellitus patients[J].Endocr Res,2017,42(1):36-41.

[3]Yang Z,Wang L,Zhang W,et al.Plasma homocysteine involved in methylation and expression of thrombomodulin in cerebral infarction [J].Biochem Biophys Res Commun,2016,473(4):1218-1222.

[4]Glueck CJ,Friedman J,Hafeez A,et al.Testosterone therapy,thrombophilia,and hospitalization for deep venous thrombosis-pulmonary embolus,an exploratory,hypothesis-generating study[J].Med Hypotheses,2015,84(4):341-343.

[5]Blondon M,Casini A,Hoppe KK,et al.Risks of venous thromboembolism after cesarean sections:a meta-analysis[J].Chest,2016,150 (3):572-596.

[6]Rhéaume M,Weber F,Durand M,et al.Pregnancy-related venous thromboembolism risk in asymptomatic women with antithrombin deficiency:a systematic review[J].Obstet Gynecol,2016,127(4): 649-656.

[7]Guanella R,Kahn SR.Post-thrombotic syndrome:current prevention and management strategies[J].Expert Rev Cardiovasc Ther,2012,10 (12):1555-1566.

[8]Wik HS,Jacobsen AF,Mowinckel MC,et al.The role of inflammation in post-thrombotic syndrome after pregnancy-related deep vein thrombosis:a population-based,cross-sectional study[J].Thromb Res,2016,138:16-21.

[9]孫娟,譚紅梅,程超,等.高同型半胱氨酸誘導血管內皮功能障礙促進微循環障礙和微血栓形成[J].中國病理生理雜志,2007,23(12): 2336-2340.

[10]Karolczak K,Kamysz W,Karafova A,et al.Homocysteine is a novel risk factor for suboptimal response of blood platelets to acetylsalicylic acid in coronary artery disease:a randomized multicenter study [J].Pharmacol Res,2013,74:7-22.

[11]Freedman J,Glueck CJ,Prince M,et al.Testosterone,thrombophilia, thrombosis[J].Transl Res,2015,165(5):537-548.

[12]Lauw MN,Barco S,Coutinho JM,et al.Cerebral venous thrombosis and thrombophilia:a systematic review and meta-analysis[J].Semin Thromb Hemost,2013,39(8):913-927.

Effect of homocysteine level on prethrombotic state markers in late-pregnant women.

WANG Cheng-li1,ZHANG Zhi-jian2,PENG Tao1,LI Xin-lin1,XIANG Bin-bin3.Department of Obstetrics1,Department of Critical Care Medicine2, Department of Clinical laboratory3,Chongqing Ba'nan District People's Hospital,Chongqing 401320,CHINA

ObjectiveTo study the effect of different homocysteine levels on prethrombotic state markers in women in late pregnancy.MethodsFrom Jan.2015 to Jul.2016,289 women in late pregnancy in Chongqing Ba'nan District People's Hospital were selected and divided,according to homocysteine(HCY)level,into high HCY group(HHCY group,HCY≥15 μmol/L,n=69)and low HCY group(LHCY group,HCY<15 μmol/L,n=220).Prethrombotic state markers were detected,and Pearson correlation test was used to analyze the correlation between homocysteine and the laboratory parameters of prethrombotic state.ResultsCompared with LHCY group,the AntithrombinⅢ(AT-Ⅲ),thrombomodulin(TM),Granule membrane protein 140(GMP-140)in HHCY group were(68.45±12.37)mg/L,(5.38± 1.17)ng/mL,(20.12±6.32)ng/mL,as compared with(91.23±9.29)mg/L,(3.58±1.09)ng/mL,(15.28±5.15)ng/mL in the LHCY group(P<0.05).There were no significant differences in D-dimer,Fib,Hct between the two groups(P>0.05). Pearson correlation analysis showed that the level of plasma homocysteine was negatively correlated with AT-Ⅲ(r=-0.213,P=0.018)and was positively correlated with TM(r=0.278,P=0.021).ConclusionHomocysteine damage effect may be mediated through changing the prethrombotic state of women in late pregnancy.

Late pregnancy;Homocysteine;Prethrombotic state;AntithrombinⅢ;Thrombomodulin;Granule membrane protein 140

10.3969/j.issn.1003-6350.2017.10.018

R714.2

A

1003—6350（2017）10—1602—03

2016-11-03)

汪成麗。E-mail：4768587@qq.com