德清地區200例兒童肺炎支原體感染流行病學和耐藥性分析

潘根麗何國華俞學銘

德清地區200例兒童肺炎支原體感染流行病學和耐藥性分析

潘根麗1何國華2俞學銘3

兒童；肺炎支原體；流行病學；耐藥性

在非細菌性肺炎中，支原體肺炎所占比例超過1/3，患者以兒童居多。肺炎支原體（MP）主要傳播途徑為呼吸道傳播，當患者的口鼻分泌物被健康人吸入后，可引發小范圍內流行。MP多存在纖毛上皮之間，可抑制纖毛活動、破壞上皮細胞，并且MP及其代謝產物可能引發機體的過敏反應，從而引發肺炎及相關并發癥，嚴重危害兒童健康。由于MP沒有細胞壁，青霉素、頭孢菌素等對其無效，因此常選擇干擾或抑制核酸或蛋白質合成的藥物，大環內酯類常作為首選藥物。近期研究[1]表明，MP對大環內酯類藥物耐藥性逐漸提高。為進一步了解本地區肺炎支原體病原在呼吸道感染患兒中的流行情況及耐藥性，對200例肺炎患兒進行調查研究，結果報道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料選擇2015年8月—2016年8月本地區肺炎患兒200例，男102例，女98例，年齡1個月～14歲。其中≤1歲組15例，～3歲組30例，～6歲組80例，～14歲組75例。發熱咳嗽病程3～5天。

1.2 樣本采集確診肺炎后即用無菌咽拭子適度抹拭咽后壁和兩側扁桃體部位分泌物，避免觸及舌部，采樣后迅速將咽拭子放入采樣管中，旋緊管蓋并密封，以防干燥，采樣管做好標記。

1.3 檢驗方法采用聚合酶鏈式反應（PCR）結合Taqman熒光探針技術對咽拭子樣本中肺炎支原體核酸進行檢測，陽性提示MP感染，對檢測到的肺炎支原體進一步行耐藥突變位點23S rRNA 2063（A：G）和2064（A：G）突變位點基因檢測，檢測到23S rRNA 2063（A：G）或2064（A：G）位點基因突變為耐大環內酯類MP，包括試劑準備、樣本DNA抽提、樣本DNA擴增及結果判斷。

1.4 統計學方法應用SPSS19.0軟件，計量資料采用t檢驗，計數資料采用χ2檢驗。P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1200 例患兒MP感染情況200例肺炎患兒中咽拭子樣本中肺炎支原體核酸檢測陽性61例，總陽性率為30.5%。秋季發病57例中MP陽性22例（38.60%），春季發病32例中MP陽性7例，陽性率（21.88%）。夏季發病38例中MP陽性11例（8.95%）；冬季發病73例中MP陽性21例（28.77%）。秋季陽性率顯著高于其他季節（P<0.05），春季陽性率最低（P<0.05）。

2.2 不同年齡MP感染情況不同年齡組MP感染率，0～1歲MP感染率最低，～14歲MP感染率最高。其中0～1歲15例，MP陽性2例（13.33%）；～3歲組30例，MP陽性6例（20.00%）；～6歲組80例，MP陽性25例（31.25%）；～14歲組75例，MP陽性28例（37.33%）。

2.3 耐藥位點基因突變與病情200例肺炎中通過支原體核酸檢測確診61例，其中檢測到支原體耐藥位點突變38例（62.30%），38例中并發胸腔積液5例（13.16%），出現局部肺不張3例（8.00%）；基因未突變組23例患兒未并發肺不張或胸腔積液。基因未突變組患兒退熱時間、咳嗽減輕時間、啰音消失時間、住院時間均少于基因突變組（P<0.05），見表1。

表1 基因未突變組和突變組患兒病情改善時間比較（天，

表1 基因未突變組和突變組患兒病情改善時間比較（天，

注：與基因突變組比較，△P<0.05

組別基因未突變組基因突變組住院時間8.06±1.92△12.70±2.51例數23 38退熱4.58±1.45△6.68±1.36咳嗽減輕4.89±1.32△7.30±1.63啰音消失5.28±1.81△8.86±1.88

3 討論

肺炎支原體（MP）是介于細菌與病毒之間的一類原核細胞型生物，是引起兒童下呼吸道感染的重要病原體。約占小兒肺炎總數的15%～30%，在密集人群可高達40%～60%[2]。陶孝芬[3]調查發現，2012年杭州地區住院肺炎中MP陽性檢出率為13.70%，2013年住院肺炎中MP陽性檢出率為21.37%，2014年住院肺炎中MP陽性檢出率為24.47%，顯示支原體肺炎發病率逐年增加。本次調查德清地區200例肺炎患兒中肺炎支原體咽拭子核酸檢測MP陽性率為30.5%。近年來，我國肺炎支原體對大環內酯類藥物的耐藥形勢嚴竣，且部分地區的耐藥率較往年數據呈上升趨勢，2008—2012年北京耐大環內酯類MP的檢出率由68.9%升至90%以上[4]。徐巧等[5]調查發現天津地區耐大環內酯類MP的檢出率高達92%，陳岳明等[6]報道杭州市MP耐藥率達到78.9%，且呈每年上升趨勢。本調查200例肺炎中支原體核酸檢測確診61例，其中38例檢測到耐藥位點基因突變，提示耐大環內酯類抗生素MP檢出率62.3%（38/61）。2014年最新研究顯示[7]，發生耐藥位點（2063位點和2064位點）突變的MP感染引起的肺炎，病情更重，需要臨床引起重視，必要時應在給予大環內酯類藥物治療同時加用激素和免疫球蛋白。本調查發現支原體感染好發于秋季，可能與氣候溫度有關，且以學齡前期和學齡期兒童多見，支原體感染可通過呼吸道傳播，故容易在學校造成局部流行。由于支原體肺炎的臨床表現不典型，胸片特征不明顯，容易與其它肺炎混淆，造成誤診。若要明確診斷，需要進行肺炎支原體的檢測。血清特異性抗體測定是目前臨床診斷肺炎支原體感染最常用的實驗室方法，主要是檢查IgM抗體。血清IgM抗體的產生至少需要1～2周時間，對MP的診斷往往滯后于臨床的需要，尤其是免疫功能缺陷的患兒IgM抗體的產生往往需要更長時間，甚至無法產生，這給早期診斷帶來困難。肺炎支原體無細胞壁，對作用于細胞壁的抗生素如青霉素和頭孢菌素類等不敏感。肺炎患兒若不能早期診斷出支原體感染，未及時選用大環內酯類藥物，往往會耽誤病情。本研究采用聚合酶鏈式反應（PCR）結合Taqman熒光探針技術對咽拭子樣本中肺炎支原體核酸及抗大環內酯類抗生素耐藥突變位點即23S rRNA 2063（A：G）和2064（A：G）突變位點進行檢測，24h就可以得到檢測結果，既能早期診斷支原體感染，又可明確是否為耐藥菌，對指導臨床用藥有著重要意義。

［1］姜毅，李溫慈，徐海濱，等.小兒肺炎咽拭子肺炎支原體培養及藥敏分析［J］.中華醫院感染學雜志，2011，21（9）：1925-1927.

［2］薛辛東，杜立中，毛萌，等.兒科學［M］.第2版.北京：人民衛生出版社，2010：280.

［3］陶孝芬.2012—2014年兒童肺炎支原體肺炎流行病學調查［J］.世界最新醫學信息文摘，2015，15（46）：128-129.

［4］Zhao F，Liu G，Wu J，et al.Surveillance of macrolideresistant mycoplasma pneumoniae in Beijing，China，from 2008 to 2012［J］.Antimicrob Agents Chemother，2013，57（3）：1521-1523.

［5］徐巧，林書祥，郭偉，等.天津地區肺炎患兒肺炎支原體耐藥檢測及分析［J］.天津醫藥，2013，3（41）：216-219.

［6］陳岳明，張衛英.余道軍等肺炎支原體耐大環內酯類抗菌藥物分子機制的初步研究［J］.中華醫院感染學雜志，2009，19（8）：877-879.

［7］YunlianZhou，YuanyuanZhang，YuanjianSheng，etal. More complications occur in macrolide-resistant than in macrolide sensitive mycoplasma pneumoniae pneumonia［J］.Antimicrobial Agents and Chemotherapy，2014，58（2）：1034-1038.

（收稿：2016-08-14修回：2016-08-23）

浙江省湖州市科技局計劃項目（No.2015GY38）

1浙江省德清縣人民醫院兒科（德清313200）；2浙江省德清醫院兒科（德清313201）；3浙江省德清縣中醫院兒科（德清313200）

潘根麗，Tel：13957260036；E-mail：13957260036@163.com