曾 敏
(忻州職業技術學院,山西忻州 034000)
醫藥化工
竹葉黃酮的抗氧化性研究
曾 敏
(忻州職業技術學院,山西忻州 034000)
竹葉提取物中富含種類豐富的酮類化合物,這些酮類化合物具有優異的抗氧化能力、還原能力,不僅可以用于食品防腐中,還在醫藥領域具有廣泛的應用,是治療心血管疾病藥物的重要原材料,是一種純天然的活性成分,在現代臨床醫學中具有重要的應用。在前人研究的基礎上,選取了幾種竹類植物并對其提取物中的酮類物質的抗氧化性、還原性以及清除DPPH 自由基的能力進行了測定,發現其具有豐富的化學抗氧化清理,可作為食品和醫藥領域中重要的生物活性原料,同時無污染和毒副作用,適合大面積進行推廣。
竹葉;黃酮;抗氧化性;DPPH;自由基
竹葉提取物中含有諸如竹葉黃酮、竹葉多糖等多種活性物質,具有多種藥用和保健功效,具有巨大的研究和應用價值,尤其是隨著近幾年保健品行業的蓬勃發展,同類化合物以其純天然、無污染、效果顯著等特點被成為新的研究焦點。很多研究表明,在竹葉內生物活性可能是由于它含有多種黃酮類化合物,因此本文以此為出發點對幾種竹葉提取物中的同類物質的抗氧化性進行了系統的分析和研究,并取得了一些有價值的發現。
2.1 實驗材料選取
取毛竹、苦竹、綠竹和黃甜竹四種竹類植物的新鮮枝葉進行提取,得到黃酮提取液,放在特定的環境中進行保存;濃度≥99% 的槲皮素若干,購于北京藥品生物制品鑒定所;配備濃度大于85% 的 DPPH 溶液若干,購置于 Fluka 公司;同時還要配置亞硝酸鈉、乙醇、氯化鐵、硫酸亞鐵、H2O2、濃硫酸、磷酸二氫鈉、葡萄糖、磷酸氫二鈉等物質若干,這些物質為常見的化學藥品或試劑,在很多化學試劑專賣店均有銷售。
2.2 實 驗方法
(1)抗氧化能力的測定:本實驗中采用鉬酸銨還原法對竹葉黃酮的抗氧化性進行測定,將竹葉黃酮提取液在乙醇溶劑中進行溶解。然后利用鉬酸銨制成反應溶劑,取等體積的竹葉黃酮乙醇溶液滴入反應溶劑中進行反應,并在95℃水浴加熱的情況下反應90min,反映完畢后冷卻到室溫,于695nm測定OD 值。物質的抗氧化性用相當于多少質量的VC 來表示。
(2)還原能力測定:分別取不同量的竹葉黃酮提取液溶解在一定體積的乙醇溶劑中,并將不同濃度的溶液分別做好標記。然后分別取 1.0mL 加入 0.2mL/L 的磷酸緩沖劑溶液和2.0mL/L 的鐵氰化鉀的混合溶液中攪拌均勻,然后在 50℃的水浴環境中反映 20min,然后加入 2mL100mg/mL 的三氯乙酸水溶液,待混合均勻后在 3 000r/min 的狀態下離心 10min,取上清液 2ml與 0.4mL 的 0.1% 的氯化鐵水溶液充分混合,在室溫狀態下反應10min,然后用700nm 的次聲波照射該溶液,測量其吸光值A。
(3)清除 DPPH 自由基的能力測定:將 DPPH 配比成6.5×10-4mol/L 的溶劑并放在冰箱中儲存,在使用時將其濃度稀釋成1/10,將被測物配比成不同濃度梯度的溶液。并各取適量的配合物加入到5.8mL 的 DPPH 溶劑中,在避光條件下反應 20min,并在 4 000r/min 的離心機上離心 10min,并取上 清液用517nm 的光線照射離心后的溶液測定其吸收值。其中每個濃度梯度的溶劑做三次實驗,取平均值,然后將空白的作為對照。清除率可以用以下公式計算:

式中 Ai為樣品吸光值,Aj為空白式樣吸光度,A0為對照組吸光度。
3.1 總體抗氧化能力
VC具有很強的抗氧化能力,因此在諸多抗氧化能力實驗中經常采用VC作為物質抗氧化能力的對照物,同時在本實驗中將每克提取物相當于VC的質量數來表征起抗氧化能力。從實驗結果來看,毛竹提取物的抗氧化能力最強,其次是苦竹、綠竹和黃甜竹。其中苦竹、綠竹和黃甜竹的抗氧化性差異不明顯。
3.2 還原能力
本實驗中測試的還原能力主要通過將三價鐵離子還原成二價鐵離子的能力來表征。從實際測試結果來看,竹葉黃酮的提取物的還原能力基本上與提取物的濃度呈線性關系。
3.3 清除DPPH自由基的能力
DPPH 溶液在特定波長的照射下可以發生變色反應,同時變色反應的程度與配對電子數存在某種數量關系。因此根據這一原理就可以定性定量地測定竹葉黃酮清除 DPPH 的能力。通過對實驗結果和先關數據進行分析發現,黃甜竹的清除 DPPH 自由基的能力最強、苦竹次之、毛竹再次、綠竹的清除能力最弱。
綜上所述,竹葉黃酮以其優良的抗氧化能力在醫藥和食品領域中具有重要的應用,這種具備生物活性的自然酮類物質具有巨大的提取和應用價值。本文通過詳細的實驗分析和驗證了四種竹類植物中蘊含的竹葉黃酮的抗氧化性、還原性和清除 DPPH 自由基的能力,實際測試效果顯著,從而為實際應用提供了一定的技術支持。
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[3] 陸柏益,張英,吳曉琴.竹葉黃酮的抗氧化性及其心腦血管藥理活性研究進展[J].林產化學與工業,2005,(3):120-124.
Study on Antioxidant Activity of Flavonoids from Bamboo Leaves
Zeng Min
the rich variety of ketone compounds in extract of bamboo leaf,these ketones has excellent antioxidant capacity,reducing power,not only can be used for food preservation,is widely used in the field of medicine,is an important raw material for treatment of cardiovascular disease,is a kind of natural active ingredients,has important applications in modern clinical medicine.Based on the previous research selects several kinds of bamboo plants and ketones in the extracts of oxidation resistance,reducing capacity and scavenging DPPH were measured,and found it has antioxidant rich chemical cleaning,can be used as an important raw material for biological activity in the field of food and medicine,and no pollution and the adverse effects,suitable for large area promotion.
bamboo leaf;flavonoids;antioxidant activity;DPPH;free radical
R285.5
A
1003-6490(2017)06-0171-02
2017-04-02
曾敏(1983—),女,山西忻州人,助理講師,主要研究方向為植物成分的分離及分析。