高效液相色譜法在中藥真偽鑒別中的應用

代 根

（眉山市食品藥品檢驗檢測中心，四川 眉山 620000）

高效液相色譜法在中藥真偽鑒別中的應用

代 根

（眉山市食品藥品檢驗檢測中心，四川 眉山 620000）

目的 探討高效液相色譜在人參、黃芪、當歸三種中藥鑒別真偽中的作用。方法 選取我院2016年采購的人參、黃芪和當歸，隨機抽樣法收取60份樣本，按照鑒別方法分組為性狀鑒別組和高效液相色譜組，性狀鑒別組通過人參、黃芪、當歸的性狀進行鑒別，而高效液相色譜組則是更具《中國藥典》進行高效液相色譜進行鑒別，對兩組鑒別的偽品率進行對比，并將偽品與常見偽品進行高效液相色譜鑒定。結果 ①性狀鑒別組人參的偽品率為1.6%、黃芪的偽品率為3.3%、當歸的偽品率為1.6%。高效液相色譜組的人參的偽品率為11.7%、黃芪的偽品率為15%、當歸的偽品率為13.3%。兩組存在差異。②人參7個的偽品為三七，黃芪9個偽品為甘草，當歸8個偽品為東當歸。結論 高效液相色譜在鑒別人參、黃芪、當歸的準確性上要優于性狀鑒別。

高效液相色譜法，中藥，鑒別

中藥對于中醫而是與疾病戰斗的武器，中藥的真偽對對于治療而言是至關重要的，偽品若在治療中使用，則會延誤或導致病情的惡化[1]。由此可見對與中藥真偽的鑒別是十分有意義的。對于中藥的鑒別目前使用的方法較多，每種方法都有其特點和操作方法，鑒別方法也有針對的中藥和范圍，在操作起來會顯得過程繁瑣。中藥指紋圖譜可以全面的反應中藥中化學成分和特征[2]。而到中藥的真偽未知時可以通過中藥指紋圖譜進行鑒別和區分。本研究采用高效液相色譜對人參、黃芪、當歸三種中藥進行鑒別，觀察高效液相色譜在鑒別中藥真偽中的作用，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 樣品選擇

樣品來源于2016年于中藥交易商采購的人參、黃芪和當歸的樣品，選擇10個藥商樣本，樣本的采用隨機抽樣的方法抽取樣本量，每次抽樣6份樣本量。運用對照性研究的方法，分為性狀鑒別組和高效液相色譜組。樣本60份均在兩個組進行鑒別。

1.2 樣品制備

根據《中國藥典》中人參、黃芪、當歸相關制備方法進行制備。本研究使用設備均為同一設備，在使用前均做污染物處理，試劑均為化學純。見表1。

1.3 高效液相色譜相關參數

本研究使用的高效液相色譜儀為安捷倫公司生產的。在使用前均采用三種中藥的標準液對儀器的準確度進行效正。高效液相色譜儀的參數。見表2。

表1 樣品制備表

表2 高效液相色譜相關參數

1.4 真偽鑒別標準

根據與標準品對照觀察樣品的特征吸收峰和保留時間來判定人參、黃芪、當歸的真偽。無相關特征吸收峰和保留時間大于±5%則為偽品。

1.5 統計學方法

采用SPSS 19.0統計學軟件對數據進行分析，計數資料采用x2檢驗；以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1 兩組偽品鑒別

通過人參、黃芪、當歸每個中藥60樣本的測定，鑒別結果顯示。性狀鑒別組人參的偽品率1.6%、黃芪的偽品率3.3%、當歸的偽品率1.6%。高效液相色譜組的詳見表三人參的偽品率11.7%、黃芪的偽品率15%、當歸的偽品率為13.3%。通過卡方檢驗兩組間存在差異。將高效液相色譜組在進行高效液相色譜與常見偽品樣品進行鑒定，顯示人參7個的偽品為三七，黃芪9個偽品為甘草，當歸8個偽品為東當歸。說明高效液相色譜對于中藥的鑒別準確性要優于性狀鑒別法。差異有統計學意義（P＜0.05）。見表3。

表3 兩組偽品鑒別結果（n，%）

2.2 重復性檢驗結果

上述研究結果均有兩位本科室工作年限長熟悉相關工作的藥師分別完成。將兩位藥師換組進行鑒別結果如下：高效液相色譜組鑒別結果與以上相同。性狀鑒別組的偽品率為人參的偽品率為3.3%、黃芪的偽品率為3.3%、當歸的偽品率為1.6%，組內統計卡方檢驗為顯著性差異，差異有統計學意義（P＜0.05）。但5個樣品得到真偽不同的結果。說明高效液相色譜鑒別一致性好，性狀鑒別會因操作人員不一樣而存在不同結果。

3 討 論

中藥因為種類繁多，且同屬植物藥在性狀上的相似性高，導致不法商販在售賣的重要中參雜偽品。性別鑒別是最為傳統的鑒別中藥真偽的方法，性別鑒別的準確性往往因人而異，是一種不穩定性高的個人經驗總結。但是不可忽略的是性狀鑒別在大量鑒別中其的方便性。在醫院接受治療的患者往往病情嚴重，接受偽品治療可能導致病情延誤，導致患者錯過最佳的治療時間，甚至導致患者因偽品出現的病情加重。所以院內需要一種更為準確的科學的鑒別方法。本研究結果顯示高效液相色譜對于中藥的鑒別準確性要優于性狀鑒別法。評價鑒別方法的好壞不僅僅局限于研究的準確性上，還需考慮操作的重復性，重復性的定義為不同的操作者或者在不同儀器上使用同樣的鑒別方案，結果的一致性高。研究結果顯示高效液相色譜鑒別一致性好，但是性狀鑒別會導致同一樣品真偽鑒別結果相反。

采用高效液相色譜人參、黃芪、當歸顯示與評性狀鑒別存在差異，且高效液相色譜鑒別出來的偽品經與常見偽品進行對比，顯示準確。高效液相色譜的應用與中藥的指紋圖譜密不可分。中藥的指紋圖譜是不同中藥特有的。每種中藥都有其特征峰，因其的特異性，是高效液相色譜運用到中藥真偽鑒別的基礎。本研究觀察到的結果為人參方面，偽品為三七，均為五加科植物。但是兩組中藥的療效不同，人參主要作用為補氣而三七為止血，參雜偽品對與患者而言是不利的，程道海，等研究顯示可將三七和人參通過高效液相色譜進行鑒別。此外黃芪和甘草在有效成分黃芪皂苷的含量上是有差異的。以次充好無疑對治療效果有影響。兩藥物均屬蝶形花科，同科植物運用性狀鑒別難度大，通過有效成分在指紋圖譜上的差異可以對兩種藥物進行鑒別。普遍認為東當歸的質量要低于當歸，原因在與東當歸中揮發油成分要明顯的低于當歸。通過浸泡法對當歸中的揮發油進行提取保證了有效成分。王翰華等研究顯示，兩種中藥的相似程度高，阿魏酸的特征峰是鑒別兩種中藥的關鍵，因為當歸中阿魏酸的含量高，而東當歸中的阿魏酸含量較低。

中藥真偽鑒別是保證患者療效的基石，為避免患者使用以次充好的中藥材，采用高效液相色譜的方法，可以提高中藥鑒別的準確性。但是本研究不足的地方在于僅研究了三個常用中藥，并不能準確的反應高效液相色譜在總體中藥真偽鑒別中的作用，期待更多的研究出現。

[1] 于海杰.探討中藥枳實真偽優劣的鑒定方法[J].中國醫藥指南, 2016(4):184-185.

[2] 滕會會,杜守穎,白 潔,等.基于中藥指紋圖譜結合化學模式識別的清開靈軟/硬膠囊的成分分析[J].環球中醫藥,2016,9(6): 671-677.

本文編輯：趙小龍

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ISSN.2095-8242.2017.21.3975.02