丁苯酞對急性腦梗死患者血清炎癥因子及氧化應激水平的影響

安文峰，翟魯輝，馬玉朝，高朋飛

丁苯酞對急性腦梗死患者血清炎癥因子及氧化應激水平的影響

安文峰，翟魯輝△，馬玉朝，高朋飛

目的探討丁苯酞對急性腦梗死患者血清炎癥因子與氧化應激水平的影響。方法選取2014年3月—2016年9月我院神經內科收治的急性腦梗死患者120例，根據治療方法的不同分為常規治療組（56例）和丁苯酞組（64例）。常規治療組給予抗血小板聚集、改善微循環等常規治療，丁苯酞組在常規治療的基礎上加用丁苯酞注射液治療（100 mL靜脈滴注，每日2次）。分別檢測患者入院時，治療7 d、14 d的血清腫瘤壞死因子（TNF）-α、白細胞介素（IL）-6、IL-17、IL-23和氧化應激產物丙二醛（MDA）的水平，并評價其臨床療效。結果治療后第7天及第14天，2組患者血清TNF-α、IL-6、IL-17、IL-23，MDA水平均較治療前下降，差異均有統計學意義（P＜0.05），同時丁苯酞組上述指標均較常規治療組下降（P＜0.05）。2組均未出現明顯的不良反應。結論丁苯酞可通過抑制炎癥反應和對抗氧化應激等方面來改善急性腦梗死患者的臨床癥狀，改善預后。

腦梗死；炎癥；腫瘤壞死因子α；白細胞介素6；白細胞介素17；丙二醛；氧化性應激；丁苯酞

急性腦梗死（acute cerebral infarction，ACI）是神經內科的常見病和多發病，主要表現為腦組織缺血、缺氧性壞死，具有高病死率和致殘率的特點。近年來，炎癥因子與ACI發病的關系逐漸引起關注。已有研究證實，ACI患者中存在炎癥因子的高表達［1-2］。與此同時，ACI發生后會導致鈣離子大量內流，繼而產生大量的氧自由基和活性氧，加重腦組織的損傷程度［3］。丁苯酞是從芹菜籽中提取的藥物，其主要活性成分是dl-3-正丁基苯酞。作為我國自主研發的新型藥物，既往研究［4］和筆者前期的臨床觀察［5］已經證實，丁苯酞可明顯改善ACI患者的腦缺血程度，修復損傷的血管內皮細胞，改善患者預后。目前丁苯酞的作用機制尚不完全清楚，本研究旨在觀察丁苯酞對ACI患者血清炎癥因子及氧化應激水平的影響，探討其治療ACI的相關作用機制。

1 對象與方法

1.1 研究對象 選取我院2014年3月—2016年9月神經內科收治的ACI患者120例，其中男66例，女54例，年齡46～77歲，平均（58.4±3.2）歲。所有患者均于發病1周內入院。納入標準：（1）符合2010年中國急性缺血性腦卒中診治指南制定的ACI診斷標準［6］。（2）梗死部位經頭部CT或MRI證實。（3）無丁苯酞過敏史。排除標準：（1）年齡＞80 歲。（2）合并其他顱內病變。（3）伴有惡性腫瘤、免疫系統疾病、嚴重肝腎功能異常者。（4）孕婦及哺乳期婦女。所有入選對象對本研究的目的和意義均知情同意并簽署了知情同意書。

1.2 分組及治療 所有對象根據治療方法的不同分為常規治療組（56例）和丁苯酞組（64例）。常規治療組入院后給予抗血小板聚集（阿司匹林腸溶片300 mg/d，硫酸氫氯吡格雷片75 mg/d）、改善微循環、營養腦神經（胞二磷膽堿注射液0.5 g/d，靜脈滴注）治療。鹽酸二甲雙胍控制血糖，硝苯地平緩釋片控制血壓，阿托伐他汀鈣片控制血脂，并維持患者的水、電解質平衡。丁苯酞組在常規治療基礎上給予丁苯酞氯化鈉注射液（恩必普，100 mL，石藥集團恩必普藥業有限公司）100 mL靜脈滴注，每日2次，治療半個月。

1.3 指標檢測 分別于患者入院次日、治療第7天、第14天抽取空腹靜脈血5 mL，1 500×g離心10 min后分離血清。采用ELISA法檢測血清腫瘤壞死因子（TNF）-α、白細胞介素（IL）-6、IL-17、IL-23水平（試劑盒購自南京建成生物工程研究所）。應用硫代巴比妥酸法測定氧化應激產物血清丙二醛（MDA）的水平（試劑盒購自杭州碧云天生物科技有限公司）。

1.4 統計學方法 采用統計軟件SPSS 19.0進行數據分析。符合正態分布的計量資料統一采用均數±標準差（±s）表示，2組組內不同時間點均數比較采用重復測量資料的方差分析，時點間多重比較采用LSD-t法。相同時間點2組間比較采用t檢驗；計數資料以例（%）表示，組間比較采用χ2檢驗，檢驗水準α=0.05。

2 結果

2.1 2組一般資料比較 常規治療組和丁苯酞組患者的年齡、性別、糖尿病、高血壓患病比例及血脂水平差異均無統計學意義（均P＞0.05），見表1。2組間患者的基線資料均衡可比。

2.2 2組治療前后各指標變化 治療前，2組間除TNF-α、IL-23外各項指標差異無統計學意義。治療第 7 天，2組 TNF-α、IL-6、IL-17、IL-23 及 MDA水平均較治療前降低，差異有統計學意義（P＜0.05）。治療第14天，2組炎癥因子水平進一步下降。治療第7天和第14天時丁苯酞組各炎癥因子水平均較常規治療組降低，差異有統計學意義（均P ＜ 0.05），見表 2。

Tab.1 Comparison of the baseline data between two groups表1 2組基線資料比較

Tab.2 Comparison of the inflammatory cytokines and MDA levels between two groups表2 治療前后2組炎癥因子及MDA水平比較 （±s）

Tab.2 Comparison of the inflammatory cytokines and MDA levels between two groups表2 治療前后2組炎癥因子及MDA水平比較 （±s）

＊＊P＜0.01；a與治療前比較，b與治療第 7 天比較，P ＜ 0.05

組別常規治療組丁苯酞組t n TNF-α（ng/L）F 56 64治療前12.56±0.43 11.83±0.73 6.53＊＊治療第7天11.05±0.82a10.63±0.67a3.09＊＊治療第14天9.24±0.48ab8.55±0.65ab6.54＊＊426.40＊＊329.50＊＊F n組別常規治療組丁苯酞組t IL-6（ng/L）56 64治療前84.27±2.35 84.63±1.26 1.06治療第7天75.35±1.20a72.62±0.68a15.57＊＊治療第14天62.38±2.47ab55.84±0.82ab19.97＊＊1 618.34＊＊1 057.52＊＊組別n IL-17（ng/L）F治療前 治療第7天 治療第14天常規治療組丁苯酞組t 56 64 102.35±21.26 108.68±15.19 1.89 95.28±10.16a83.57±13.24a5.37＊＊71.35±9.28ab65.48±10.52ab3.22＊＊69.14＊＊174.83＊＊組別常規治療組丁苯酞組t n IL-23（ng/L）F 56 64治療前65.08±8.35 70.26±9.36 3.18＊＊治療第7天55.21±6.19a50.46±7.53a5.99＊＊治療第14天50.85±6.32ab42.89±4.22ab4.08＊＊60.34＊＊236.62＊＊組別常規治療組丁苯酞組t n MDA（μmol/L）F 56 64治療前5.62±1.26 5.44±0.98 0.88治療第7天4.50±0.83a4.33±0.64a1.94治療第14天3.63±0.77ab3.02±0.43ab5.44＊＊58.27＊＊40.62＊＊

3 討論

人體腦組織代謝旺盛，對缺血、缺氧等條件極其敏感，長時間的腦缺血會產生大量的氧自由基，加重組織的氧化損傷，極易引發患者神經功能障礙，甚至死亡。目前普遍認為，動脈粥樣硬化是發生腦梗死的致病基礎，而機體炎癥反應在動脈粥樣硬化形成過程中起著重要作用。腦缺血時，腦組織炎癥因子的水平急劇升高，從而誘發炎癥級聯反應，加重大腦的神經損傷［5］。Lambertsen 等［7］發現腦梗死患者血管內皮細胞損傷后，炎癥細胞可聚集在損傷的血管壁并分泌大量的炎癥因子。Boehme等［8］通過檢測1 244例腔隙性腦梗死患者的血清標本發現，IL-6和TNF-α的表達明顯升高，并且炎癥因子水平與抗血小板聚集治療的效果密切相關。Gu等［9］研究發現我國南部漢族腦梗死患者中血清IL-8、IL-6、IL-12和TNF-α的水平明顯升高。TNF-α、IL-6主要由淋巴細胞、單核巨噬細胞分泌，前者可促進腦缺血區域的細胞凋亡，后者可促進血管內皮細胞分泌多種黏附因子和炎癥介質，導致斑塊破裂和血栓形成［10］。因此，機體的炎癥因子水平在一定程度上反映了ACI的嚴重程度。

腦缺血時大量的炎性細胞浸潤，氧化中間產物大量堆積，進而發生氧化應激。過度的炎性反應可以減少局部腦組織的血流量、增加血腦屏障的通透性，引起大腦的繼發性損傷。Jena等［11］發現腦梗死患者血清缺血修飾白蛋白（IMA）和MDA的水平明顯升高，且兩者存在明顯的相關性。MDA是脂質過氧化的終產物，可影響線粒體內關鍵酶的活性，而線粒體功能的破壞與ACI的發生密切相關。

丁苯酞是從芹菜籽中提取的藥物，能夠穿過人體血腦屏障發揮藥效。既往研究發現，丁苯酞可通過清除脂質過氧化自由基、抑制血小板聚集和減弱神經膠質的激活等方面來保護血管內皮細胞，改善缺血區微循環及血流灌注，縮小腦梗死面積，發揮神經保護作用［3］。曹姍等［12］研究顯示，丁苯酞可改善急性腦梗死患者超敏C反應蛋白的水平，抑制炎性反應，促進神經細胞功能的恢復。劉悅等［13］發現腦梗死患者經丁苯酞治療14 d后，血清神經元特異烯醇化酶（NSE）、IL-6和TNF-α的水平較常規治療組明顯下降。目前，有關丁苯酞對腦梗死患者氧化應激水平影響的研究較少。Zhao等［14］發現丁苯酞可改善腦缺血模型大鼠大腦皮質和海馬神經元形態，增加膽堿乙酰轉移酶的活性，降低MDA和β淀粉樣蛋白的水平，提高大鼠認知能力。Sun等［15］通過大鼠骨髓干細胞（rBMSCs）的氧化應激損傷，建立體外腦缺血模型，經丁苯酞干預后細胞凋亡及氧化應激水平明顯下降。鄭小影等［16］通過建立大鼠腦缺血再灌注模型，經丁苯酞干預后，神經功能缺損評分和梗死體積均減少、超氧化物歧化酶（SOD）活性升高、MDA含量下降。本研究中，筆者發現2組經過治療后，血清 IL-6、IL-17、IL-23、MDA 的水平均出現一定下降，且同一時間點丁苯酞組較常規治療組下降更加明顯。結合筆者以往的臨床經驗，ACI患者在使用丁苯酞一個療程以后，腦卒中評分（NIHHS）下降明顯，且無明顯的不良反應［5］。最近Abdoulaye等［3］總結并提出丁苯酞主要通過抗血小板聚集和血栓形成、維持線粒體正常功能、抑制神經細胞凋亡、減少氧化應激產物的生成等方面來延緩ACI患者的疾病進展。結合本研究結果，筆者認為丁苯酞可通過抑制炎癥因子的表達，降低大腦的氧化應激水平來改善腦梗死患者的臨床癥狀。但是本研究的樣本量有限，另外抗血小板聚集及降脂藥物也有一定的抗炎作用，也可能會影響本研究的結果，加之丁苯酞的價格較貴，臨床應用還需考慮患者的經濟條件。

［1］Anolescu BN，Beneanu M，DumitruL，et al.Dynamics of inflammatory markers in post-acute stroke patients undergoing rehabilitation［J］.Inflammation，2011，34（6）：551-558.doi：10.1007/s10753-010-9262-8.

［2］Gelderblom M，Daehn T，Schatfling B，et al.Plasma levels of neuron specific enolase quantify the extent of neuronal injury in routine models of ischemic stroke and multiple sclerosis［J］.Neurobiol Dis，2013，59：177-182.doi：10.1016/j.nbd.2013.07.017.

［3］AbdoulayeIA，Guo YJ.A review ofrecentadvancesin neuroprotective potential of 3-N-Butylphthalide and its derivatives［J］.Biomed Res Int，2016，2016：5012341.doi：10.1155/2016/5012341.

［4］王以翠，常煥顯，孔令勝，等.阿加曲班對急性腦梗死患者血管內皮功能及炎癥因子的影響［J］.中山大學學報（醫學科學版），2015，36（6）：870-876.Wang YC，Chang HX，Kong LS，et al.Effectofargatroban on vascularendothelialfunction and inflammatory factors in patients with acute cerebral infarction［J］.Journal of Sun Yat-sen University（Medical Sciences），2015，36（6）：870-876.

［5］安文峰.丁苯酞氯化鈉注射液治療急性缺血性腦卒中臨床療效觀察［J］.中國實用神經疾病雜志，2016，19（10）：121.An WF.Clinical observation of Butylphthalide phthalein sodium chloride in treatment of acute ishemic stroke［J］.Chinese Journal of Practical Nervous Diseases，2016，19（10）：121.doi：10.3969/j.issn.1673-5110.2016.10.081.

［6］中華醫學會神經病學分會腦血管病學組急性缺血性腦卒中診治指南撰寫組.中國急性缺血性腦卒中診治指南2010［J］.中華神經科雜志，2010，43（2）：146-153.Guidelines for diagnosis and treatment of acute ischemic stroke writing group of cerebralvascular disease study group of neurology branch of Chinese Medical Association.Guidelines for diagnosis and treatment of acute ischemic stroke in 2010［J］.Chin J Neurol，2010，43（2）：146-153.

［7］Lambertsen KL，Biber K，Finsen B.Inflammatory cytokines in experimental and human stroke［J］.J Cereb Blood Flow Metab，2012，32（9）：1677-1698.doi：10.1038/jcbfm.2012.88.

［8］Boehme AK，McClure LA，Zhang Y，et al.Inflammatory markers and outcomes after lacunar stroke：levels of inflammatory markers in treatment of stroke study［J］.Stroke，2016，47（3）：659-667.doi：10.1161/STROKEAHA.115.012166.

［9］Gu L，Wu Y，Hu S，et al.Analysis of association between MAP2K4 gene polymorphism rs3826392 and IL-1b serum level in southern Chinese Han ischemic stroke patients［J］.J Stroke Cerebrovasc Dis，2016，25（5）：1096-1101.doi：10.1016/j.jstrokecerebrovasdis.2015.12.035.

［10］Jiang C，Kong W，Wang Y，et al.Changes in the cellular immune system and circulating inflammatory markers of stroke patients［J］.Oncotarget,2017,8（2）：3553-3567.doi：10.18632/oncotarget.12201.

［11］Jena I，Nayak SR，Behera S，et al.Evaluation of ischemia-modified albumin，oxidative stress，and antioxidant status in acute ischemic stroke patients［J］.J Nat Sci Biol Med，2017，8（1）：110-113.doi：10.4103/0976-9668.198346.

［12］曹姍，董輝.丁苯酞注射液對急性腦梗死療效及超敏C反應蛋白的影響［J］.中國藥業，2016，25（2）：30-32.Cao S，Dong H.Efficacy of butylphthalide injection in treating acute cerebral infarction and its influence on high sensitivity reactive C protein［J］.China Pharmaceuticals，2016，25（2）：30-32.

［13］劉悅，畢齊.丁苯酞對急性腦梗死患者NSE、IL-6、TNF-α表達水平的影響［J］.實用藥物與臨床，2015，18（12）：1436-1438.Liu Y，Bi Q.Effects of butylphthalide on NSE，IL-6 and TNF-α in acute cerebral infarction patients［J］.Practical Pharmacy and Clinical Remedies，2015，18（12）：1436-1438.doi：10.14053/j.cnki.ppcr.201512009.

［14］Zhao W，Luo C，Wang J，et al.3-N-butylphthalide improves neuronal morphology after chronic cerebral ischemia［J］.Neural RegenRes，2014，9（7）：719-726.doi：10.4103/1673-5374.131576.

［15］Sun B，Feng M，Tian X，et al.DL-3-n-Butylphthalide protects rat bone marrow stem cells against hydrogen peroxide-induced cell death through antioxidation and activation of PI3K-Akt pathway［J］.Neurosci Lett，2012，516（2）：247-252.

［16］鄭小影，孔維，趙淑敏，等.丁苯酞預處理對腦缺血再灌注大鼠海馬微血管構筑和自由基代謝的影響［J］.天津醫藥，2015，43（8）：867-870.Zheng XY，Kong W，Zhao SM，et al.Effects of 3-nbutylphthalide pretreatment on microvascular architecture and free radical metabolism in hippocampus induced by cerebral ischemia/reperfusion［J］.Tianjin Med J，2015，43（8）：867-870.doi:10.11958/j.issn.0253-9896.2015.08.010.

（2017-03-08收稿 2017-04-20修回）

（本文編輯 胡小寧）

Effects of butylphthalide on serum inflammatory cytokines and oxidative stress products in patients with acute cerebral infarction

AN Wen-feng,ZHAI Lu-hui△,MA Yu-chao,GAO Peng-fei
Department of Neurology,Xuchang Central Hospital,Xuchang 461000,China△

E-mail:zhailuhui@sohu.com

ObjectiveTo investigate the effects of butylphthalide injection on serum levels of inflammatory factors and oxidative stress products in patients with acute cerebral infarction.MethodsA total of 120 patients with acute cerebral infarction were selected in our hospital from March 2014 to September 2016.Patients were divided into conventional treatment group(n=56)and butylphthalide group(n=64)according the therapeutic methods.The conventional treatment group was treated with improving microcirculation and resisting blood platelet aggregation,while the butylphthalide group was injected with butylphthalide(100 mL intravenous drip,twice a day)on the basis of conventional treatment.The levels of tumor necrosis factor(TNF)-α,interleukin(IL)-6,IL-17,IL-23 and methane dicarboxylic aldehyde(MDA)were detected before the treatment and 7 days,14 days after the treatment.The clinical efficacy was also accessed.ResultsThe TNF-α,IL-6,IL-17,IL-23 and MDA levels were significantly decreased 7 days and 14 days after the treatment than those before the treatment in two groups of patients(P＜0.05).And the above indexes were also decreased in butylphthalide group than those of conventional treatment group(P＜0.05).No obvious adverse reactions were observed in two groups.ConclusionButylphthalide can improve the clinical symptoms through the inhibition of inflammation and oxidative stress in patients with acute cerebral infarction.

brain infarction;inflammation;tumor necrosis factor-alpha;interleukin-6；interleukin-17;malondialdehyde;oxidative stress;butylphthalide

R743.33

：A

10.11958/20170308

河南省許昌市中心醫院神經內科（郵編461000）

安文峰（1976），男，本科，副主任醫師，主要從事腦血管疾病的預防與治療方面研究

△通訊作者 E-mail:zhailuhui@sohu.com