尿NGAL、KIM-1和IL-18聯合檢測對兒童急性腎損傷早期診斷的價值

祁潔，王釗華，趙鴻斌，董自杰

（1.石家莊市第一醫院檢驗科，河北石家莊050000；2.石家莊市第四醫院檢驗科，河北石家莊050011；3.石家莊市第三醫院檢驗科，河北石家莊050011）

尿NGAL、KIM-1和IL-18聯合檢測對兒童急性腎損傷早期診斷的價值

祁潔1，王釗華2，趙鴻斌1，董自杰3

（1.石家莊市第一醫院檢驗科，河北石家莊050000；2.石家莊市第四醫院檢驗科，河北石家莊050011；3.石家莊市第三醫院檢驗科，河北石家莊050011）

目的探討尿中性粒細胞明膠酶相關脂質運載蛋白(NGAL)、腎損傷分子-1(KIM-1)及白細胞介素-18(IL-18)聯合檢測在兒童急性腎損傷(AKI)早期診斷中的價值。方法選擇2015年1月至2016年8月期間石家莊市第一醫院兒科診治的32例AKI患兒為研究對象，檢測不同時間及不同分期AKI患兒尿NGAL、KIM-1、IL-18和血肌酐的變化。結果AKI患兒尿NGAL、KIM-1、IL-18在診斷前3 d分別為(1.23±0.28)μg/mL、(37.58± 5.88)ng/mL、(30.35±6.21)ng/mL，在診斷前2 d分別為(1.77±0.39)μg/mL、(43.29±6.32)ng/mL、(36.49±9.35)ng/mL，及診斷前1 d水平(2.28±0.71)μg/mL、(60.38±12.83)ng/mL、(58.32±20.12)ng/mL，均明顯依次升高，差異均有統計學意義(P?0.05)；但是血肌酐在診斷前1 d與診斷前2 d、3 d比較差異均無統計學意義(P＞0.05)；尿NGAL、KIM-1、IL-18及血肌酐水平在AKI 1期為(2.68±0.48)μg/mL、(69.23±5.31)ng/mL、(65.84±6.43)ng/mL，2期為(3.19±0.41)μg/mL、(60.38±12.83)ng/mL、(73.29±6.68)ng/mL，3期為(3.81±0.42)μg/mL、(89.67±6.22)ng/mL、(81.31±7.42)ng/mL，均依次升高，差異均有統計學意義(P?0.05)。結論尿NGAL、KIM-1、IL-18在兒童AKI早期即可明顯升高，三者聯合檢測對早期診斷兒童AKI具有重要意義。

急性腎損傷；中性粒細胞明膠酶相關脂質運載蛋白；腎損傷分子-1；白細胞介素-18

急性腎損傷(acute kidney injury，AKI)目前在我國的發病率呈逐年升高的趨勢，是腎內科、重癥醫學科臨床常見急重癥之一[1]。AKI也是嚴重影響重癥患兒預后的常見疾病，國際腎臟病和急救醫學界提出AKI的概念代替既往急性腎功能概念的出發點就是希望在患兒已經發生腎功能異常但尚未進入腎衰竭階段時予以及時診斷、干預[2]。目前認為AKI患兒預后不佳的最重要的原因是缺乏早期診斷的可靠指標，無法及時發現AKI并采取治療措施。因此，尋找準確、可靠的無創標志物對兒童AKI進行早期診斷具有重要意義。本研究旨在探討尿液中性粒細胞明膠酶相關脂質運載蛋白(NGAL)、腎損傷分子-1(KIM-1)及白細胞介素-18(IL-18)和其在兒童AKI早期診斷中的臨床意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料采用臨床前瞻性研究，選擇2015年1月至2016年8月期間我院兒科診治的200例腎臟病患兒為研究對象，其中有32例患兒合并AKI，男性20例，女性12例；年齡5～14歲，平均(9.2±6.1)歲；過敏性紫癜10例、藥物中毒8例、腎病綜合征6例及心肺搭橋術后6例，其他2例。排除標準：存在慢性腎臟病基礎、急進性腎小球腎炎、梗塞性腎病及正在服用激素或免疫抑制劑治療的患兒。

1.2 AKI診斷及分期標準[3]腎功能在48 h內迅速降低，血肌酐升高在26.4 mol/L及以上，或者其水平相對于基礎值升高在50%及以上；或者尿量? 0.50 mL/(kg·h)≥6 h，并將其分為1期、2期、3期。

1.3 血肌酐及尿NGAL、尿KIM-1及尿IL-18的測定患兒入院后每天對尿NGAL、尿KIM-1及尿IL-18進行測定。方法如下：收集患兒晨尿8 mL，以3 000 r/min的速度離心10 min，將上清液收集待測。尿NGAL、KIM-1及IL-18的測定采用酶聯免疫吸附法(ELISA)，嚴格按照按照試劑盒說明書進行操作。血肌酐的檢測采用全自動生化儀進行檢測。

1.4 統計學方法應用SPSS19.0統計學軟件進行數據分析，計量資料以均數±標準差(x-±s)表示，多組樣本均數比較采用方差分析，兩樣本均數比較采用t檢驗，均以P?0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 AKI患兒不同時間尿NGAL、KIM-1、IL-18及血肌酐水平比較AKI患兒診斷當天尿NGAL、KIM-1、IL-18及血肌酐水平均明顯高于診斷前(1 d、2 d及3 d)，差異均有統計學意義(P?0.05)；患兒尿NGAL、KIM-1、IL-18在診斷前3 d、診斷前2 d及診斷前1 d水平均明顯依次升高,差異均有統計學意義(P?0.05)；但是血肌酐在診斷前1 d與診斷前2 d、3 d比較差異均無統計學意義(P＞0.05)，見表1。

表1 AKI患兒不同時間尿NGAL、KIM-1、IL-18及血肌酐水平比較(x-±s，n=32)

2.2 不同分期AKI患兒尿NGAL、KIM-1、IL-18及血肌酐水平比較32例AKI患兒中有10例患兒為1期，13例患兒為2期，9例患兒為3期；尿NGAL、KIM-1、IL-18及血肌酐水平在AKI 1期、2期及3期患兒水平均依次升高，差異均有統計學意義(P?0.05)，見表2。

表2 不同分期AKI患兒尿NGAL、KIM-1、IL-18及血肌酐水平比較(x-±s)

3 討論

兒童急性腎損傷發病率近年來呈逐年上升趨勢，Duzova等[4]研究認為引起兒童AKI最常見的病因包括缺氧缺血性腎病、膿毒癥、腎病綜合征、腎前性因素及藥物因素等等。血肌酐等傳統腎功能指標可以反映腎小球濾過率(GFR)的改變，但其應用于早期AKI的診斷具有較差的敏感性，首先因為血肌酐水平可受到多種因素的影響如年齡、性別、營養狀況及肌肉代謝情況等；其次，腎臟具有強大的儲備、代償能力，血肌酐只有在GFR下降到正常值的一半左右時才會明顯上升，因此難以及時、準確地對腎功能的改變做出反應。本研究中AKI患兒血肌酐在診斷前1 d與診斷前2 d、3 d比較差異無統計學意義(P＞0.05)，進一步說明了血肌酐對AKI早期診斷的敏感性較差。因此，進一步探索可以早期診斷AKI的可靠標志物，以早期識別、干預兒童AKI，對改善患兒預后具有重要的臨床意義。

目前研究較多的AKI生物學標志物主要包括胱抑素-C、尿N-乙酰βD氨基葡萄糖苷酶、尿微量白蛋白、NGAL、KIM-1、血管內皮生長因子、IL-18等等[5]。本研究針對尿NGAL、KIM-1、IL-18聯合檢測對兒童AKI的早期診斷價值進行了探索。其中NGAL是一種急性期反應蛋白，目前被較多的臨床研究證實AKI患者早期血清和尿中NGAL水平即可明顯增高。NGAL的生物學功能可能包括參與趨化、免疫應答、減輕氧化應激損傷；當機體發生炎癥反應或上皮細胞受到損傷性刺激時，NGAL才被誘導并且在受損的腎小管高表達[6]。研究證實NGAL診斷AKI的敏感度和特異度分別高達90%和99.5%[7]。KIM-1作為一種新的Ⅰ型跨膜糖蛋白可高表達于損傷后的腎近曲小管上皮細胞，可以參與其早期損傷和修復以及腎間質的纖維化過程。何楠等[8]研究發現尿中KIM-1在AKI患者明顯升高，其原因可能與氧化應激反應有關，并且指出檢測尿中KIM-1水平有助于AKI的早期臨床診斷。IL-18是一種具有促炎癥反應作用的、主要是由單核巨噬細胞產生的一種細胞因子，其可在AKI發生后在近端腎小管上皮細胞內參與炎癥和免疫反應[9]。研究證實尿IL-18水平與AKI的嚴重程度呈正相關[10]。我們對AKI患兒不同時間尿NGAL、KIM-1、IL-18及血肌酐水平進行了比較，發現AKI患兒尿NGAL、KIM-1、IL-18在診斷前2 d即開始顯著升高，且臨近診斷當天其升高水平越來越明顯，并且對于已經診斷后的AKI患兒，其尿NGAL、KIM-1、IL-18水平隨著AKI分期的增高而增高，說明尿NGAL、KIM-1、IL-18水平不僅在AKI早期升高明顯，并且與AKI的嚴重程度密切相關。

綜上所述，早期對AKI進行識別、診斷是改善患兒預后的關鍵，尿NGAL、KIM-1、IL-18在兒童AKI早期即可明顯升高，三者聯合檢測對早期診斷兒童AKI具有重要意義。

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Value of combined detection of urinary NGAL,KIM-1 and IL-18 in early diagnosis of children with acute kidney injury.

QI Jie1,WANG Zhao-hua2,ZHAO Hong-bin1,DONG Zi-jie3.
1.Department of Clinical Laboratory,the First Hospital of Shijiazhuang,Shijiazhuang 050000,Heibei,CHINA;2.Department of Clinical Laboratory,the Fourth Hospital of Shijiazhuang,Shijiazhuang 050011,Heibei,CHINA;3.Department of Clinical Laboratory,the Third Hospital of Shijiazhuang,Shijiazhuang 050011,Heibei,CHINA

ObjectiveTo investigate the value of combined detection of urinary neutrophil gelatinase-associated lipocalin(NGAL),renal injury molecule-1(KIM-1)and interleukin-18(IL-18)in early diagnosis of children with acute kidney injury(AKI).MethodsThirty-two cases of children with AKI who diagnosed and treated in Department of Pediatrics in the First Hospital of Shijiazhuang from January 2015 to August 2016 were enrolled in this study.The changes of urinary NGAL,KIM-1,IL-18 and serum creatinine(Scr)in children with AKI at different time and different stages were compared.ResultsThe levels of urinary NGAL,KIM-1 and IL-18 in the children with AKI were signifi-cantly increased at 3 d,2 d,1 d before diagnosis in turn：at 3 d before diagnosis(1.23±0.28)μg/mL,(37.58±5.88)ng/mL, (30.35±6.21)ng/mL,2 days before diagnosis(1.77±0.39)μg/mL,(43.29±6.32)ng/mL,(36.49±9.35)ng/mL,and 1 day before diagnosis(2.28±0.71)μg/mL,(60.38±12.83)ng/mL,(58.32±20.12)ng/mL,with statistically significant difference(P?0.05);However,there was no significant difference in Scr between at 1 d and the 2 d,3 d before diagnosis(P＞0.05).Urinary NGAL,KIM-1,IL-18 and Scr levels were significantly increased in AKIⅠ,Ⅱ,Ⅲstages in turn：AKIⅠstage(2.68±0.48)μg/mL,(69.23±5.31)ng/mL,(65.84±6.43)ng/mL,Ⅱstage(3.19±0.41)μg/mL,(60.38±12.83)ng/mL, (73.29±6.68)ng/mL,andⅢstage(3.81±0.42)μg/mL,(89.67±6.22)ng/mL,(81.31±7.42)ng/mL,with statistically significant difference(P?0.05).ConclusionUrinary NGAL,KIM-1 and IL-18 were significantly elevated in children with earlyAKI,and the combined detection of them have great significance in the early diagnosis ofAKI in children.

Acute renal injury(AKI);Neutrophil gelatinase-associated lipocalin(NGAL);Renal injury molecule-1(KIM-1);Interleukin-18(IL-18)

R726.9

A

1003—6350（2017）11—1779—03

2016-12-09)

10.3969/j.issn.1003-6350.2017.11.020

董自杰。E-mail：wanghuangrx@163.com