阿立哌唑片有效成分含量測定方法研究

陳麗+馬書玉

（牡丹江友搏藥業有限責任公司）

摘 要：目的：結合文獻方法及中美藥典方法，通過方法學研究，建立可操作性更強的測定阿立哌唑片有效阿立哌唑含量的分析方法。方法：高效液相色譜法。色譜柱為ODS-A色譜柱（46mm×25cm，5？滋m）；流動相A為：乙腈和0.05%三氟乙酸（10：90），流動性B為乙腈和0.05%三氟乙酸（90：10），進行梯度洗脫；流速：1.2ml/min，進樣量：20μl，紫外檢測器波長設為254nm；色譜柱柱溫設為35℃。結果：有效成分阿立哌唑進樣量在0.5186～5.1860μg與峰面積呈良好的線性關系（r=0.9999），加樣回收率為100.47%，RSD為1.08%；結論：本方法測定阿立哌唑片含量準確、重復性較好，可操作性及方便性由于現藥典方法，可以成為阿立哌唑片含量測定方法。

關鍵詞：阿立哌唑片；高效液相色譜法；含量測定

阿立哌唑是一種新型的非典型抗精神分裂癥藥物，對DA能神經系統具有雙向調節作用，是DA遞質的穩定劑。與D2、D3、5-HT1A和5-HT2A受體有很高的親和力。通過對D2和5-HT1A受體的部分激動作用及對5-HT2A受體的拮抗作用來產生抗精神分裂癥作用的。用于治療各類型的精神分裂癥。可作為重性抑郁障礙，抽動障礙和與自閉癥相關的煩躁的附加治療。國外臨床試驗表明，對精神分裂癥的陽性和陰性癥狀均有明顯療效，也能改善伴發的情感癥狀，降低精神分裂癥的復發率。

本文參考了國內外多篇文獻及歐美藥典標準，最終建立了適宜仿制制劑的，可靠穩定的阿立哌唑定量方法。

1 儀器與材料

高效液相色譜儀：Thermo UltiMate3000型，電子分析天平：梅特勒XS205。阿立哌唑對照品 （批號 100776-200501）由中國藥品生物制品檢定所提供。流動相用乙腈為色譜純；三氟乙酸為分析純；水為超純水；樣品為公司自制阿立哌唑片。

2 方法與結果

2.1 色譜條件[1]：

色譜柱：Inertsil ODS-A（46mm×25cm，5？滋m）；柱溫：35℃

流動相：流動相A為：乙腈和0.05%三氟乙酸（10：90），流動性B為乙腈和0.05%三氟乙酸（90：10）。梯度洗脫配比情況如下：0至2min流動相A：80%；2至10min流動相A：80%→65%；10至20min流動相A：65%→10%；20至25min流動相A：10%；25至26min流動相A：10%→80%；26至35min流動相A：80%。

波長：254nm

流速：1.2ml/min，進樣量：20μl

2.2 稀釋劑、對照品儲備液與對照品溶液的制備

稀釋劑：乙腈：甲醇：水：乙酸 （30：10：60：1）

對照品儲備液：稱取阿立哌唑對照品103.72mg，置100mL量瓶中，并記錄，加入稀釋劑使溶解并定容至刻度，制得1mg/ml的對照品儲備液，并注意避光保存。精密量取上述儲備液對照品1ml置10ml容量瓶中，加稀釋劑至刻度，搖勻，即得對照品溶液。

2.3 供試品溶液制備：取阿立哌唑片10片，研細，精密稱取約相當于阿立哌唑10mg的粉末，置100mL容量瓶中，加入稀釋劑適量，超聲處理10分鐘，放冷，加稀釋劑至刻度后，搖勻，濾過，作為供試品溶液。

依照2.1項色譜條件進行測定。

2.4 方法學驗證

2.4.1 線性關系考察

精密量取2.2項下的對照品溶液儲備液0.25ml，0.5ml，1ml，1.5ml，2.0ml，2.5ml置10ml容量瓶中，分別加稀釋劑溶解至刻度，搖勻，制成25，50，100，150，200，250μg/ml的線性關系考察用對照品溶液。按2.1色譜條件進行測定并記錄色譜圖，以峰面積A為縱坐標，以對照品溶液濃度C為橫坐標，制得標準曲線，計算回歸方程：A=0.3428C+0.3127 r=0.9999。結果：阿立哌唑濃度在25.93～259.30μg/ml（進樣體積20μl），即進樣量在0.5186～5.1860μg范圍內，線性關系良好。

2.4.2 精密度試驗

精密量取2.2項下阿立哌唑對照品溶液依照上述色譜條件連續進樣6針，每針20μl，記錄色譜圖，以峰面積A為考察指標，計算相對標準偏差RSD值，應小于2%。試驗結果見表2。

結果：阿立哌唑對照品溶液連續進樣6次，峰面積相對標準偏差RSD值小于2%，表明精密度良好。

2.4.3 重復性試驗

按照2.3項下供試品溶液制備方法，取同一批次阿立哌唑片樣品（規格10mg）平行制備6份供試品溶液，取對照品溶液及供試品溶液各20μl分別進樣，記錄色譜圖，外標一點法，計算阿立哌唑的含量，結果：6份平行樣品的阿立哌唑含量RSD值為0.92%，低于于2%表明供試品處理方法可靠穩定。

2.4.4 回收率試驗

取阿立哌唑片10片，研細，精密稱取約相當于阿立哌唑5mg的粉末9份，分別置100mL容量瓶中，加入阿立哌唑對照品儲備液溶液4ml，5ml，6ml各三份，再加入稀釋劑適量，超聲處理10分鐘，放冷，加稀釋劑至稀釋刻度后，搖勻，濾過，作為供回收率試驗用的供試品溶液。經過0.45μm濾膜，分別精密量取本項下供試品溶液各20μl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖，外標法計算含量和加樣回收率。結果：低濃度回收率分別為：101.69%、99.58%、101.14%，平均回收率100.80%；中濃度回收率分別為：99.07%、101.93%、99.19%，平均回收率100.06%；高濃度回收率分別為：99.94%、99.93%、101.77%，平均回收率100.55%。三個濃度9個供試品回收率數據的平均值為100.47，RSD為1.08%。

結論：阿立哌唑的加樣回收率在99.07%～101.93%之間，三個濃度9個供試品回收率數據的平均值為100.47，RSD為1.08%，表明該方法準確可靠。

2.5 樣品測定

采用上述建立的方法對公司自制的四批阿立哌唑片樣品的含量進行測定，以通過實際測定進一步證明方法可行性。四批阿立哌唑片樣品的含量測定結果分別為：10.02mg/片、10.03mg/片、10.01mg/片、9.99mg/片。符合含量要求。表檢驗方法可靠。

3 討論

本文旨在建立可測定阿立哌唑片有效成份阿立哌唑含量的分析方法。在試驗前對中國藥典方法和美國藥典方法進行了比較。通過方法學對比試驗，認為美國藥典色譜條件更加可靠。首先，阿立哌唑不穩定，在色譜流動相系中美國藥典為三氟乙酸可能對阿立哌唑有保護作用或是改善分離效果。另外，阿立哌唑見光不穩定，需要注意避光操作。再有，美國藥典色譜柱為ODS-A，，中國藥典并未強調使用ODS，只說明填料為十八烷基鍵合硅膠。實際上，普通十八烷基鍵合硅膠柱與ODS（美國藥典L1）還是有一定區別的。本次試驗依據美國藥典的方法制定，通過試驗證明該方法可以用于阿立哌唑片有效成份阿立哌唑含量的測定。

參考文獻

[1]美國藥典.USP38-NF33 S2.