PRRSV滅活疫苗與弱毒疫苗的免疫效果比較

劉清源

(廣東省惠州市惠城區馬安畜牧獸醫與漁業站，廣東 惠州 516001）

PRRSV滅活疫苗與弱毒疫苗的免疫效果比較

劉清源

(廣東省惠州市惠城區馬安畜牧獸醫與漁業站，廣東 惠州 516001）

為比較豬藍耳病滅活疫苗與弱毒疫苗的免疫效果，本試驗在惠城區某豬場隨機選取100頭仔豬，分成兩組，分別免疫豬藍耳病滅活疫苗與弱毒疫苗，采用ELISA方法檢測血清中的抗體水平，并對兩組抗體的S/P值進行比較。結果表明，豬藍耳病弱毒疫苗產生的抗體水平比滅活疫苗高，滅活疫苗免疫效果較差，且抗體持續時間短。本研究為豬場藍耳病的防控及免疫程序的制定提供理論依據。

PRRSV；滅活疫苗：弱毒疫苗；比較

豬藍耳病是由豬繁殖與呼吸綜合征病毒（porcine reproductive and respiratory syndrome virus，PRRSV）引起的一種高致病性傳染病[1]。由于PRRSV具有免疫抑制的特點，病豬對其他疾病的抵抗能力也會降低，增加混合感染的風險，給養豬業造成巨大的經濟損失。該病無特效治療藥物，對豬群進行疫苗免疫和抗體水平監測是防止PRRSV感染的重要手段[2]。我國的PRRSV商品化疫苗以滅活疫苗和弱毒疫苗為主[3]。為比較兩種疫苗免疫效果，探討2種疫苗的選用及免疫程序的制定，本試驗分別使用上述兩種疫苗對惠城區某豬場的100頭豬進行分組免疫，于免疫14 d、28 d、42 d、56 d、70 d后采集血清樣品，采用ELISA試劑盒進行抗體檢測，并對兩種疫苗的免疫效果進行比較和分析，為豬場疫苗的選擇及免疫時間的確定提供參考。

1 材料和方法

1.1 儀器及試劑

酶標儀ELX800，購自BIOTEK公司；PRRSV抗體試劑盒，購自武漢科前生物公司。

1.2 疫苗

PRRSV滅活疫苗（NVDC-JAXI株）和弱毒疫苗（JAXI-R株）均為國家招標疫苗。

1.3 動物分組及免疫情況

將某豬場100頭豬豬分為A、B兩組，每組50頭，A組接種滅活疫苗，2 mL/頭；B組接種弱毒疫苗，1頭份/頭，均在頸部肌肉注射，首免后48 d進行二免。

1.4 血清的制備

分別于免疫前、免疫后1 4d 、28 d、42 d、56 d、70 d后從豬前腔靜脈采血，6 000 r/min離心15 min，取上清于4℃保存備用。

1.5 抗體檢測方法

待檢血清采用E L ISA方法檢測PRRSV抗體，具體操作步驟參照試劑盒說明書進行。

1.6 結果判定

通過計算樣品孔與陽性孔 OD630nm比值 S/P 值來判定被檢血清PRRSV抗體的結果。判定標準：S/P 值＞0．42，判定被檢血清藍耳病病毒抗體陽性；S/ P值＜0．42，則判定被檢血清藍耳病抗體陰性。

2 結果與分析

2.1 PRRSV抗體檢測陽性率比較

免疫后，A、B兩組抗體陽性率有所升高，A組抗體陽性數隨時間延長不斷增加，二免28 d后，陽性率達到94%；B組在免疫后42 d，抗體陽性率達到100%，二免后抗體水平趨于穩定。B組陽性率在首免后不同時間段內抗體陽性率均高于A組，對豬群的保護作用較A組理想（見表1）。

2.2 PRRSV疫苗誘導抗體的檢測結果

從兩種疫苗接種后PRRS V抗體S/P值來看（見圖1），弱毒疫苗激發機體產生的抗體滴度要明顯高于滅活疫苗，B組在首免后抗體水平不斷升高，二免后抗體增幅較大，二免28 d后抗體水平達到最高值；A組在免疫后抗體滴度開始升高，首免后28～42 d抗體S/P值出現下降的現象，加強免疫后，PRRSV抗體滴度繼續升高，B組接種疫苗28 d內，二免抗體水平高于首免。

3 討論

本研究表明，PRRSV弱毒疫苗接種后能快速激發機體產生抗體，從表1中可以看出，接種弱毒疫苗28 d后，B組試驗豬群的平均抗體滴度超過國家規定的“抗體合格率超過70%”的標準。而A組結果顯示，PRRSV滅活疫苗在二免前豬群抗體合格率僅為64%，需要進行補免才能使抗體合格率達到國家的基本要求。圖1結果顯示，B組在接種弱毒疫苗28 d后，PRRSV抗體檢測結果呈陽性。隨后，S/P值繼續升高，表明體內的抗體滴度在免疫后不斷增強，抗體水平穩定，能夠有效保護豬群不受該病的感染。而A組在接種滅活疫苗后28 d，仍有部分豬的抗體S/P值低于0．42，表1 中A組在免疫后42 d相比2周前抗體陽性率較高，但是在28～42 d內，S/P值還出現下降的趨勢，說明首免28 d后抗原蛋白在機體內激發抗體產生的能力已開始減弱，因此，即使抗體陽性率符合規定標準，仍需對抗體S/P值進行定期監測，不能忽視因為體內抗原降解而導致的豬群在出欄前抗體水平下降。二免后抗體水平雖然有所上升，首免70 d后，還存在個別豬出現抗體陰性的現象。在整個免疫過程中，滅活疫苗誘導的抗體始終低于弱毒疫苗，弱毒疫苗在接種1頭份/頭即可產生良好的效果，無需進行二次免疫。而滅活疫苗要達到國家規定的抗體合格率，則需進行加強免疫，時間設置在首免30日左右最為適宜。

表1 PRRSV滅活疫苗與弱毒疫苗免疫組的抗體陽性率 %

圖1 接種疫苗后PRRSV抗體S/P值變化情況

PRRSV滅活疫苗安全性較高，易于運輸和保存，使用方便，因此為眾多養殖戶所青睞[4]。滅活疫苗可能在加工過程中造成一些重要的抗原表位喪失[5]，僅能誘導機體產生體液免疫，導致首免效果不理想，需要二次免疫才能產生對豬群的有效保護。而弱毒疫苗具有快速誘導抗體產生，抗體有效時間長等優點，近年來也備受用戶關注，這可能是因為弱毒疫苗接種后，機體內部免疫與自然感染病毒類似，能同時誘導體液反應和細胞免疫反應[6]，使得抗體的產生速度更快，持續時間更長。但是PRRSV弱毒疫苗使用過程中存在安全性方面的問題，活的毒株可能在豬體內發生弱毒返強的現象。豬場在疫苗選擇的問題上，應該根據具體實際情況而定，在周邊PRRSV感染威脅較小的情況下，應盡可能選用滅活疫苗，增加免疫次數，進行定期抗體水平監測，以期達到凈化PRRSV的目的[7]。而在PRRSV流行地區，或豬場已經暴發該病，則應選用弱毒疫苗，但需注意的是，斷奶仔豬不宜接種弱毒疫苗，因為部分弱毒疫苗可能由于減毒效果不理想，使抵抗力較低的仔豬出現“疫苗毒”感染[8]。另外，PRRSV弱毒疫苗的毒株在機體內容易與其他毒株發生重組，產生病毒變異株，因而豬場在選用弱毒疫苗時，應盡量避免不同毒株的疫苗混用。

[1] 李祥健， 劉有昌， 趙東升． 豬藍耳病[J]． 畜禽業， 2009 (3)： 64-66．

[2] 劉生杰， 劉成文． 豬藍耳病及繼發感染試驗診斷與綜合防治研究[J]． 中國農學通報， 2007， 23(9)： 40-43．

[3] 邱立新， 鄭杰． 高致病性豬藍耳病的臨床診斷與防治[J]． 中國畜牧獸醫，2008， 35(1)： 114-115．

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[5] VANHEE M， DELPUTTE P L，DELRUE I， et al． Development of an experimental inactivated PRRSV vaccine that induces virusneutralizing antibodies[J]． Veterinary research， 2009， 40(6)： 1-15．

[6] 王小三， 張春杰， 趙星燦． 豬繁殖與呼吸障礙綜合征疫苗的應用現狀及研究進展[J]． 河南農業科學， 2012， 41(3)：12-15， 25．

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[8] 吳錦艷， 田宏， 尚佑軍， 等． 高致病性豬藍耳病病毒 GS/LZh/07 株的分離， 鑒定及其非結構蛋白 Nsp2 基因特性分析[J]． 畜牧獸醫學報， 2009，40(3)： 438-443．

2017-02-16）

劉清源（1990-），男，廣東惠州人，碩士研究生，從事臨床獸醫方面研究