手工微柱凝膠免疫檢驗法在ABO、RhD血型抗原鑒定中的應用效果

鐘勝英

（廣東省興寧市人民醫院興寧 514500）

手工微柱凝膠免疫檢驗法在ABO、RhD血型抗原鑒定中的應用效果

鐘勝英

（廣東省興寧市人民醫院興寧 514500）

目的：觀察手工微柱凝膠免疫檢驗法在ABO、RhD血型抗原鑒定中的應用效果。方法：選擇2015年1月～2016年12月在我院健康體檢者1 059例作為研究對象，分別采取手工微柱凝膠免疫檢驗法和常規試管法進行ABO、RhD血型抗原鑒定，對這兩種檢驗方法的血型抗原檢驗結果進行統計分析。結果：手工微柱凝膠免疫檢驗法與常規試管法的血型檢驗方法對體檢者ABO、RhD血型抗原檢驗結果符合率為100%，兩種方法比較，檢驗結果差異無統計學意義（P＞0.05）。結論：在血型檢驗過程中，手工微柱凝膠免疫檢驗法與試管法的檢驗結果無明顯差異，但手工微柱凝膠免疫檢驗法相對于試管法具有操作方便、結果判斷清晰、靈敏度更高的優勢，臨床價值顯著。

血型；抗原鑒定；手工微柱凝膠免疫檢驗法；試管法

血型是一種人體遺傳性狀，是人體各種細胞、各種體液成分的抗原抗體差異。研究證實，血型是受到獨立的遺傳基因控制，經若干相互關聯的抗原抗體組成的體系[1]。ABO血型的鑒定主要是利用紅細胞上是否存在A、B抗原進行檢測，并對血漿中是否存在抗A、抗B抗體進行檢測。人體血液中除常見的ABO血型外還存在Rh等特殊血型，臨床鑒定過程中應引起注意[2]。本次研究主要對手工微柱凝膠免疫檢驗法在ABO、RhD血型抗原鑒定中的應用效果進行評價，并對鑒定結果進行了統計分析。現報告如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料選擇2015年1月～2016年12月在我院健康體檢者1 059例作為研究對象，分別采取手工微柱凝膠免疫檢驗法和常規試管法進行ABO、RhD血型抗原鑒定。男587例，女472例，年齡12～67歲，平均（32.2±4.5）歲。所有受檢者均未服用會對檢測結果產生影響的藥物，無明顯影響檢測結果的疾病，不在哺乳期、妊娠期，所有受試者均自愿接受本次檢測，并簽署知情同意書。

1.2 研究方法

1.2.1 常規試管法檢測在一支預先標記好的試管中加入1滴抗D試劑，而后加入1滴濃度為2%～5%的被檢紅細胞懸液，混勻后進行離心處理，離心條件為1 000 r/min，離心時間為1 min。經肉眼對結果進行觀察，試管完全凝集后，液體清亮，底部觀察到紅細胞凝塊，管底細胞呈現出明顯的花邊狀，輕彈試管后，凝塊不散，完全不凝的液面清亮，血紅細胞在試管底部均勻沉積，邊緣比較整齊，手指輕彈試管，紅細胞立即上升，變成均勻懸液。對輕微凝集的試管，必須將液體轉到載玻片上，進行鏡檢，最終做出結果判定。若是凝集結果顯示出被檢紅細胞上存在D抗原則RhD陽性，沒有發生凝集的呈現為RhD陰性。ABO血型鑒定以IgM類特異性血型抗體與紅細胞膜上特異性抗原結合會出現凝集反應的原理為依據進行判斷。

1.2.2 手工微柱凝膠免疫檢驗法將采集好的血液標本，進行常規的質量檢測后，采集血液量為5 ml，分成3份，對標本展開血清、紅細胞分離，制備0.8%～1%的紅細胞懸液，取50 μl加入抗A、抗B、抗O微柱凝膠檢測試管中，經2級離心法離心處理2 min后，加速離心3 min。紅細胞發生凝集，在離心后留在微柱表面的結果為陽性，紅細胞下沉在微柱底部的結果為陰性。

1.3 統計學方法使用SPSS19.0統計軟件進行數據分析，計量資料以均數±標準差（±s）表示，采用t檢驗，計數資料采用卡方檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

經統計發現，手工微柱凝膠免疫檢驗法與常規試管法的血型檢驗方法對體檢者ABO、RhD血型抗原檢驗結果的符合率為100%，兩種方法比較，檢驗結果無明顯差異（P＞0.05）。見表1。

表1 兩組檢測結果統計[例（%）]

3 討論

血型檢驗在臨床工作中具有十分重要的臨床意義，只有在保證血型配型后，才能夠確保輸入的血液不會發生凝集的情況。血型檢驗對于產前檢查也具有十分重要的意義，雙方ABO血型不合或者是Rh血型不合，均會造成新生兒、胎兒溶血的發生，進而造成死胎、死產、新生兒死亡的諸多不良妊娠結局[3]。因此，臨床上所有疾病的搶救輸血前，均必須開展血型檢查[4]。ABO血型屬于輸血、器官移植過程中所應用到的一種非常重要的血型系統，確保受血者與供血者之間的ABO血型正確，是有效保證臨床輸血安全的一個非常重要的前提，也是基本原則。如果受血者或供血者二者中一方的ABO血型發生誤定，失誤的輸注了異型血，發生嚴重溶血性輸血反應的可能性就會大大增加，會對該患者的生命安全構成嚴重威脅。在發現ABO的正反定型存在不符的情況下，如何能夠迅速準確地找到原因，并及時正確的對血型進行鑒定的臨床意義重大，應引起人們的重視。

試管法血型鑒定操作簡單，對儀器要求不高，廣泛應用于血型的初次鑒定。在試驗操作時，需清洗干凈試管，以避免發生假凝集現象。通常多先加血清后加紅細胞懸液，以方便核實是否漏加血清。試驗對離心時間及離心速度要求較高，觀察結果時需在光線充足的背景下觀察凝集程度，觀察后立即記錄觀察結果。但臨床檢測中，常出現試劑不標準、失效甚至污染等情況。操作者因粗心加錯樣本或試劑，離心速度及離心時間不恰當，細胞及血清比例不合適，結果判斷失誤等人為因素而導致出現鑒定錯誤。加之某些引起血型抗原減弱的疾病，如白血病等，可導致患者血型抗原含量少不易被檢測出。部分受檢者抗體效價較低，也不易檢測出[5]。

近年來，研究顯示手工微柱凝膠免疫檢驗法在血型檢驗中發揮了重要的作用[6]。手工微柱凝膠免疫檢驗法的工作原理：將凝膠作為微柱凝膠卡的填充物，將離心技術、凝膠分子篩過濾技術、血型血清學的抗原抗體反應特異性等技術相結合，在出現抗原抗體反應后，紅細胞會發生凝集；在經離心處理后，無法通過凝膠間隙，進而在凝膠上層和分散的凝膠中滯留，此時可認定結果為陽性，反之結果為陰性[7]。針對成年個體而言，紅細胞上A抗原、B抗原與血漿中抗A、抗B抗體存在對應關系。其特異性表現在紅細胞上缺乏A抗原、B抗原，血漿中存在與所缺乏抗原對應的強反應性抗體，如紅細胞上缺乏A抗原，能夠對血漿中存在抗A抗體進行預測。

本研究對手工微柱凝膠免疫檢驗法在ABO、RhD血型抗原鑒定中的應用效果進行了評價分析，選擇1 059名健康體檢者分別采取手工微柱凝膠免疫檢驗法和常規試管法進行ABO、RhD血型抗原鑒定。結果發現，采用手工微柱凝膠免疫檢驗法與采用常規試管法對ABO、RhD血型抗原檢驗結果的符合率為100%，兩種方法比較，檢驗結果無明顯差異（P＞0.05）。由此證實，在血型檢驗過程中，手工微柱凝膠免疫檢驗法與試管法的檢驗結果無明顯差異，并且手工微柱凝膠免疫檢驗法相對于試管法具有操作方便、結果判斷更清晰、靈敏度更高等優勢，具有較高的臨床應用價值。

[1]李健,劉喜龍,譚為,等.手工微柱凝膠免疫檢驗法在ABO、RhD血型抗原鑒定中的應用[J].當代醫學,2016,22(10):27-28

[2]張茜,陳黎輝.全自動微柱凝膠技術在ABO、RhD血型鑒定中的應用分析[J].實用醫藥雜志,2016,33(9):810-811

[3]梁曉林,王桂君,王仲泉,等.老年人ABO血型正反定不一致37例分析[J].實用老年醫學,2012,26(4):346

[4]吳濤,張長虹,周俊,等.1012名新生兒ABO及Rh血型鑒定結果分析[J].中國輸血雜志,2010,23(7):500-501

[5]劉婷.試管法與戴安娜卡檢測法在血型鑒定中的應用比較[J].中國醫藥導刊,2012,14(7):1232-1233

[6]武峰,劉亞玲.微柱凝膠技術在血型免疫學相關檢測中的應用進展[J].臨床血液學雜志,2008,21(1):101-104

[7]王生忠,王佑清,周本霞,等.微柱凝膠免疫檢測技術在新生兒溶血病檢測中的應用[J].國際檢驗醫學雜志,2014,35(10):1366,1373

The Identification Effect of Manual Microcolumn Gel Immunoassay in ABO,RhD Blood Antigen

ZHONG Sheng-ying
(The People's Hospital of Xingning City,Guangdong,Xingning514500)

Objective:To evaluate the identification effect of manual microcolumn gel immunoassay in ABO,RhD blood antigen. Methods:1 059 Cases of healthy population in our hospital were selected from January 2015 to December 2016 as the research object, were respectively take test manual microcolumn gel immunoassay and routine tube method in the identification of ABO,RhD blood antigen,the result of two methods were statistically analyzed.Results:The coincidence rate of blood identification method of the two methods were 100%for the ABO and RhD blood antigen,and there was of no significant difference between the two methods(P＞0.05). Conclusion:In the blood identification,there were of no significant difference between the manual microcolumn gel immunoassay method and the routine tube method,and the manual microcolumn gel immunoassay method has the advantages of convenient operation,the result is more clear and more sensitive,has significant clinical value,worthy of attention and promotion.

Blood type；Antigen identification;Manual microcolumn gel immunoassay method;Tube method

R466.11

B

10.13638/j.issn.1671-4040.2017.05.002

2017-03-15）