袁春秀,王寧菊,吳 婧
VEGF抑制劑阿西替尼對人胃癌細胞周期及凋亡的影響
袁春秀,王寧菊,吳 婧
目的 研究VEGF抑制劑阿西替尼( Axitinib)對人胃癌細胞AGS細胞周期和凋亡的影響。方法 采用流式細胞儀檢測0 μmol/L、0.1 μmol/L、1 μmol/L、5 μmol/L的阿西替尼作用AGS細胞24 h后對細胞周期的影響;采用同樣方法檢測該藥對AGS細胞凋亡的影響。結果 阿西替尼將AGS細胞抑制在G2/M期,并呈濃度依賴性,差異有統計學意義(P<0.05)。阿西替尼引起AGS細胞的凋亡,隨著給藥濃度增加,AGS細胞凋亡率也隨之增加,差異有統計學意義(P<0.05)。結論 阿西替尼通過把胃癌AGS細胞阻滯在G2/M期而抑制細胞的增殖,并促進胃癌AGS細胞凋亡。
胃癌AGS細胞系;Axitinib;細胞周期;細胞凋亡
胃癌是全球消化道常見腫瘤之一,目前已成為世界上發病率和死亡率較高的惡性腫瘤。至今其病因及發病機制尚未完全闡明,從腫瘤細胞學角度,本質在于細胞增殖與凋亡的調節失控[1]。近年來腫瘤靶向藥物的研究取得了很大進展。阿西替尼( Axitinib) 是一種以酪氨酸激酶為靶向、抑制血管生成的新抗腫瘤藥,主要作用靶點是血管內皮生長因子受體VEGFR-2[2]。目前已用于晚期腎細胞癌、非小細胞肺癌治療中[3-5],但Axitinib在胃癌治療方面的作用仍不清楚。本研究以體外培養人胃癌AGS細胞為研究對象,觀察Axitinib對胃癌細胞周期及凋亡的影響。
1.1 材料:人胃癌AGS細胞系購自美ATCC公司,DMEM細胞培養基購于美國Corning Cellgro,細胞凋亡試劑盒購于美國BD Biosciences公司。阿西替尼購自美國 Glaxo Smith Kline公司,胎牛血清(FBS)、PBS、RNase A、細胞周期測試PI均購于美國Sigma公司。
1.2 方法
1.2.1 胃癌細胞的復蘇與培養:DMEM培養液中加入10%FBS和1%青霉素-鏈霉素溶液備用。從-80 ℃冰箱中取出AGS胃癌細胞,放入 37℃水浴鍋中復蘇, 1 000 min離心5 min,棄上清液,用10% FBS的DMEM 培養液重懸細胞種于培養瓶中;再置于37 ℃、5% CO2、95%濕度的培養箱中培養,第2天觀察細胞生長情況?!?br>