不同基質對低溫保鮮人參的影響

賈璐璐+李瓊+王慧斌+許永華

[摘要] 該文以鮮人參為試驗材料，利用采收地土壤、蛭石、珍珠巖和蛭石與珍珠巖1∶1處理， 以室外生長人參為對照，在4 ℃保鮮處理6個月，測定人參體內SOD，POD酶活、人參皂苷及蛋白含量，考察不同貯藏介質對人參保鮮貯藏的影響。研究結果表明：采用珍珠巖保鮮處理，貯藏6個月后人參的外觀品相完好，且具有成活能力，SOD，POD活性較低，皂苷及蛋白得以有效貯存。利用珍珠巖在4 ℃保存，人參所受逆境侵害較小，是適宜鮮參貯藏運輸的條件。

[關鍵詞] 人參；保鮮；貯藏；珍珠巖

[Abstract] The SOD and POD enzyme activities were detected， ginseng saponin content and protein concentration at 4 ℃ preservation on fresh ginseng by different substrates were determined. The results showed that the appearance of the ginseng and the survival ability were good after six months by perlite preservation. It has lower SOD， POD enzyme activity and higher saponins and protein contention. It is the best fresh storing conditions for ginseng by using perlite at 4 ℃ preservation.

[Key words] ginseng；freshness；storage；pearlite

人參Panax ginseng C.A.Mey.是五加科人參屬重要藥用植物。具有大補元氣、補脾益肺、安神益智、生津等功效[1]。人民生活水平的不斷提高以及對綠色食品的向往，對產品的內在質量要求也就愈來愈高，隨著我國與國際接軌的形勢要求，越來越要求色、形、味和成分含量俱佳的保鮮人參[2]，該文研究了不同基質處理對貯藏鮮人參SOD，POD，人參皂苷，蛋白含量的變化規律，為延長鮮參的貨架期提供基礎研究，為日益增大的鮮人參市場提供技術支撐。

1 材料

蛭石、珍珠巖、色譜乙腈、色譜甲醇、無水乙醇、磷酸鹽緩沖液（pH 7.4）、雙蒸水、試劑盒。

人參來自于吉林農業大學藥用植物園種植的六年生人參，經吉林農業大學張連學教授鑒定為五加科人參屬人參P. ginseng，為“大馬牙”農家類型。于2015年10月25日采挖后置于潮濕土壤中保存備用。

儀器有島津色譜工作站LC solution、紫外-可見光分光光度計、酶標儀、組織研磨儀、分析天平、低溫離心機、人工培養箱、恒溫鼓風干燥箱、漩渦混勻器、水浴鍋。

2 方法

2015年11月2日，將人參從種植地取出，在土壤，珍珠巖-蛭石1∶1，珍珠巖，蛭石4種不同基質中，4 ℃下進行保鮮貯藏。至2016年5月3日截止，以2016年5月3日在吉林農業大學藥用植物園采收的人參為對照組，于2016年5月4日，測定人參的地下部分及萌發莖葉中SOD，POD酶和人參皂苷、蛋白含量。

粗酶液的制備：取人參試驗部分1.00 g經低溫冷凍研磨后加0.1 mol·L^-1磷酸鹽緩沖液稀釋（pH 7.4）到10%。充分混勻提取20 min，4 ℃條件下3 800 r·min^-1，離心15 min，取上清液為粗酶液。

2.1 SOD（超氧化物歧化酶）活性的測定 SOD（超氧化物歧化酶）試劑盒應用WST-1法：取粗酶液10 μL加入990 μL的磷酸鹽緩沖液，稀釋完成后充分混勻，測定孔和測定空白孔分別加入20 μL的待測樣本，對照孔和對照空白孔分別加入20 μL雙蒸水，對照孔和測定孔分別加入20 μL的酶工作液，對照孔和對照空白孔分別加入20 μL酶稀釋液，測定孔、測定空白孔、對照孔、對照空白孔分別加入200 μL底物應用液。混勻，37 ℃孵育20 min，波長450 nm，酶標儀測定其吸光度。

2.2 POD（過氧化物酶）活性的測定 POD（過氧化物酶）試劑盒采用愈創木酚法：對照管分別加入緩沖液2.4 mL、促進劑0.3 mL、測定管加底物0.2 mL、對照管加雙蒸水0.2 mL，對照管和測定管分別加入粗酶液0.1 mL。測定管和對照管均在37 ℃水浴準確反應30 min。然后測定管和對照管分別加入顯色劑1.0 mL。充分混勻后，3 500 r·min^-1離心10 min，取上清液在420 nm下，1 cm光徑，雙蒸水調零，測定各管吸光度，并進行比較分析。

2.3 皂苷檢測 人參根樣品乙醚抽脂，利用索氏提取法80 ℃甲醇提取12 h，每秒1～2滴，旋轉蒸發儀減壓回收甲醇，色譜甲醇定容至8 mL，以Rg₁，Re，Rf，Rb₁，Rg₂，Rc，Rb₂，Rb₃，Rd為對照品，HPLC分析，進樣量10 μL。Diamonsil C₁₈色譜柱（4.6 mm×150 mm，5 μm）；柱溫 50 ℃；檢測波長 203 nm，流速1 mL·min^-1，流動相：乙睛-水梯度洗脫，0～3 min，28%乙腈；3～5 min，28%～30%乙腈；5～9 min，30%～35%乙腈；9～22 min，35%～37%乙腈；22～23 min，37%～28%乙腈；23～30 min，28%乙腈。

2.4 蛋白質含量檢測 蛋白質濃度試劑盒應用考馬斯亮藍法：空白管加雙蒸水0.05 mL，標準管加入0.05 mL蛋白對照品，測定管加入0.05 mL粗酶液，空白管、標準管、測定管分別加入考馬斯亮藍顯色液3.0 mL，充分混勻，靜置10 min，波長595 nm，光徑1 cm，雙蒸水調零，測定各管吸光度。

3 結果與分析

從2015年11月開始，通過在土壤，珍珠巖和蛭石混合物，珍珠巖，蛭石4種不同基質4 ℃條件下貯藏，2016年5月進行觀察測定。所有試驗人參的外觀完好無損，芽孢和幼苗生長良好。

3.1 SOD，POD活性變化 通過測定SOD，POD 酶的變化，考察不同保鮮處理對于SOD，POD酶活性的影響，結果見表1。

結果表明：采用土壤保鮮處理的人參根部SOD活性顯著大于其他處理，且處理組SOD酶活性均大于室外生長人參，其SOD酶活性大小為：土壤>蛭石珍珠巖>蛭石>珍珠巖>對照組；土壤中貯藏的人參根的POD活性最高，正常室外生長的人參根的POD活性最低。珍珠巖>對照組>蛭石>土壤>蛭石珍珠巖。萌發的莖葉測定結果顯示，正常室外條件下幼苗的SOD活性最高，蛭石條件下幼苗的SOD活性最低。其SOD酶活性大小為：對照組>土壤>珍珠巖>蛭石珍珠巖>蛭石。

SOD，POD為植物保護酶類，當植物受到逆境侵害時，保護酶活性會顯著升高。對于人參主根來說，任何保鮮過程都是對主根造成一種逆境傷害。珍珠巖保鮮能夠降低人參在保鮮過程中所受逆境程度，降低保鮮過程中活性氧的產生，而對于人參莖葉，任何保鮮處理均能降低人參莖葉生長發育；同時能夠降低人參生長活性，故在人參保鮮過程中應適當采用珍珠巖作為保鮮材料。

3.2 皂苷含量 通過測定人參皂苷的變化，考察不同保鮮處理對于皂苷成分含量的影響，色譜條件顯示分離效果滿足測定要求，按照保留時間（min）依次為Rg₁（5.697），Re（5.946），Rf（13.497），Rb₁（14.671），Rg₂（16.325），Rc（16.715），Rb₂（18.085），Rb₃（18.554），Rd（23.955），色譜圖見圖1，標準曲線見表2。

均符合藥典規定，珍珠巖保鮮處理皂苷含量最高，土壤保鮮皂苷含量最低，其皂苷含量大小為，珍珠巖>對照組>蛭石珍珠巖>蛭石>土壤，分析認為，珍珠巖保鮮可以有效抑制人參有效物質分解，室外人參可以有效生長，吸收成分，轉化營養，含量次之，土壤保鮮人參消耗自身成分，故含量最低，所以利用珍珠巖保鮮極具價值，這與酶活測定結果一致。

3.3 蛋白質濃度 通過測定蛋白質濃度的變化，考察儲藏條件對于蛋白代謝的影響，分測3次取平均值，結果見表4。

結果顯示，室外生長的人參根的蛋白濃度最高，土壤中人參根的蛋白濃度最低，對照組>蛭石>珍珠巖>蛭石珍珠巖>土壤。可能由于室外吸收養分轉化自身成分致使含量增加，蛭石能夠抑制在儲存過程中蛋白質的分解，與上述珍珠巖最佳的結論有所差異，但這可能與逆境情況下人參體內能源物質氧化功能有關，其機制還需進一步研究。對于幾種保鮮方式來說，雖然蛭石略高于珍珠巖，但二者含量差異不大，故從蛋白含量考慮，采用珍珠巖仍然有效。

4 結論與討論

人參因其良好的藥食兩用價值而聞名于世，是我國名貴中藥材。人參在工業應用較為廣泛，以人參為主要原料的有藥制品、日用品、化妝品、食用保健品等。但是由于新鮮人參容易腐爛，所以大大地增加了人參制品的應用成本以及增加了人參應用的困難。因此，本研究采用不同的基質低溫保鮮技術對人參進行處理，抑制人參腐敗微生物和生理活性，增加人參的應用范圍，開發出低溫有效的保鮮方法，保證人參的品質，為新鮮人參應用提供一定的理論基礎。

在4種基質貯藏條件下，人參的外觀品相完好，生長良好，11月初采收到第2年5月，SOD，POD活性中根部變化都以帶土保鮮人參中最高，2016年5月在吉林農業大學藥用植物園采收測人參的活性最低，說明土壤保鮮逆境影響最大，珍珠巖最低，逆境影響最小。以珍珠巖為基質保鮮的人參中皂苷、蛋白含量較高，參體外觀品相完好，生長良好，且珍珠巖經濟易得，所以本研究對延長人參的貨架期提供了良好的參數。為鮮人參進一步應用提供了研究基礎。故以珍珠巖在4 ℃保藏，可以作為鮮參貯藏的首選條件。

人參保鮮貯藏方法的一直是人參研究的熱點之一。劉強等對人參貯藏工藝的研究表明，保溫層保溫厚度0.75 cm，密閉層為3層，降溫變化速度為每小時0.2 ℃、貯藏冷凍時間為40 d。升溫變化速度為每小時0.2 ℃升至4 ℃進行低溫儲藏的鮮人參，漿氣飽滿、色黃白、栽培成活率95%[3]。趙英等應用蜂膠生物保鮮劑對鮮人參進行保鮮貯藏，鮮人參的貯存可達1年以上，人參的氣味、色澤、包裝情況均無明顯變化；人參皂苷和氨基酸總量與鮮人參的含量差異不明顯。細菌分析符合國家衛生法規定標準[4]。本研究只是在同一時間進行了SOD，POD酶活，皂苷與蛋白含量的檢測，后期還要進行不同時間、溫度、濕度、人參與介質配比以及抑菌的相關研究，以進一步優化貯藏條件。但目前真正意義上讓人參保持生理活性，并且持續生長發育長達7個月之久的方法并未見報道。

[參考文獻]

[1] 中國藥典.一部[S].2015： 8.

[2] 周錫龍，陸麗.鮮藥的歷史沿革、現狀與對策[J].基層中藥雜志，2001（6）：58.

[3] 劉強， 丁麗潔， 張達正，等. 鮮人參儲藏工藝研究[J].人參研究，2013， 25（1）：25.

[4] 趙英，蔡榮春，范廣志，等.鮮人參生物保鮮技術研究[J].農業與技術，1995（2）：36.

[責任編輯 呂冬梅]