白靈菇多糖對力竭運動大鼠抗疲勞和抗氧化作用研究

邱娟

（陜西理工大學體育學院，陜西漢中723000）

白靈菇多糖對力竭運動大鼠抗疲勞和抗氧化作用研究

邱娟

（陜西理工大學體育學院，陜西漢中723000）

經測定對照組大鼠、運動疲勞大鼠與力竭運動休息12 h后大鼠肝組織和線粒體相關指標，研究白靈菇多糖對機體運動能力及抗疲勞和提高機體運動后恢復能力的影響。取100只Wistar雄性大鼠，將其分為5組：對照組（A）、力竭組（B）、力竭休息組（C）、白靈菇多糖力竭組（D）、白靈菇多糖力竭休息組（E）。根據試驗要求，使5組大鼠做30 d跑臺運動，D、E每天按一定劑量服用白靈菇多糖，末次運動后，將A組于安靜情況下處死，檢測相關指標；使另外4組做劇烈運動后力竭，將B、D組處死測相關指標；使C、E組大鼠休息12 h后，處死測指標。結果表明：大鼠經灌胃白靈菇多糖后，GSH-Px（谷胱甘肽過氧化物酶）活力、SOD活力和-SH含量顯著上升，MDA（丙二醛）含量明顯下降。說明白靈菇多糖能夠增強機體抗氧化能力。休息12 h后，NOS（一氧化氮合酶）能力、NO（一氧化氮）含量指標同運動前指標一致，由此可知服用白靈菇多糖能夠增強機體的恢復能力，抗疲勞能力增強。灌胃白靈菇多糖可加強大鼠的抗疲勞能力和抗氧化功能，增強大鼠運動能力，提高運動疲勞后恢復能力。

白靈菇多糖；抗疲勞；抗氧化

白靈菇（Pleurotus nebrodensis）又名阿魏蘑、阿魏側耳、阿魏菇，其口感細嫩，味道可口，營養價值高，被稱為“草原上的牛肝菌”，廣受人們歡迎。白靈菇在真菌界具有盛名，因其含有重要的活性因子，有藥理功能[1-3]。研究表明，白靈菇多糖是從白靈菇中浸提的含有極高價值的活性成分，生理活性強，具有降血糖、降血壓、調節血脂等功效[4-5]。白靈菇還具有藥用價值，有研究表明其具有消炎、止咳、預防腫瘤等功效。運動學專家指出，大量的力竭訓練不僅對身體沒有積極作用，還會產生大量的自由基影響機體，會導致機體某些功能產生障礙，線粒體能力減弱，呼吸急促，導致機體產生疲勞速度加快，若不清理自由基，會使運動能力下降，影響機體正常活動[6-8]。本文旨在測定正常大鼠、運動疲勞后大鼠以及力竭休息后大鼠肝組織和線粒體，研究白靈菇多糖對大鼠抗疲勞，增強機體運動能力和提高機體運動后恢復能力的影響，對白靈菇運動保健產品開發有一定參考價值。

1 材料與方法

1.1 動物、材料與試劑

健康Wistar雄性大鼠100只，質量為140 g～160 g，購自吉林大學動物中心，動物合格證號：SCXK-（吉）2016-0003，自由飲水、攝食，自然光照適應性喂養。

白靈菇：蘭考金菇園食品有限公司；超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）、巰基-SH、丙二醛（MDA）、一氧化氮合酶（NOS）、一氧化氮（NO）、鈣鎂離子三磷酸腺苷酶（Ca2+/Mg2+-ATPase）、鈉鉀離子三磷酸腺苷酶（Na+/K+-ATPase）試劑盒：南通戴爾諾斯生物科技有限公司。

1.2 儀器與設備

RE型蒸發器：上海鷹迪儀器設備有限公司；UV7502PCS型分光光度計：上海科曉科學儀器有限公司；TD型離心機：常州市偉嘉儀器制造有限公司；GM-33A型真空抽濾泵：天津市美飛科技有限公司；HH-4型恒溫水浴鍋：常州市萬合儀器制造有限公司。

1.3 方法

1.3.1 白靈菇多糖的制備

按規定量稱取白靈菇子實體，進行清洗，于40℃烘干，粉碎至160目，利用濃度為95%的乙醇對其脫脂，加入純凈水，100℃下浸提2 h，過濾，濃縮。然后加入乙醇置于4℃的冰箱使多糖沉淀，離心30 min，采用Sevage法除蛋白質，進行濃縮并凍干，待用[9-11]。

1.3.2 動物分組

取Wistar雄性大鼠，將其隨機分成5組，每組20只：模型組（A）、力竭組（B）、力竭休息組（C）、白靈菇多糖力竭組（D）、白靈菇多糖力竭休息組（E）。白靈菇多糖組每天服用多糖水溶液80 mg/d，A、B、C組分別灌胃生理鹽水，連續灌胃30 d，末次灌胃30 min后檢測。

1.3.3 運動模型的建立

隨機抽取大鼠，使其做30 d跑臺訓練，根據Bedford模型進行運動訓練（見表1），首先，應先進行準備活動，速度為15 m/min。按照規定對大鼠灌胃生理鹽水和白靈菇多糖80 mg/kg·體重。30 d后，將A組于安靜時處死，做為對照組；B、D組大鼠運動至力竭并處死，作為對照；C、E組力竭并恢復12 h后處死[12-14]。

表1 大鼠運動方案Table 1 Rats exercise program

1.3.4 樣品的制取

大鼠進行處死前必須禁止飲食，時間為8 h，被處理后，大鼠應及時檢測，取適量肝組織于燒杯中，進行破碎，得到肝勻漿，并于溫度4℃、轉速2 000 r/min的條件下離心20 min，除去沉淀部分，再次對上清液進行處理，離心速度3 000 r/min，時間20 min，得到沉淀為肝組織，應用超聲波儀器進行破碎處理，待用[15-16]。

1.3.5 指標的測定

力竭時間的測定應從運動開始計算時間，直至力竭所用的全部時間。判斷是否力竭應觀察大鼠運動時，速度降低，臀部在籠體后壁，后肢體隨皮帶自然轉動達30 s，利用電刺激方法沒有效果，可判斷為力竭。GSH-Px、NOS、-SH、MDA、NO、SOD、Ca2+/Mg2+-ATPase、Na+/K+-ATPase的測定均參照說明書進行。

1.4 統計學分析

結果以“平均數±標準差”表示，通過SPSS16.0軟件進行統計學分析，其中P≤0.05代表有顯著性差異，P≤0.01為具有極顯著差異。

2 結果與分析

2.1 白靈菇多糖對大鼠抗氧化能力的影響

白靈菇多糖對大鼠抗氧化能力的影響結果見表2。

表2 各組大鼠肝組織抗氧化能力的比較（，n＝20）Table 2 Antioxidant capacity of hepatic tissue in the rats from each group（，n=20）

表2 各組大鼠肝組織抗氧化能力的比較（，n＝20）Table 2 Antioxidant capacity of hepatic tissue in the rats from each group（，n=20）

注：a.同A 組相比，差異顯著（P＜0.05）；b.同 B組相比，差異顯著（P＜0.05）；c.同 C 組相比，差異顯著（P＜0.05）；d.同 D 組相比，差異顯著（P＜0.05）。

組別 -SH含量/（μmol/g）SOD活力/（U/mL）A 92.45±7.43 1.64±0.13 116.14±10.98 365.09±12.09 B 64.75±7.42a 6.08±0.25a 80.23±9.76a 224.76±15.09aC 72.34±5.32a 5.54±0.26a 86.53±9.09a 242.54±17.25aD 81.87±7.64b 4.63±0.22b 109.34±9.32b 286.74±18.17bE 88.01±7.41bc 3.17±0.14bcd 144.76±9.45bc315.35±19.23bcMDA含量/（nmol/mL）GSH-Px活力/（U/mL）

SOD和GSH-Px是非常重要的抗氧化酶類，具有清除機體內自由基的作用。-SH作為體內重要物質，能夠維持機體活力，并能夠有效地防止自由基對機體的破壞。MDA含量的大小能夠表示出機體內物質被氧化程度。根據表2可知，大鼠運動力竭后，B組肝組織中GSH-Px活力、SOD活力和-SH含量顯著比A組低（P＜0.05），MDA含量顯著比A組高（P＜0.05）。C組肝組織中GSH-Px活力、SOD活力和-SH含量同樣也比A組低（P＜0.05），MDA 含量比 A 組高（P＜0.05）。根據 D組試驗結果，同B比較，各項指標有明顯恢復，但比對照組略差，E組抗氧化指標要比B、C組有顯著提高，與對照組相當。故由結果可知，白靈菇多糖能夠增強肝組織抗氧化能力，并能加快運動疲勞后的恢復。

2.2 白靈菇多糖對大鼠NO-NOS、ATPase活性的影響

白靈菇多糖對大鼠NO-NOS、ATPase活性的影響結果見表3。

表3 各組大鼠肝組織NO-NOS和肝線粒體ATPase活性的比較（，n＝20）Table 3 NO-NOS in hepatic tissue and ATPase activity in hepaticmitochondria of rats（，n=20）

表3 各組大鼠肝組織NO-NOS和肝線粒體ATPase活性的比較（，n＝20）Table 3 NO-NOS in hepatic tissue and ATPase activity in hepaticmitochondria of rats（，n=20）

注：a.同A組相比，差異顯著（P＜0.05）；b.同 B 組相比，差異顯著（P＜0.05）；c.同 C 組相比，差異顯著（P＜0.05）；d.同 D 組相比，差異顯著（P＜0.05）。

組別 Na+/K+-ATPase活力/（U/mg）NOS活力/（U/mg）A 88.46±6.76 73.54±5.47 0.95±0.02 1.57±0.24 B 61.92±7.87a 62.32±6.35a 0.36±0.04a 0.87±0.23aC 69.58±6.44a 70.64±6.31a 0.37±0.02a 1.43±0.09aD 75.56±6.44ab 79.57±6.54ab 0.76±0.05a 1.65±0.34aE 87.56±5.34bcd 87.56±4.46bcd 0.95±0.04bcd1.98±0.15bcdCa2+/Mg2+-ATPase活力/（U/mg）NO含量/（μmol/g）

NO能夠加強機體內血管的舒張能力，改善機體組織代謝，可加強體內物質的輸送能力。由表3可得出，大鼠力竭后，肝組織NOS活力及NO含量、肝線粒體活力顯著下降；休息12 h，肝組織中NOS活力及NO含量、肝線粒體活力加強，但仍不能恢復原始狀態。服用白靈菇多糖大鼠力竭后，肝組織中NOS活力及NO含量、線粒體Na+/K+-ATPase、Ca2+/Mg2+-ATPase活力與A 比較要低（P＜0.05），比 B 組高（P＜0.05）；休息 12 h后，肝組織中NOS活力、NO含量和線粒體指標達到A組水平，和B組相比顯著升高（P＜0.01），和C、D組相比顯著升高（P＜0.05）。因此，白靈菇多糖可提高機體運動能力，同時能夠加強對機體運動后的恢復能力。

2.3 白靈菇多糖對耐力訓練大鼠跑臺運動力竭時間的影響

白靈菇多糖對耐力訓練大鼠跑臺運動力竭時間的影響結果見表4。

表4 大鼠力竭時間比較（，n＝20）Table 4 Rats exhaustive time（，n=20）

表4 大鼠力竭時間比較（，n＝20）Table 4 Rats exhaustive time（，n=20）

注：#.D組與B組比較，差異顯著（P＜0.05）。

組別 力竭時間/min 力竭時間延長度/%B 76.54±12.54 D 96.69±11.04# 24.00

根據表4可知，白靈菇多糖力竭組D組服用白靈菇多糖大鼠運動后力竭時間顯著比力竭組B組高，力竭時間延長24%，差異顯著（P＜0.05）。由實驗結果，大鼠灌胃白靈菇多糖后力竭時間顯著延長，因此得出白靈菇多糖能夠增強機體運動能力，延遲運動疲勞，能夠延長運動時間。

3 結論

根據上述試驗結果可得，大鼠灌胃白靈菇多糖后，GSH-Px活力、SOD活力和-SH含量有顯著提高，MDA含量顯著下降，因此，白靈菇多糖可增強機體抗氧化能力。肝組織線粒體Na+/K+-ATPase、Ca2+/Mg2+-ATPase活力顯著增強；恢復12 h后，肝組織中NOS活力、NO含量恢復原指標，可知白靈菇多糖能夠加強機體的恢復能力。灌胃白靈菇多糖后大鼠力竭時間顯著延長，說明白靈菇多糖具有延緩疲勞，延長機體運動時間的功能。

[1]盛偉,方曉陽,吳萍.白靈菇、杏鮑菇、阿魏菇多糖體外抗氧化活性研究[J].食品工業科技,2008(5)：103-105,109

[2]馬淑鳳,陳利梅,徐化能,等.白靈菇胞外多糖的分離純化及其抗氧化活性的研究[J].江蘇農業學報,2010(1)：157-162

[3]馬淑鳳,王利強,胡志超,等.酶法提取白靈菇深層發酵菌絲體多糖的研究[J].農業工程學報,2006(9)：198-201

[4]馬淑鳳,陳利梅,徐化能,等.白靈菇多糖的分離純化及清除自由基研究[J].食品科學,2009(19)：109-113

[5]孫靈慧,錢珍,劉曉宇.白靈菇和紅椎菌的成分分析研究[J].食品科技,2009(11)：101-104

[6]李正鵬,吳萍.白靈菇胞外多糖抗氧化活性研究[J].食品與發酵工業,2009(10)：85-88

[7]李靖,陳偉,程芳,等.靈芝-白靈菇酸奶配方的優化及其營養成分分析[J].食品與發酵工業,2012(6)：122-127

[8]胡順珍,許梅,賈樂.白靈菇產胞外多糖液體培養條件優化[J].食品工業科技,2007(7)：76-78,81

[9]梁艷麗,李榮春,張陶.白靈菇在貯藏過程中營養成分的動態變化[J].中國食用菌,2005(2)：54-56

[10]Venturella Giuseppe,Zervakis Georgios I,Polemis Elias,et al.Taxonomic Identity,Geographic Distribution,and Commercial Exploitation of the Culinary-Medicinal Mushroom Pleurotus nebrodensis(Basidiomycetes).[J].International journal of medicinal mushrooms,2016,18(1)：114-119

[11]Yuan Xianghe,Tian Guoting,Zhao Yongchang,et al.Degradation of dyes using crude extract and a thermostable and pH-stable laccase isolated from Pleurotus nebrodensis[J].Bioscience reports,2016,36(4)：453-458

[12]Changlu Wang,Haiyan Cui,Yurong Wang,et al.Bidirectional Immunomodulatory Activities of Polysaccharides Purified From Pleurotus nebrodensis[J].Inflammation,2014,37(1)：34-37

[13]Lv Hui,Kong Yang,Yao Qing,et al.Nebrodeolysin,a novel hemolytic protein from mushroom Pleurotus nebrodensis with apoptosis-inducing and anti-HIV-1 effects.[J].Phytomedicine,2008,16(2)：69-74

[14]崔建梅,蘇曉云,王昕,等.自愿轉輪運動對抑郁模型大鼠行為學、腦組織神經Y肽及中央杏仁核一氧化氮合酶表達的影響[J].體育科學,2014(5)：15-22

[15]羅先欽,徐曉玉,黃崇剛,等.決明子總蒽醌對酒精性脂肪肝大鼠肝組織脂質過氧化與PPAR-γ表達的影響[J].中國中藥雜志,2011(12)：1654-1659

[16]楊欽河,謝芳,王鳳珍,等.不同治法方藥對脂肪肝大鼠肝組織NF-κBp65及Kupffer細胞p38MAPK蛋白表達的影響[J].廣州中醫藥大學學報,2009(2)：141-147

Effects of Pleurotus nebrodensis Polysaccharides on Exhausting Exercise Rats Anti-fatigue and Antioxidant

QIU Juan
（The Institute of Physical Education of Shaanxi University of Science and Technology，Hanzhong 723000，Shaanxi，China）

To study the effects of Pleurotus nebrodensis polysaccharide on the exercise capacity and anti-fatigue of rats and the recovery of body movement after 12 hours of exhaustive exercise in rats.100 male Wistar rats were divided into five groups：control group （A），exhaustive group （B），exhaustive resting group（C），Pleurotus nebrodensis polysaccharide exhausted group （D），white Pleurotus nebrodensis polysaccharide exhaustion resting group （E）.According to the test requirements，5 groups of rats were subjected to 30 days of treadmill exercise.D and E were given Pleurotus nebrodensis polysaccharide every day.After the last exercise，the rats in group A were sacrificed and the related indexes were detected.The rats in group C and group E were sacrificed 12 hours after the operation，and the rats were sacrificed.The results showed that：GSH-Px activity，SOD activity and-SH content were significantly increased and the content of MDA decreased significantly after administration of Pleurotus nebrodensis polysaccharide.Indicating that Pleurotus nebrodensis polysaccharidecan enhance the body's antioxidant capacity.After 12 h of rest，NOS and NO content were consistent with the pre-exercise indexes,which indicated that the polysaccharides of Pleurotus nebrodensis could enhance the recovery ability of the body and enhance the anti-fatigue ability.Pleurotus nebrodensis polysaccharide can strengthen the anti-fatigue and anti-oxidant function of rats，enhance the athletic ability and improve the recovery ability after exercise fatigue.

Pleurotus nebrodensis polysaccharide；anti-fatigue；anti-oxidation

10.3969/j.issn.1005-6521.2017.17.040

2016-11-16

邱娟（1976—），女（漢），講師，研究生，研究方向：體育教育訓練。