生物藥物分析方法的質量控制

劉雪松

摘 要：目的：討論應用于藥代動力學和生物利用度研究的生物藥物分析方法的質量控制。方法：分析近年來國際學術會議資料，基于此基礎系統地介紹分析質量研究方法的主要指標：精密度、準確度、檢測限、定量限、標準曲線、方法選擇性和穩定性等。結果：生物藥物分析方法的質量控制是藥代動力學和生物利用度研究中必不可少的重要手段。結論：本文對生物藥物分析方法的質量控制可供評價和控制分析方法參考用。

關鍵詞：生物藥物；分析方法

1 生物藥物的分析

生物藥物的分析在實際生產中是十分必要的，通過藥物分析手段來測定原料和制劑中藥物及有關雜質的含量，控制藥物生產至臨床應用前藥物的質量，生物藥物分析是藥物體內研究和臨床應用期間測定生物材料中藥物的含量的主要依據。生物藥物分析的目的是保證用藥的安全有效，鑒于分析方法本身質量的重要性，近年對藥物分析方法質量控制的研究相當普及。

1.1生物藥物分析的應用范圍

生物藥物分析主要應用于：？治療藥物監測，血藥濃度測定數據是否準確將直接影響藥物療效和毒副作用；？藥代動力學和生物利用度研究已列入衛生部《新藥審批辦法》中，規定中有關于申報內容、數據的可靠性、獲得的參數等要求。如同藥物分析一樣，生物藥物分析方法的質量控制也是必要的。

1.2生物藥物分析的研究進展

國內外研究者應用于藥代動力學和生物利用度的分析方法的質量控制已經很成熟。其中有文獻對生物藥物分析方法給予了“評價”[1]，還有一些研究從法定角度出發應進行“認證”[2]。另外，國內學者測定藥代動力學參數和生物利用度的新藥非常規檢驗藥物，得到了普遍認可[3]。近年見諸國內雜志的生物藥物分析方法研究論文，雖然都進行了一些方法學評價，但缺乏系統研究，明顯滯后于生物藥物分析目前已在新藥體內研究中廣泛應用的現況。

2須考核的方法和內容

新藥申報資料應用的分析方法，都應當考核[4]，包括：①儀器分析法；②生物學方法：免疫分析法和微生物測定法。考核內容應包括：①書面詳細報告測定方法：包括樣品采集、處理和貯存，測定時樣品預處理方法、測定操作、儀器及其參數，數據處理與結果計算等；②提供方法建立時對方法質量全面考核結果與數據；③提供方法應用階段的質控數據。

3考核的指標

3.1精密度和準確度

同藥物分析一樣，精密度和準確度也是生物藥物分析方法考核的重要指標，但考核的內容和方法有其特殊性。分析方法建立時的考核[5]：①準確度和精密度測定可同時進行；②分析方法應用中的考核，測定樣品時，加入質控樣品作隨行分析，可照標準曲線各濃度配制法；③樣品測定次數與重復測定，一般只需作單樣分析，只有少數不穩定樣品或免疫分析方法才作雙樣分析，并應在方法考核中說明。

3.2檢測限和定量限

近年有藥物分析文獻詳細介紹檢測限和定量限的定義和測定方法，生物藥物分析也使用LOD和LOQ表示方法的靈敏度，但因生物樣品量少，不能以增加取樣量方式提高靈敏度，因此更強調LOQ，它反映了標準曲線低濃度端的可靠性，測定時記錄各濃度每次測定得到的藥物信號強度S與噪音強度N。

3.3標準曲線

所有生物藥物分析方法都必須作標準曲線。濃度與響應值的函數關系可作成坐標圖或用回歸方程表示。考核標準曲線可以使用以下方法：①每次測定樣品應同時作標準曲線，作法與考核時應完全一致；②標準濃度點5-8個，每個濃度測定1次或2次；③濃度上限為樣品最高濃度的120%，下限為最低濃度的80%；④線性度r=0.9900，截距與最高濃度響應值之比應略高。

3.4選擇性

選擇性又稱專屬性，目前很多文獻均列為考核指標，但考核的內容和方法尚未統一，下面為目前公認的應考核內容：生物基質的影響：可取3個以上不同個體的空白樣品，考察正常生理情況下樣品中生物基質的影響。藥物代謝物和配伍用藥物的影響：應針對可能存在的藥物代謝物和合并用藥，可將代謝物標準品和藥物標準品加入空白樣品以及加入供分析樣品后再測定，觀察是否有干擾。

3.5穩定性與萃取回收率

考核藥物標準品溶液的穩定性，即在貯存條件下可穩定的時間。包括：①在室溫中的穩定性；②冷凍條件下的穩定性；③此外還應考察加入穩定劑，考察樣品提取物的穩定性。萃取回收率指預處理能夠將生物樣品內含藥物多少比例分離出來供分析，它與分析方法的LOQ密切相關，可指導樣品預處理。

3.6免疫分析、藥物代謝分析與立體異構分析

免疫分析應著重考察結構相近化合物的交叉免疫干擾，并盡可能用色譜法核對結果。藥物代謝物的分析應根據文獻要求，對于測定代謝物或同時測定藥物和代謝物的分析方法，應按照前述相同要求考核。藥物立體異構體的分析，由于具立體異構的藥物，其左、右旋體在體內的處置和生理活性都可能存在差異，分析生物樣品中不同的藥物立體異構體。

4 討論

目前國內、外生物藥物分析方法取得了很大的進展，本文目的在于討論應用于藥代動力學和生物利用度研究的生物藥物分析方法的質量控制。采用分析近年來國際學術會議資料，基于此基礎系統地介紹分析質量研究方法的主要指標：精密度、準確度、檢測限、定量限、標準曲線、方法選擇性和穩定性等方法，結果表明生物藥物分析方法的質量控制是藥代動力學和生物利用度研究中必不可少的重要手段。希望本文可以為質量控制和分析方法提供參考。

參考文獻：

[1]劉曉志，趙偉，常亮，等.生物藥物分析方法驗證體系的研究[J].中國藥事， 2015（3）：273-276.

[2]張怡軒.生物藥物分析[M]. 中國醫藥科技出版社， 2015（6）：123-125.

[3]李美玲，徐銘凱.生物藥物的研究發展及其分析方法的質量控制[J].工程技術：引文版， 2016（9）：00298-00298.

[4]李淑賢.藥物分析中的共性問題及分析方法探究[M]. 中國紡織出版社， 2015（10）：256-258.

[5]劉國圣.微生物制藥及微生物藥物分析[J]. 南方農業， 2016， 10（3）：156-157.endprint