不同藥劑對松材線蟲及阿蘇里傘滑刃線蟲的室內(nèi)毒力測定

夏彥飛,周家菊,王瓊偉,張圓圓,李志坤

(河南科技大學(xué) 林學(xué)院,河南 洛陽 471023)

不同藥劑對松材線蟲及阿蘇里傘滑刃線蟲的室內(nèi)毒力測定

夏彥飛,周家菊,王瓊偉,張圓圓,李志坤

(河南科技大學(xué) 林學(xué)院,河南 洛陽 471023)

采用浸漬法在室內(nèi)測定了在不同質(zhì)量濃度和時間處理下4種化學(xué)藥劑對松材線蟲、阿蘇里傘滑刃線蟲的毒力。結(jié)果表明：阿維·蘇云菌對這兩種線蟲的毒力最強(qiáng),其最高濃度(50.00 g/L)處理松材線蟲和阿蘇里傘滑刃線蟲48 h后,線蟲的死亡率分別達(dá)85.67%、95.00%,半致死濃度(LC50)分別是20.80、12.88 g/L；克百威·敵和丁硫·毒死蜱對兩種線蟲也具有一定的毒力。

殺線蟲劑;植物寄生線蟲;毒力測定;死亡率;LC50值

線蟲又稱蠕蟲,屬動物界線蟲動物門,其中對農(nóng)林業(yè)生產(chǎn)造成巨大損失的線蟲被稱為植物寄生線蟲或植物線蟲。自1982年松材線蟲病在南京首次被報道后,其陸續(xù)蔓延到我國江蘇、浙江、安徽、福建等15個省(直轄市、自治區(qū))[1-2]。截至2006年,松材線蟲在浙江省為害的林業(yè)面積超過了23000 hm2,造成大約5000萬株樹木被砍伐,不僅給國民經(jīng)濟(jì)造成了巨大的損失,而且對自然景觀、生態(tài)環(huán)境以及我國松林資源庫構(gòu)成了嚴(yán)重的威脅[3]。植物寄生線蟲的防治方法有生物防治、化學(xué)防治、農(nóng)業(yè)防治、作物抗性等,但在現(xiàn)階段,對植物線蟲的防治仍然采用化學(xué)防治為主、其它方法為輔的策略。本研究選用目前洛陽市場上銷售的4種殺線蟲劑,在室內(nèi)離體條件下,利用藥劑浸漬法對松材線蟲、阿蘇里傘滑刃線蟲分別進(jìn)行了毒力測定,以期為林業(yè)植物線蟲病害的防治提供參考。

1 材料與方法

1.1 供試藥劑

阿維·蘇云菌可濕性粉劑(阿維菌素含量為0.1%;蘇云金桿菌含量為100億活芽孢/g)，由威海韓孚生化藥業(yè)有限公司生產(chǎn);阿維納米·線蟲丹顆粒劑(馬拉硫磷含量為3%;阿維菌素含量為2%)，由山東百士威農(nóng)藥有限公司生產(chǎn);克百威·敵顆粒劑(克百威含量為1.5%;敵百蟲含量為1.5%)，由汝州市試劑廠生產(chǎn);丁硫·毒死蜱顆粒劑(丁硫克百威含量為1%;毒死蜱含量為4%)，由紹興天諾農(nóng)化有限公司生產(chǎn)。上述4種藥劑均購于洛陽市關(guān)林農(nóng)藥市場。在本研究中，處理線蟲所用藥劑的質(zhì)量濃度如下:阿維·蘇云菌10.00、12.50、16.67、25.00、50.00 g/L;其余3種藥劑12.50、16.67、25.00、50.00、100.00 g/L。

1.2 線蟲的收集

供試線蟲為松材線蟲(Bursaphelenchusxylophilus)、阿蘇里傘滑刃線蟲(B.arthuri),均保存在本實(shí)驗室中。分別將松材線蟲、阿蘇里傘滑刃線蟲接種在長滿灰葡萄孢(Botrytiscinerea)菌絲體的馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基(PDA)上,在25 ℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)8～10 d,至菌絲體完全消失后,放入4 ℃冰箱待用。采用貝曼漏斗分離法收集這兩種線蟲,對收集的線蟲分別用3% H2O2進(jìn)行表面消毒5 min，然后用ddH2O清洗至少3次,此時線蟲為實(shí)驗所用線蟲。

1.3 不同藥劑對線蟲毒力的測定

采用Giannakou等的浸漬法[4](略加改進(jìn))測定藥劑對線蟲的毒力。具體步驟如下:吸取2 mL待測藥液,放入直徑6 cm的凹面皿中,然后在每皿中挑入50條經(jīng)表面消毒的線蟲,置于25 ℃恒溫培養(yǎng)箱中分別處理12、24、36、48 h；最后于解剖鏡下利用針刺觸碰法判斷線蟲的死活情況,用下式計算死亡率(%)：死亡率=死亡線蟲數(shù)/處理線蟲數(shù)×100%。每一質(zhì)量濃度的藥劑處理重復(fù)3次,以ddH2O處理為對照。

1.4 數(shù)據(jù)處理

用SPSS(SPSS Inc., Illinois, USA)統(tǒng)計軟件對所得實(shí)驗數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。計算不同藥劑的毒力回歸方程y=ax+b(y代表線蟲的死亡率,x代表藥劑質(zhì)量濃度的常用對數(shù))、藥劑的致死中濃度LC50值(Lethal Concentration 50 value)及相關(guān)系數(shù)R。

2 結(jié)果與分析

2.1 4種藥劑對松材線蟲的毒力

從表1可以看出：4種藥劑處理松材線蟲后,呈現(xiàn)出不同的毒力效果,獲得最好效果的是阿維·蘇云菌,其次是克百威·敵和丁硫·毒死蜱,最差的是阿維納米·線蟲丹；線蟲的死亡率隨著處理時間的延長和藥劑質(zhì)量濃度的增加而增加,阿維·蘇云菌5個濃度梯度從低到高處理線蟲48 h后,線蟲的死亡率分別為23.67%、28.00%、42.33%、55.67%、85.67%;克百威·敵和丁硫·毒死蜱最高質(zhì)量濃度處理松材線蟲48 h后,線蟲的死亡率分別為23.33%、15.67%；而阿維納米·線蟲丹在最高濃度最長時間處理下,都沒有呈現(xiàn)出毒殺松材線蟲的作用。

如表2所示,阿維·蘇云菌對松材線蟲的LC50值隨著處理時間的延長而越來越小,依次為59.29、40.55、25.94、20.80 g/L。

表1 4種藥劑對松材線蟲的殺線率

注：表中數(shù)據(jù)為3次獨(dú)立實(shí)驗的平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤。

2.2 4種藥劑對阿蘇里傘滑刃線蟲的毒力

4種藥劑處理阿蘇里傘滑刃線蟲后,防效最好的依然是阿維·蘇云菌,其5個濃度梯度從低到高處理線蟲48 h后,線蟲的死亡率分別為37.00%、47.33%、65.67%、75.67%、95.00%;克百威·敵、阿維納米·線蟲丹、丁硫·毒死蜱這3種藥劑只在設(shè)置的最高質(zhì)量濃度(100.00 g/L)下才表現(xiàn)出一定的毒性,處理48 h后線蟲的死亡率分別為11.33%、12.00%、14.67%(表3)。此外，阿蘇里傘滑刃線蟲的死亡率也隨著處理時間的延長和藥劑質(zhì)量濃度的增加而增加。

由表4可見,阿維·蘇云菌對阿蘇里傘滑刃線蟲的LC50值同樣隨著處理時間的延長而下降,從高到低依次為22.39、18.84、14.96、12.88 g/L。

表2 阿維·蘇云菌在不同時間對松材線蟲的毒力

表3 4種藥劑對阿蘇里傘滑刃線蟲的殺線率

注：表中數(shù)據(jù)為3次獨(dú)立實(shí)驗的平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤。

表4 阿維·蘇云菌在不同時間對阿蘇里傘滑刃線蟲的毒力

3 結(jié)論與討論

本研究結(jié)果表明：在4種供試化學(xué)藥劑中,阿維·蘇云菌對松材線蟲和阿蘇里傘滑刃線蟲都表現(xiàn)出了較強(qiáng)的毒性,50.00 g/L質(zhì)量濃度處理48 h后，這兩種線蟲的死亡率分別達(dá)85.67%、95.00%,其LC50值分別為20.80、12.88 g/L;克百威·敵和丁硫·毒死蜱對兩種線蟲也具有一定的毒力,但用其最高濃度(100.00 g/L)處理48 h后,線蟲的死亡率都沒有超過25%,其中對松材線蟲的死亡率分別是23.33%、15.67%,對阿蘇里傘滑刃線蟲的死亡率分別為11.33%、14.67%。阿維納米·線蟲丹僅對阿蘇里傘滑刃線蟲有毒性,但是其最高濃度處理48 h后,線蟲的死亡率僅僅為12.00%。雖然松材線蟲和阿蘇里傘滑刃線蟲都隸屬于傘滑刃線蟲屬,但是對同一藥劑的敏感性不一致,說明在近似種之間的抗藥性存在一定的差異。

許多專家學(xué)者對林業(yè)植物線蟲病害進(jìn)行了大量研究,如林茂松等研究表明2%阿維菌素乳油能有效地防止松材線蟲的侵染,藥劑的持續(xù)期為2年[5];安玉興等研究發(fā)現(xiàn)16%蟲線清能殺死板材和方木中的松材線蟲[6];李橋等發(fā)明的以甲維鹽、阿維菌素、啶蟲脒為主要成分的注干藥劑對松材線蟲的防治效果可達(dá)80%以上[7];來燕學(xué)等篩選出以甲維鹽和阿維菌素為主要成分的樹干注射劑，其能有效地預(yù)防松材線蟲病的發(fā)生和蔓延[8-9];嘧啶氧磷和天維菌素也都對松材線蟲表現(xiàn)出了較強(qiáng)的毒性[10-11]。在本研究中,阿維·蘇云菌藥劑對松材線蟲和阿蘇里傘滑刃線蟲都呈現(xiàn)出了較高的毒性,但是其LC50值略高,可能的原因是本實(shí)驗中使用的藥劑都是商品化的試劑,同一品名的藥劑由于農(nóng)藥生產(chǎn)廠家不同,其有效成分含量有可能不一樣;另外,大部分關(guān)于毒力測定的研究使用的藥劑都是原藥,純度較高,也沒有填料的影響,所以其LC50值比本實(shí)驗中計算出的LC50低。其它3種藥劑對線蟲毒性較弱或者沒有毒性,估計是藥劑本身的作用機(jī)理造成的。在實(shí)際生產(chǎn)中,所用的藥劑都是商品化的藥劑,因此,本研究結(jié)果可為林業(yè)植物寄生線蟲的針對性防治提供參考。有關(guān)藥劑的林間防效和使用技術(shù)有待于進(jìn)一步研究。

[1] 程瑚瑞,林茂松,黎偉強(qiáng),等.南京黑松上發(fā)生的萎蔫線蟲病[J].中國森林病害,1983(4):1-5.

[2] 國家林業(yè)局.國家林業(yè)局公告(2016年第8號)(2016年松材線蟲病疫區(qū)公告)[EB/OL].(2016-04-08) [2017-03-24]. http://www.forestry.gov.cn/main/3600/content-863113.html.

[3] Zhao B G, Futai K, Sutherland J R, et al. Pine wilt disease [M]. Japan: Springer, 2007: 18-26.

[4] Giannakou I O, Karpouzas D G, Anastasiades I, et al. Factors affecting the efficacy of non-fumigant nematicides for controlling root-knot nematodes [J]. Pest Manag Sci, 2005, 61(10): 961-972.

[5] 林茂松,周明國.2%阿維菌素乳油對松材線蟲的生物活性測定[J].農(nóng)藥學(xué)學(xué)報,2001,3(3):40-44.

[6] 安玉興,徐漢虹,黃繼光,等.16%蟲線清乳油對松木中松材線蟲的滅殺活性[J].農(nóng)藥,2009,48(8):614-616.

[7] 李橋,張紹勇,仇輝康,等.6種藥劑林間注干施藥防控松材線蟲效果分析[J].浙江農(nóng)林大學(xué)學(xué)報,2016,33(4):718-723.

[8] 來燕學(xué),池樹友,王亞紅,等.殺滅松材線蟲的高效藥物篩選與毒性測定[J].浙江農(nóng)林大學(xué)學(xué)報,2011,28(3):479-485.

[9] 來燕學(xué),何月秋,池樹友,等.高效松材線蟲病預(yù)防注射藥劑配制與林間藥效研究[J].江西農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報,2016,38(5):871-878.

[10] 洪森,王新榮,徐漢虹.嘧啶氧磷對松材線蟲的有效殺線活性[J].廣東林業(yè)科技,2014,30(1):26-30.

[11] 楊波,張紹勇,陳振,等.新化合物天維菌素的殺蟲殺螨活性[J].農(nóng)藥學(xué)學(xué)報,2016,18(1):124-129.

[12] 周慧,李培征,陳施明,等.6種殺蟲劑對康癭蚊幼蟲室內(nèi)毒力測定及田間藥效試驗[J].南方農(nóng)業(yè)學(xué)報,2015,46(2):260-264.

(責(zé)任編輯:黃榮華)

Test for Indoor Toxicity of Different Nematicides againstBursaphelenchusxylophilusandBursaphelenchusarthuri

XIA Yan-fei, ZHOU Jia-ju, WANG Qiong-wei, ZHANG Yuan-yuan, LI Zhi-kun

(Forestry College, Henan University of Science and Technology, Luoyang 471023, China)

The indoor toxicities of different mass concentrations of 4 chemical nematicides againstBursaphelenchusxylophilusandBursaphelenchusarthuriwere tested by using dipping method. The results showed that: Abamectin·Bacillusthuringiensishad the strongest toxicity to these two nematode species, the mortality ofB.xylophilusandB.arthurireached 85.67% and 95.00% respectively 48 h after being treated with the highest concentration (50.00 g/L) of this nematicide, and their medial lethal concentration was 20.80 and 12.88 g/L separately; Carbofuran·Trichlorfon and Carbosulfan·Chlorpyrifos also had a certain toxicity to these two nematode species.

Nematicide; Plant parasitic nematode; Toxicity test; Mortality; Medial lethal concentration

2017-05-07

國家自然科學(xué)基金項目(31201558);河南科技大學(xué)博士啟動基金項目(09001590)。

夏彥飛(1980─),男,安徽人,博士,主要從事植物線蟲病害防治工作。

S481.9

A

1001-8581(2017)09-0080-04