MQ-2000PT糖化血紅蛋白分析儀性能驗證

朱延清 吳文新 吳文君 朱舜琦

215345江蘇省昆山市淀山湖人民醫院檢驗科

MQ-2000PT糖化血紅蛋白分析儀性能驗證

朱延清 吳文新 吳文君 朱舜琦

215345江蘇省昆山市淀山湖人民醫院檢驗科

目的：對MQ-2000PT全自動糖化血紅蛋白分析儀進行性能驗證。方法：按照CLIS EP15-A2文件進行準確度、精密度評價；按照WS/T 408-2012和402-2012文件進行線性范圍和參考區間驗證。結果：批內、批間精密度均＜3%；20例健康成人HbA1c檢測值，結果在參考范圍內19例，引用廠家的參考區間，在4.0%～6.0%為有效；溯源樣本1靶值5.3%，樣本2靶值8.7%，測得的偏離度均＜3%，準確度驗證通過。結論：MQ-2000PT糖化血紅蛋白分析儀具有重復性好、檢測結果準確、分析速度快等特點，可定量檢測患者血液中糖化血紅蛋白的含量。

糖化血紅蛋白；高效液相色譜法；性能驗證

根據《醫療機構臨床實驗室管理辦法》和《醫學實驗室質量和能力認可準則》ISO 15189的規定，為保證臨床實驗室檢驗結果的準確與可靠性，任何新的檢測系統在正式用于檢測時，發出檢驗報告前，實驗室需要對儀器的性能進行驗證[1，2]，檢查其是否符合廠家聲稱的性能。驗證的主要內容包括精密度、準確性、線性、參考范圍等。國產惠中MQ-2000PT全自動糖化血紅蛋白分析儀采用經典的陽離子高效液相色譜法檢測原理，在國內用戶越來越多，但對該儀器的性能驗證報道較少，現對我院使用該儀器進行性能驗證的結果分析如下。

資料與方法

儀器與試劑：MQ-2000PT全自動糖化血紅蛋白分析儀，試劑為儀器配套試劑，批號PTHbA1c151106H。MAS糖化血紅蛋白質控品，批號DBCL1606。其儀器廠家、性能參數，見表1。

標本來源：收集本院門診和住院的患者標本、健康體檢標本，所有標本均用EDTA-K2抗凝管采集。

方法：①精密度驗證：a.批內精密度：隨機選取高值、中值及低值新鮮病人全血各1份，用同一批次試劑盒測試。每個標本連續重復測試20次，計算各標本20次測試的(±s)和變異系數(CV)。b.批間精密度驗證：檢測高、中2個濃度水平的MAS糖化血紅蛋白質控品，分別連續測定20 d，每天檢測2批，每批檢測1次，計算20次測試的平均值、標準差和變異系數。②線性驗證：根據中華人民共和國衛生行業標準《臨床化學設備線性評價指南》對線性進行驗證[3]。收集高低值樣本(分別記為H和L)，按 5L、1H+4L、2H+3L、3H+2L、4H+1L、5H的比例配成6個濃度樣本，每個重復檢測3次。每個稀釋樣本的預期值(由已知的高低濃度樣品值計算得到)為X軸作圖，計算相關系數r2≥0.95，且各濃度點的測定均值與預期值的相對偏倚應≤10%。觀察結果有無明顯數據錯誤，若有明顯異常時，應判斷離群點。全部數據中的離群點如果≥2點，應重新進行實驗。③參考區間驗證：根據中華人民共和國衛生行業標準《臨床實驗室檢驗項目參考區間的制定》小樣本驗證方案[4]，收集正常健康人20例(無已知疾病、無用藥史、體重在健康范圍的人)樣本及時檢測，對參考范圍進行驗證，只允許10%的數據超過所驗證的參考范圍。如≥3個測定值超出，則需重新篩選20例，重復上述操作。R=(測定結果在參考范圍內的例數/總測定例數)×100%，R≥90%為通過。④準確度：測量2個有美國國家糖化血紅蛋白標準化計劃(NGSP)溯源樣本，該樣本由上海惠中醫療科技有限公司提供，樣本1靶值5.3%，樣本2靶值8.7%，每個樣本測定5次，計算2個樣本的平均值、標準差、變異系數、偏離度(B)。偏離度B≤±8%可以接收。測量樣本平均值；x：樣本靶值。

結 果

精密度驗證結果：批內、批間精密度CV值均小于判斷標準，精密度較好，見表2、表3。

線性驗證值：線性測試回歸曲線，見圖1。

檢測糖化血紅蛋白的上下限均呈線性，相對偏倚≤10%，r2≥0.95，符合驗證要求，見表4。

參考區間驗證結果：20例健康成人HbA1c檢測值：19例結果在參考范圍內，R95%，引用廠家的參考區間在4.0%～6.0%為有效，見表5。

準確度驗證通過，見表6。

表1 廠家說明書參數

表2 批內精密度

表3 批間精密度(±s)

表3 批間精密度(±s)

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圖1 HbA1c線性測試回歸曲線圖(單位：%)

表4 線性驗證數據(%)

討 論

糖化血紅蛋白是血紅蛋白與糖類經非酶促反應結合而成的，生成的量與血糖的濃度和高血糖存在的時間相關。糖化血紅蛋白反映的是檢測前120d平均血糖水平，較空腹血糖和口服葡萄糖耐量試驗有獨特的優越性，并且與患者是否空腹、抽血時間、是否使用胰島素等因素無關[5]。HbA1c在糖尿病患者篩查、血糖控制效果評價、并發癥預防以及鑒別糖尿病性高血糖和應激性高血糖等方面發揮著巨大的作用[6]，2010年美國糖尿病協會(ADA)將其列為糖尿病的首選診斷指標[7]。離子交換高效液相色譜法(HPLC)具有快速、準確、精密度高和特異性強等特點，被美國、瑞典等國家確定為HbA1c標準化系統的參考方法，并成為HbA1c檢測公認的金標準[8]，

在實驗室實際條件下，用實驗去證實該儀器檢測系統的穩定性、可靠性，與廠商提供的資料一致才能將此系統用于臨床檢驗[9]。精密度是指測量程序在相同條件下，對同一樣本進行連續多次檢測所得結果之間的一致性，通過批內、批間精密度測定表明該檢測系統達到要求。精密度是反映儀器整體性能的首要指標，是進行其他項目驗證實驗的前提[10]。本次實驗在確認檢測系統精密度符合要求的基礎上進行了線性、參考范圍、準確度驗證，均符合廠家聲明的參數。批內、批間精密度CV值均＜2%，精密度好，可以保證檢驗結果穩定。參考范圍按照中華人民共和國衛生行業標準：臨床實驗室檢驗項目參考區間里的內容，制定了小樣本驗證方案，驗證通過。準確度采用EP-15A2的驗證方案，樣本由上海惠中醫療科技有限公司提供的具有NGSP溯源樣本進行驗證，驗證通過。根據衛生行業標準《臨床化學設備線性評價指南》對線性進行驗證，線性回歸方程y=1.005 70.370 1，r2=0.994 8，呈線性。我國新版《2型糖尿病防治指南(2013年版)》建議[11]，暫不推薦在我國將HbA1c作為糖尿病的診斷切點，但對于采用標準化檢測方法，有嚴格的質量控制才能保證檢驗結果的準確性。因此，對儀器進行全面的性能驗證、評價顯得非常重要。

性能驗證是一個復雜過程，驗證前要詳細制定計劃，要考慮所用的樣本、檢測批次時間的選定、分析結果的方法、接受結果的標準等。通過各項性能驗證的結果，惠中MQ2000PT糖化血紅蛋白儀檢測糖化血紅蛋白的精密度、線性、參考范圍、準確度驗證均符合廠家聲明要求，實驗證明其檢驗結果準確、可靠、吸樣量少、分析速度快、重復性好，可以滿足臨床需求。分析驗證的數據，使檢驗結果在對病人的診斷和治療中具有可比性。

[1]ISO15189.醫學實驗室質量和能力認可準則[S].中國合格評定國家認可委員會,2008：1-36.

[2]畢波,呂元.定量檢測方法學性能驗證的系統設計[J].中華檢驗醫學雜志,2007,30(2)：143-145.

[3]中國人民共和國衛生行業標準(WS/T 408-2012).臨床化學設備線性評價指南[S].

[4]中華人民共和國衛生行業標準(WS/T402-2012).臨床實驗室檢驗項目參考區間的制定[S].

表5 20例健康成人HbA1c檢測值

表6 準確度樣本驗證(±s)

表6 準確度樣本驗證(±s)

HbA1c ±s CV(%) x B(%) 判斷標準 評價結果樣本1 5.18±0.045 0.87 5.3 2.26 B≤8% 通過樣本2 8.56±0.055 0.64 8.7 1.61 B≤8% 通過

[5]王麗娟,紀立農.國際專家委員會關于糖化血紅蛋白檢測在糖尿病診斷中的作用的報告[J].中國糖尿病雜志,2009,17(8)：563-568.

[6]Home P,Haddad J,Latif Z A,et al.Comparison of National/Regional Diabetes Guidelines for the Management of Blood Glucose Control in non-Western Countries[J].Diabetes Ther,2013,4(1)：91-102.

[7]王冬環,陳文祥,張傳寶,等.糖化血紅蛋白實驗室檢測指南[J].中國糖尿病雜志,2013,21(8)：673-678.

[8]Little RR,Rohlfing CL,Sacks DB.Status of hemoglobin A1c measurement and goals for improvement：from chaos to order for improving diabetes care[J].Clin Chem,2011：57(2)205-214.

[9]張葵.定量檢測系統方法學性能驗證的基本方法[J].臨床檢驗雜志,2009,27(5)：321-323.

[10]賀巖,崔學強,杜宗孝.BIO-RAD VARIANTⅡ測定糖化血紅蛋白的性能評價及其在糖尿病篩查中的應用[J].寧夏醫科大學學報,2015,37(4)：474-477.

[11]中華醫學會糖尿病學分會.中國2型糖尿病防治指南(2013年版)[J].中華糖尿病雜志,2014,6(7)：447-498.

Performance verification of MQ-2000PT glycosylated hemoglobin analyzer

Zhu Yanqing,Wu Wenxin,Wu Wenjun,Zhu Shunqi
Department of Clinical Laboratory,the People's Hospital of Dianshan Lake,Kunshan City,Jiangsu Province 215345

Objective：The performance of MQ-2000PT automatic hemoglobin analyzer was verified.Methods：We evaluted the accuracy and precision according to the CLIS EP15-A2 document.We validated the linear range and the reference interval according to the WS/T 408-2012 and 402-2012 files.Results：The intra-and inter-batch precision was less than 3%.HbA1cvalues of 20 healthy adults were measured and 19 cases within the reference range,the reference to the manufacturer's reference range from 4.0%to 6.0%effective.The target value of traceability sample 1 was 5.3%,and sample 2 was 8.7%,and the deviation was less than 3%,the accuracy was verified by.Conclusion：MQ-2000PT glycosylated hemoglobin analyzer has the characteristics of good repeatability,accurate detection and rapid analysis.It can quantitatively detect the content of glycosylated hemoglobin in the blood of patients.

Glycosylated hemoglobin;High performance liquid chromatography;Performance verification

10.3969/j.issn.1007-614x.2017.24.67