Sysmex CA7000及CS5100全自動凝血分析儀性能評價

蘇 楊，冀承杰，趙太強，李焱鑫，麥 濤，蔣 黎

(四川省醫學科學院·四川省人民醫院檢驗科，四川 成都 610072)

Sysmex CA7000及CS5100全自動凝血分析儀性能評價

蘇 楊，冀承杰，趙太強，李焱鑫，麥 濤，蔣 黎

(四川省醫學科學院·四川省人民醫院檢驗科，四川 成都 610072)

目的驗證Sysmex CA7000和CS5100全自動凝血分析儀系統性能。方法參考美國臨床和實驗室標準化協會(NCCLS)相關文件，并對照全國臨床檢驗操作規程(第4版)及衛生行業標準的有關規定，對Sysmex CA7000和CS5100不精密度、準確度、攜帶污染率、線性、檢測限、參考區間進行系統評價。結果批內精密度、日間精密度正常樣本和異常樣本變異系數(CV)均在規定范圍內。準確度驗證各項目符合衛生部室間質評定值范圍，攜帶污染率、線性評價、檢測限、參考范圍驗證均符合本室質量管理要求。結論CA7000及CS5100凝血分析儀不精密度、準確度、攜帶污染率、線性、檢測限、參考區間驗證評價通過，該系列儀器性能良好，有效保證凝血檢測結果的可靠性及可比性。

Sysmex CA7000；Sysmex CS5100；全自動凝血分析儀；性能評價

凝血分析作為臨床常規檢查項目，對出血性疾病的篩查與診斷、血栓前狀態和血栓疾病的檢查、各種抗凝藥的正確應用和預后估計都有指導性意義。并廣泛應用于孕產婦及患者術前術后常規檢查，判斷血液疾病及肝臟疾病的病情嚴重程度及預后。隨著凝血分析技術的不斷更新和滿足臨床對于檢驗結果穩定、準確、高效的要求。Sysmex CA7000和CS5100作為希森美康公司的新型和主力機型具有檢測準確快速的特點，包含凝固法，發色底物法及免疫比濁法等多種檢測原理，被廣泛地應用于各級實驗室。參考美國臨床和實驗室標準化協會(NCCLS)相關文件EP5 A2、EP6 A、EP10 A3、EP15 A[1～4]，并對照全國臨床檢驗操作規程(第4版)及衛生行業標準的有關規定[5，6]，本研究對Sysmex CA7000和CS5100全自動凝血分析儀檢測項目凝血酶原時間(PT)、活化部分凝血時間(APTT)、纖維蛋白原(FIB)、凝血酶時間(TT)不精密度、準確度、線性、檢測限、參考區間進行較全面的性能評價，以確保同系列儀器檢測結果準確可靠。

1 材料和方法

1.1材料選取2016年1～12月我院門診就診患者及健康體檢者抽取靜脈血2.7 ml，加入含有0.3 ml枸櫞酸鈉溶液的(9∶1)抗凝真空采血試管(藍頭)中，并輕輕顛倒5～8次使之充分混勻，無凝塊，總量不超過(3.0±0.2)ml；3000 r/min離心10 min；取乏血小板血漿4 h之內上機檢測。

1.2儀器與試劑Sysmex CA7000及CS5100全自動凝血分析儀，Sysmex凝血分析儀原裝配套試劑，Simens Dade Behring Marburg公司質控品水平1，水平2，水平3，質控血漿P。試劑及質控品使用新鮮無菌去離子水嚴格按照操作說明定量配制，并于37 ℃孵箱復溫30 min至室溫后備用。

1.3方法

1.3.2準確度驗證 使用衛生部室間質評5份質控物分別進行單次檢測，計算每份樣本檢測結果與靶值(公議值或參考值)的相對偏差，每個檢測項目的相對偏差符合要求比例的應≥80%。

1.3.3FIB線性評價 在臨床檢測樣本中篩選測定項目所對應的高值(H)進行比例稀釋，分5個值測試，分別為：100%、80%、60%、40%、20%；每個值按常規操作測定2次并計算其平均值。實驗數據與由Sysmex提供儀器線性理論值進行線性回歸(y=ax+b)。

1.3.4攜帶污染率 ①高值樣本對低值樣本的污染：選擇原裝質控品中、高值樣本，將低值樣本置樣本架1和3位置，高值樣本置于2位置，每個樣本分別測定3次。記錄結果N1、N2、N3、A1、A2、A3、N4、N5、N6，按公式： k1=[N4-Mean(N1，N2，N3)]/Mean(N1，N2，N3)計算攜帶污染率，判斷標準：k1<10%。②低值樣本對高值樣本的污染：將高值樣本置樣本架1和3位置，低值樣本置于2位置，每個樣本分別測定3次記錄結果A1、A2、A3、N1、N2、N3、A4、A5、A6，按公式： k2=[A4-Mean(A1，A2，A3)]/Mean(A1，A2，A3)計算攜帶污染率，判斷標準：k2<10%。

1.3.5生物參考區間驗證 隨機抽取四川省醫學科學院四川省人民醫院體檢中心提供的健康體檢人群(男20例，女20例)共40份血液，排除心腦血管疾病史、高血壓、出血傾向、低血小板、血液病、血友病等凝血相關疾病及口服抗凝藥物史，于全自動凝血分析上分別測定各項目，計算R=(檢測值在應用參考區間的參考個體數)/(總的參考個體數)×100%，驗證所測正常人群結果是否在廠家提供的參考范圍之內，要求R≥90%。

1.3.6FIB檢測限測試 連續測定接近檢測下限的樣本10次，記錄結果并計算CV值，要求CV<20%為驗證通過。

2 結果

2.1批內和日間不精密度Sysmex CA7000和CS5100各項目正常及異常水平樣本批內不精密度CV均符合中華人民共和國衛生行業標準之《臨床血液學檢驗常規項目分析質量要求》(WS/T 406-2012)，見表1，表2。

表1 CA7000批內及日間不精密度驗證結果

表2 CS5100批內及日間不精密度驗證結果

2.2準確度驗證檢測衛計委臨檢中心室間質評物，所得結果與靶值(公議值)的相對偏差符合行業標準要求的比例≥80%，見表3，表4。

表3 CA7000準確度驗證結果

表4 CS5100準確度驗證結果

2.3攜帶污染率驗證高值樣本對低值樣本的攜帶污染率和低值樣本對高值樣本的攜帶污染率均小于10%，見表5，表6。

表5 高值對低值攜帶污染率驗證結果 (%)

表6 低值對高值攜帶污染率驗證結果 (%)

2.4FIB線性評價CA7000儀器FIB回歸方程Y=0.9898X+0.1106(r=0.9983)，CS5100儀器FIB回歸方程Y=0.9797X-0.1837(r=0.9908)。根據斜率a=1±0.05，r≥0.975或r2≥0.95要求，驗證通過，見表7。

表7 FIB(g/L)線性分析結果

2.5生物參考區間驗證隨機選取健康體檢人群樣本40份，其中男女各20份。嚴格按照操作規程檢測，樣本結果與生物參考區間的符合率均≥90%，見表8。

表8 生物參考區間驗證結果

2.6FIB檢測限如表9所示，兩臺儀器檢測限CV均小于20%，驗證通過。

表9 FIB檢測限測定結果

3 討論

檢驗結果的質量是一臺儀器是否符合臨床需求的最重要因素。在儀器投入使用及長時間使用過程中，確保儀器性能狀態穩定至關重要。因此必須對儀器性能進行驗證，以滿足實驗室的質量管理和臨床對于結果準確性的要求。全自動凝血分析儀具有操作簡便，結果準確高效穩定的特點。本實驗室所采用的Sysmex系列凝血分析儀檢測原理多樣：凝固法、發色底物法、免疫法，并可隨機組合使用[8]。是目前集高速處理、隨機測試、自動復查等多種檢測功能于一身的全自動凝血分析儀，已廣泛應用于臨床檢測。而凝血分析儀的性能評價也越來越多地被報道[9～13]。本實驗室所使用的CA7000及CS5100為希森美康公司功能強大的主力機型，尚未見同時對其進行性能評價的報道。

參考CNASCL02：2013《醫學實驗室質量與能力認可準則》的要求及中華人民共和國衛生行業標準之《臨床血液學檢驗常規項目分析質量要求》(WS/T 406-2012)[6，7]，本實驗室采用正常及異常共3個水平Sysmex凝血分析儀原裝配套質控品對PT、APTT、FIB進行批內精密度及日間精密度驗證，CV%結果均明顯低于標準要求，具有良好的穩定性和精密度。同樣根據上述要求采用衛生部室間質評物作為參照的準確度評價顯示，兩臺儀器檢測PT、APTT、FIB各水平結果均符合要求。而FIB線性評價和攜帶污染率驗證通過說明兩臺儀器均具有良好的檢測線性分析能力和自潔系統。FIB檢測限的驗證由于采用抽取當日臨床樣本的方式，為保證檢測在采集樣本四小時內完成，在選擇標本時，可能存在樣本檢測值未達到更加接近檢測下限的問題，但盡可能選擇符合要求的樣本，并基本涵蓋日常檢測低值樣本范圍，且驗證結果良好。由于各地區環境、人群分布、飲食、生活習慣和檢測系統、試劑及實驗條件等各種因素不同，儀器廠商所提供的參考區間是否符合各實驗室自身情況，必須通過驗證來證實。本實驗室隨機抽取40例健康體檢人員樣本進行檢測，所得結果均顯示符合廠家給定的范圍，證明該參考區間適合本實驗室實際應用。需要說明的是由于行業標準在精密度評價要求中未給出TT的質量標準，但本實驗室仍然采用與PT、APTT、FIB相同的檢測樣本和檢測條件對其進行評價，不精密度評價參照PT及APTT判斷標準執行，結果顯示TT在批內及日間精密度評價的CV均通過驗證。而對于TT精密度的驗證方式是否恰當，需要進行進一步研究和討論。同樣進行線性驗證需要隨機抽取當日接近檢測上限的高值樣本，為保證試劑狀態和檢測時限，本次驗證所取樣本檢測值未能達到試劑說明給定范圍，但盡量選取當日高值樣本，且檢測線性符合臨床多數樣本情況。

Sysmex CA7000及CS5100作為該系列性能優越的機型，應用范圍非常廣泛。本研究就本實驗室凝血分析儀的性能評價發現，兩臺儀器在凝血常規檢測項目的精密度、穩定性、準確度、線性分析方面表現良好，同時具備攜帶污染率低，檢測范圍廣等優點。適合大型實驗室大批量樣本凝血項目檢測和臨床對結果質量要求嚴格的需求，滿足各級實驗室用于止凝血和血栓疾病的項目檢測。

[1] Clinical And Laboratory Standards Institute(CLSI).EP5-A2 E-valuation of precision performance of quantitative measurement methods；approved guideline-second edition[S].USA：CLSI，2004.

[2] National Committee for Clinical Laboratory Standards(NCCLS).EP6-A Evaluation of the linearity of quantitative measurement procedures；approved guideline[S].USA：NCCLS，2004.

[3] Nationa1 Committee for Clinical Laboratory Standards(NCCLS).EP10-A3 Preliminary evaluation of quantitative clinical laboratory methods；approved guidelilne-third edition[S].USA：CLSI，2006.

[4] Nationa1 Committee for Clinical Laboratory Standards(NCCLS).EP15-A2 User demonstration of performance for precision and accuracy；approved guideline[S].USA： CLSI，2004.

[5] 中華人民共和國衛生部醫政司.全國臨床檢驗操作規程(第四版)[M].北京：人民衛生出版社，2015.

[6] 中華人民共和國衛生部.WS/T 406-2012 臨床血液學檢驗常規項目分析質量要求[S].北京：中國標準出版社，2012.

[7] 中國合格評定國家認可委員會.CNAS-CL02 醫學實驗室質量和能力認可準則[Z].北京，2013.

[8] 閆宏斌，鄭善鑾，郝曉柯.SYSMEX CS5100血凝分析儀性能評估及凝血六項參考區間的調整[J].檢驗醫學，2014，29(9)：964-965.

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[11]苑林，李嘉勝，劉振杰，等.Sysmex CS2000i全自動凝血分析儀性能評價[J].國際檢驗醫學雜志，2016，37(3)：351-352.

[12]陳淵博，鄭文婷，尹志軍，等.CA7000全自動凝血儀性能驗證[J].國際檢驗醫學雜志，2013，34(2)：209-211.

[13]蒲寧婧，張霞，鐘永林，等.CS5100全自動血凝分析儀性能評價[J].血栓與止血學，2016，22(2)：178-185.

PerformanceevaluationofSysmexCA7000andCS5100automaticbloodcoagulationanalyzersystem

SUYang，JICheng-jie，ZHAOTai-qiang，LIYan-xin，MAITao，JIANGLi

(ClinicalLaboratory，SichuanAcademyofMedicalScience&SichuanProvincialPeople’sHospital，Chengdu610072，China)

ObjectiveTo verify the performance of Sysmex CA7000 and CS5100 automatic blood coagulation analyzer system.MethodsAccording to the relative references of American National Committee for Clinical Laboratory standards (NCCLS) and the national guide to clinical laboratory procedures (fourth edition) and the relevant provisions of the health occupation standards，the precision，accuracy，carrying contamination rate，linearity，detection limit and reference interval of Sysmex CA7000 and CS5100 were evaluated.ResultsValidated Intra-and inter-assay CV of normal and abnormal samples，accuracy，carrying contamination rate，linearity，detection limit and reference interval were consistent with the quality controls.ConclusionSysmex CA7000 and CS5100 blood coagulation analyzer is with good performance which can guarantee the results of coagulation test with reliability and comparability.

Sysmex CA7000 and CS5100；Automatic blood coagulation analyzer；Performance evaluation

R446

A

1672-6170(2017)05-0033-04

2017-04-01；

2017-06-24)