類風濕性關節炎患者外周血白細胞介素-37及可溶性PD-1分子的檢測價值分析

馬萬明，岳飛利，白珊珊，周自城，楊名宇

四川省雅安市人民醫院 檢驗科(雅安625000)

·論著·

類風濕性關節炎患者外周血白細胞介素-37及可溶性PD-1分子的檢測價值分析

馬萬明，岳飛利，白珊珊，周自城，楊名宇

四川省雅安市人民醫院 檢驗科(雅安625000)

目的研究類風濕性關節炎(rheumatoid arthritis，RA)患者外周血抗炎性因子及可溶性PD-1(soluble PD-1，SPD-1)分子的檢測價值。方法選擇2015年1月至2016年12月四川省雅安市人民醫院收治的RA患者68例納入病例組，選擇同期健康人68例納入對照組，以酶聯免疫吸附試驗檢測兩組外周血白細胞介素-37(IL-37)、白細胞介素-1(IL-1)、干擾素-γ(IFN-γ)、腫瘤壞死因子(TNF-α)及SPD-1等細胞因子水平，評價病例組患者RA診斷得分，并判斷病例組IL-37、SPD-1與RA診斷得分、IL-1、IFN-γ、TNF-α水平的相關性。結果病例組外周血IL-37、SPD-1、IL-1、IFN-γ、TNF-α水平均高于對照組，差異有統計學意義(P<0.05)。病例組外周血IL-37、SPD-1和RA診斷得分呈正相關性(P<0.05)；病例組外周血IL-37與IL-1、IFN-γ、TNF-α均呈正相關性(P<0.05)；病例組外周血SPD-1與IL-1、IFN-γ、TNF-α均呈正相關性(P<0.05)。結論RA患者外周血IL-37、SPD-1與RA的嚴重程度及其他多種炎性因子密切相關，在RA的臨床檢測中具有較高應用價值。

類風濕性關節炎；抗炎性因子；可溶性PD-1分子；炎性因子；檢測價值

類風濕性關節炎(rheumatoid arthritis，RA)是以關節炎性反應為主要特點的自身免疫性疾病，早期表現為關節熱痛紅腫及功能障礙，繼續發展可逐漸出現關節不同程度的畸形變化，并累及關節外多個系統[1]。資料[2]顯示，RA發病機制較為復雜，但最終均導致關節腔炎性反應，炎性反應常引發關節腔內纖維及肉芽組織增生，嚴重影響關節腔正常血供，并最終導致關節腔局部壞死，累及關節。有研究[3]顯示，免疫功能紊亂是引發RA的關鍵機制，在RA發病及進展過程中，干擾素、趨化因子、白細胞介素、協同刺激分子等細胞因子起到了重要作用。為探究RA發病機制，四川省雅安市人民醫院于2015年1月至2016年12月檢測RA患者外周血白細胞介素-37(interleukin-37，IL-37)與可溶性PD-1(soluble PD-1，SPD-1)分子，以探究IL-37、SPD-1與RA的關系，現報道如下。

1 資料與方法

1.1臨床資料

選擇2015年1月至2016年12月我院收治的RA患者共68例，其中，男38例(55.88%)，女30例(44.12%)，年齡20～69(46.52±4.63)歲。納入標準：1)符合美國風濕病學院與歐洲風濕病防治聯合會2010年制定的RA診斷標準患者；2)30 d內未行免疫抑制劑治療患者；3)無其他感染性疾病患者；4)知情同意患者。排除標準：1)系統性紅斑狼瘡患者；2)急慢性疾病史患者；3)肝腎功能異常患者；4)惡性腫瘤患者；5)其他風濕性疾病患者；6)糖尿病患者。將上述68例RA患者納入病例組。選擇同期健康人68例納入對照組，其中，男35例(51.47%)，女33例(48.53%)，年齡21～70(46.36±4.61)歲。兩組性別、年齡和體質量指數(BMI)比較，差異無統計學意義(P>0.05)，具有可比性(表1)。

表1 兩組一般資料比較(n=68)

1.2方法

以酶聯免疫吸附試驗檢測兩組外周血IL-37、白細胞介素-1(interleukin 1，IL-1)、干擾素-γ(interferon-γ，IFN-γ)、腫瘤壞死因子(tumor necrosis factor-α，TNF-α)及SPD-1等細胞因子水平。兩組均于清晨采集3 mL空腹靜脈血，3 000 r/min，離心半徑10 cm，離心15 min，血漿分離后于-80 ℃溫度下保存待測，檢測嚴格按照試劑盒說明書進行。為避免誤差，每個外周血重復檢測3次。檢測儀器為酶標分析儀(南京普朗醫療設備有限公司，型號：DNM-9606)；IL-37、IL-1、IFN-γ、TNF-α、SPD-1檢測試劑盒(Uscn Life Science, Inc)。

1.3RA診斷評分標準

受累關節：0分：中～大關節1個；1分：中～大關節2～10個；2分：小關節1～3個；3分：小關節4～10個；5分：小關節>10個。外周血：0分：抗環胱氨酸肽抗體與類風濕因子均為陰性；1分：抗環胱氨酸肽抗體或類風濕因子為低滴度陽性；2分：>低滴度陽性，但≤正常值上限的3倍；3分：抗環胱氨酸肽抗體或類風濕因子為高滴度陽性。滑膜炎：0分：持續時間<6周；1分：持續時間≥6周。急性期反應物：0分：紅細胞沉降率與C反應蛋白均正常；1分：紅細胞沉降率或C反應蛋白異常[4]。

1.4統計學方法

2 結果

2.1兩組外周血IL-37、SPD-1水平比較

病例組外周血IL-37、SPD-1水平均高于對照組，差異有統計學意義(P<0.05)(表2)。

表2 兩組外周血IL-37、SPD-1水平比較

2.2兩組外周血IL-1、IFN-γ、TNF-α水平比較

病例組外周血IL-1、IFN-γ、TNF-α水平均高于對照組，差異有統計學意義(P<0.05)(表3)。

組別IL-1IFN-γTNF-α病例組302.32±31.18975.65±102.43609.83±62.87對照組35.65±3.73290.46±31.2861.84±62.27t 70.0272 52.7567 51.0671P<0.001<0.001<0.001

2.3病例組外周血IL-37、SPD-1與RA診斷得分的相關性

病例組外周血IL-37、SPD-1和RA診斷得分存在明顯正相關性(P<0.05)(表4)。

表4 病例組外周血IL-37、SPD-1和RA診斷得分的相關性

2.4病例組外周血IL-37、SPD-1與IL-1、IFN-γ、TNF-α的相關性

病例組外周血IL-37與IL-1、IFN-γ、TNF-α均存在明顯正相關性(P<0.05)；病例組外周血SPD-1與IL-1、IFN-γ、TNF-α均存在明顯正相關性(P<0.05)(表5)。

表5病例組外周血IL-37、SPD-1與IL-1、IFN-γ、TNF-α的相關性

指標IL-1IFN-γTNF-αIL-37r 0.7845 0.8012 0.8112P<0.001<0.001<0.001SPD-1r 0.8436 0.7628 0.8786P 0.0016 0.0021 0.0010

3 討論

研究[5]發現，炎性細胞因子與抗炎性細胞因子失去平衡是引發關節炎性反應的重要機制，而自身免疫性疾病與上述失衡關系密切。有研究[6]證明，IL-1、IFN-γ、TNF-α在RA發病進程中具有重要作用。IL-1可參與炎性反應，刺激滑膜及軟骨細胞生成基質金屬蛋白酶等，抑制表達基質金屬蛋白酶-3抑制劑，降解軟骨基質[7]；IL-1還可抑制關節軟骨細胞增殖及誘導其凋亡[8]。IFN-γ可提高巨噬細胞活性，促進釋放氧自由基、蛋白酶及NO的釋放，導致滑膜及軟骨損傷[9]；IFN-γ還可激活NK細胞，促進炎性介質分泌，參與滑膜組織細胞與免疫細胞間的作用，促進RA發展[10]。TNF-α能夠誘導黏附分子表達，促進白細胞的黏附滲透，引發局部炎性反應[11]；TNF-α可刺激軟骨細胞、滑膜成纖維細胞生成膠原酶及前列腺素E2，抑制合成骨膠原，促進成纖維細胞增生，促進骨質的破壞與吸收[12]。

IL-37為抗炎性細胞因子，屬于IL-1家族，在自身免疫性疾病中可抑制機體炎性反應[13]。研究[14-16]證明，IL-37可抑制STATsl-4磷酸化，影響促炎性因子信號傳導通道以減輕炎性反應；IL-37可結合Smad3，經抑制STAT1、STAT3拮抗炎性反應；IL-37可抑制促炎性轉錄因子中的c-Jun，而促炎性轉錄因子可經IL-1誘導；IL-37能夠降低p38MAPK的磷酸化水平，抑制促炎性反應信號傳導通道；IL-37還可促進CSK3α/β激酶磷酸化，降低其活性，發揮抑制炎性反應的作用。此外，IL-37可通過結合Smad3蛋白，提高TGF-β活性，抑制固有免疫反應與適應性免疫反應，糾正自身免疫性失衡狀態，促進關節軟骨與骨的修復[17]。SPD-1分子為協同刺激分子，可參與血液循環，調節免疫應答，糾正免疫失衡[18]。研究[19-20]證明，SPD-1可抑制自身免疫性疾病患者促炎性反應T細胞的過度反應，保護組織細胞；SPD-1還可抑制B細胞，減少分泌IFN-γ、IL-10等細胞因子，起到免疫調節的作用。在本研究中，病例組外周血IL-37、IL-1、IFN-γ、TNF-α、SPD-1水平均高于對照組(P<0.05)，提示在RA患者機體存在著一定的炎性反應。此外，本研究結果表明，病例組外周血IL-37、SPD-1與IL-1、IFN-γ、TNF-α、RA診斷得分均呈正相關性(P<0.05)，說明IL-37、SPD-1與部分炎性因子及病情進展關系密切，在RA病理發展進程中具有重要作用。

綜上所述，IL-37、SPD-1與RA患者外周血多種炎性因子及RA嚴重程度密切相關，在RA的臨床檢測中具有較高應用價值，可應用于RA診斷。

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TheValueofDetectingHumanInterleukin-37andSolublePD-1inthePeripheralBloodofPatientswithRheumatoidArthritis

MaWanming,YueFeili,BaiShanshan,ZhouZicheng,YangMingyu.

DepartmentofClinicalLaboratory,YaanPeople'sHospitalofSichuan,Yaan625000,China

ObjectiveTo explore the value of detecting human Interleukin-37(IL-37) and soluble PD-1(SPD-1) in the peripheral blood of patients with rheumatoid arthritis (RA).Methods68RA cases treated in Yaan People's Hospital of Sichuan from January of2015to December of2016were selected into the case group, while the other68healthy cases over the corresponding period were selected into the control group. Enzyme Linked Immunosorbent Assay (ELISA) was used to detect the levels of cytokines including IL-37, Interleukin-1(IL-1), Interferon-γ (IFN-γ), tumor necrosis factor-α (TNF-α) and SPD-1in the peripheral blood of the two groups. The diagnosis of those RA patients were evaluated and scored. Then the analysis was made to explore whether the levels of IL-37and SPD-1were correlated with the RA diagnostic score and the levels of IL-1, IFN-γ and TNF-α respectively.ResultsThe levels of IL-37, SPD-1, IL-1, IFN-γ and TNF-α in the case group were significantly higher than those in the control group respectively (P<0.05). The levels of IL-37and SPD-1were positively correlated with the RA diagnostic score respectively in the case group (P<0.05). The levels of IL-37and SPD-1were positively correlated with the levels of IL-1, IFN-γ and TNF-α respectively in the case group (P<0.05).ConclusionThe levels of IL-37and SPD-1in the peripheral blood of patients with RA are correlated with the severity of RA and the other inflammatory factors, so the detection of IL-37and SPD-1has high application value in the clinical examination of RA.

Rheumatoid arthritis; Anti-inflammatory factor; Soluble PD-1; Inflammatory factor; Detective value

http://kns.cnki.net/kcms/detail/51.1705.R.20170829.1023.002.html

10.3969/j.issn.1674-2257.2017.04.027

R446.62

A