乙型肝炎病毒DNA定量檢測(cè)與臨床的關(guān)系

洪淑丹林佩飛

1.樂(lè)清市第二人民醫(yī)院 浙江溫州 325600；2.樂(lè)清市人民醫(yī)院 浙江溫州 325600

乙型肝炎病毒DNA定量檢測(cè)與臨床的關(guān)系

洪淑丹1林佩飛2

1.樂(lè)清市第二人民醫(yī)院 浙江溫州 325600；2.樂(lè)清市人民醫(yī)院 浙江溫州 325600

目的：探討乙型肝炎病毒DNA定量檢測(cè)與臨床的關(guān)系。方法：選取我院2014年8月至 2016年8月收治的64例乙型肝炎患者的作為研究對(duì)象，所選取的患者均通過(guò) ELISA（酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)）來(lái)檢測(cè)乙型肝炎的病毒血清標(biāo)志物，聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）來(lái)檢測(cè) HBV-DNA的含量。結(jié)果：HBcAb、HBeAg、HBsAg的 HBV-DNA的陽(yáng)性率為 96.6%，HBcAb、HBeAg、HBsAg為 14.3%，HBeAg、HBsAg為 100%，HBcAb、HBsAg為33.3%，HBeAb、HBcAb、HBsAb為 20%，HBcAb、HBeAb為 33.3%，HBsAb為12.5%。全陰的為0。結(jié)論：定量PCR可真實(shí)反映HBV感染、復(fù)制及病程變化，對(duì)乙型肝炎臨床診斷及治療均有較大的指導(dǎo)意義。

乙型肝炎病毒；DNA定量檢測(cè)；臨床關(guān)系

近年來(lái)隨著分子生物學(xué)技術(shù)的發(fā)展及其在臨床應(yīng)用方面的推廣，應(yīng)用實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)檢測(cè) HBV 病毒載量已成為目前臨床診斷 HBV 感染的常用指標(biāo)，進(jìn)一步提高了檢測(cè)的質(zhì)量【1】。同時(shí)采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）檢測(cè)乙型肝炎病毒 HBV標(biāo)志（HBV-M）簡(jiǎn)便易行，一直為許多臨床科室使用。臨床上有必要把此兩種方法的檢測(cè)結(jié)果聯(lián)合起來(lái)進(jìn)行分析，指導(dǎo)臨床應(yīng)用。為了探討乙型肝炎病毒 DNA的定量檢測(cè)和臨床的關(guān)系，選取我院2014年8月至 2016年8月收治的64例乙型肝炎患者的作為研究對(duì)象，所選取的患者均通過(guò) ELISA（酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)）來(lái)檢測(cè)乙型肝炎的病毒血清標(biāo)志物，聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）來(lái)檢測(cè) HBV-DNA的含量。現(xiàn)將大致研究結(jié)果報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料選取我院2014年8月至 2016年8月收治的64例乙型肝炎患者的作為研究對(duì)象，其中男36例，女28例，年齡在 13～75歲之間，平均（33.9±15.1）歲，所選取的患者都符合病毒性肝炎的診斷標(biāo)準(zhǔn)。且各類型的肝炎患者之間的資料沒(méi)有明顯的差異，結(jié)果具有可比性。

1.2 檢測(cè)的儀器和試劑 HBV血清檢測(cè)標(biāo)志物檢測(cè)試劑盒和HBV核酸擴(kuò)增熒光檢測(cè)試劑盒；熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）分析儀。

1.3 方法 在患者晨起空腹時(shí)抽取 5 ml靜脈血，將血清離心分裝在 -20℃下保存?zhèn)溆谩Ｈ缓笸ㄟ^(guò) ELISA（酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)）來(lái)檢測(cè)乙型肝炎的病毒血清標(biāo)志物，操作步驟按照試劑盒的規(guī)定進(jìn)行。臨床方法采集患者的肘靜脈血，采取實(shí)時(shí)熒光定量PCR方式對(duì)乙肝DNA進(jìn)行檢測(cè)。觀察對(duì)比熒光定量PCR方式對(duì)乙肝DNA檢測(cè)的準(zhǔn)確率。陰性的標(biāo)準(zhǔn)為熒光定量PCR在1×103拷貝數(shù)/ml以下；陽(yáng)性的標(biāo)準(zhǔn)為熒光定量PCR在1×103拷貝數(shù)/ml以上。對(duì)比觀察陰性與陽(yáng)性結(jié)果的差異，并且分析影響檢測(cè)結(jié)果的因素[2]。

1.4 觀測(cè)的指標(biāo) 觀測(cè)患者血清學(xué)的診斷指標(biāo)和 HBV-DNA的陽(yáng)性率以及定量檢測(cè)的結(jié)果情況；血清學(xué)的診斷分組：第一組為HBcAb、HBeAg、HBsAg，第二組為 HBcAb、HBeAg、HBsAg，第三組為HBeAg、HBsAg，第四組為HBcAb、HBsAg，第五組為HBeAb、HBcAb、HBsAb，第六組為HBcAb、HBeAb，第七組為 HBsAb以及全陰。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用 SPSS16.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，以P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的基礎(chǔ)。

2 結(jié)果

64例患者血清學(xué)的診斷指標(biāo)和 HBV-DNA的陽(yáng)性率以及定量檢測(cè)的結(jié)果情況，詳見(jiàn)表1。

表1 患者血清學(xué)的診斷指標(biāo)和HBV-DNA的陽(yáng)性率以及定量檢測(cè)的結(jié)果情況【n（%）】

第三組 H B e A g、H B s A g 4 4（1 0 0%） 7.7 9±0.6 1第四組 H B c A b、H B s A g 3 1（3 3.3%） 6.1 9±0.5 1第五組 H B e A b、H B c A b、H B s A b 5 1（2 0%） 3.4 9±0.5 2第六組 H B e A b、H B c A b 3 1（3 3.3%） 3.6 6±0.5 1第七組 H B s A b 8 1（1 2.5%） 3.1 1±0.3 3全陰 5 0 0

3 討論

乙型肝炎是嚴(yán)重威脅人類健康的、發(fā)病率很高的傳染病，對(duì)乙肝病毒（HBV）的研究雖然取得了很大進(jìn)展，但是目前仍然沒(méi)有非常有效的辦法，隨著HBV基因型概念的提出，乙肝的研究進(jìn)入了一個(gè)新的階段。HBV的基因型存在一定的地區(qū)分布特征，并可能與疾病的進(jìn)展有一定的關(guān)聯(lián)[3]。隨著分子生物技術(shù)的發(fā)展，病毒感染的臨床診斷技術(shù)已從定性檢測(cè)發(fā)展到定量檢測(cè)。從核酸雜交技術(shù)到定量PCR技術(shù)檢測(cè)HBVDNA，其靈敏度和特異性不斷提高，且在研究病毒感染量與臨床病毒的關(guān)系、評(píng)價(jià)和檢測(cè)抗病毒藥物療效等方面具有重要指導(dǎo)作用。我國(guó)現(xiàn)在屬于乙型肝炎大國(guó)，發(fā)病率在全世界排在前幾位。有研究表明，HBsAg的流行率大約為 9.75%，當(dāng)人體感染了乙型肝炎病毒之后會(huì)出現(xiàn)不同的癥狀以及臨床表現(xiàn)。HBeAg呈陽(yáng)性表示患者體內(nèi)的乙型肝炎病毒在活躍的復(fù)制，表明其具有很強(qiáng)的傳染性[4]。HBcAb、HBeAg、HBsAg的 HBV-DNA的陽(yáng)性率為96.6%，HBeAg、HBsAg為 100%，說(shuō)明本組患者的 HBeAg陽(yáng)性血清指標(biāo)的模式組主要為第一組和第三組，而且其 HBV-DNA的陽(yáng)性率以及 HBV-DNA的定量都比其他各組要高，說(shuō)明 HBeAg有可能與HBV-DNA的含量之間存在一定的正相關(guān)性[3]。HBcAb、HBeAg、HBsAg為 14.3%，HBV-DNA 的對(duì)數(shù)的平均值為（5.01±1.79），HBcAb、HBsAg為 33.3%，HBV-DNA 的對(duì)數(shù)的平均值為（6.19±0.51），說(shuō)明當(dāng) e系統(tǒng)的抗原陰轉(zhuǎn)時(shí)，HBV-DNA還是有可能被檢測(cè)到，雖然其含量比第一組和第三組低。HBeAb、HBcAb、HBsAb為33.3%，HBV-DNA 的對(duì)數(shù)的平均值為（3.66±0.51），說(shuō)明 HBsAb是一種保護(hù)性的抗體。

綜上所述，各種類型的乙型肝炎患者都有一定程度 HBV-DNA復(fù)制，HBeAg的陽(yáng)性患者其 HBV-DNA的水平最高，將 HBV-DNA和 HBeAg定量聯(lián)合進(jìn)行診斷，可以為早期的乙型肝炎篩查以及治療提供可靠的依據(jù)。

[1]李金明.乙型肝炎病毒血清標(biāo)志物測(cè)定及結(jié)果解釋的若干問(wèn)題.中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2006，29（5）：385.

[2]梅玉峰，黃敏，陳麗娟.HBV-DNA陽(yáng)性乙肝感染者血清學(xué)標(biāo)志物臨床分析[J].國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2010，31（9）：1004-1005.

[3]Sadakazu U，Hiroaki O，Hiroko I，et al.Serological detection of hepatitis B virus genotypes by ELISA with monoclonal antibodies to typespecific epitopes in the preS2-region product[J].J of Virol Methods，1999，80：97ˉ112.

[4]潘春燕.溶血對(duì)乙型肝炎病毒 DNA 定量檢測(cè)的影響.左江醫(yī)學(xué)，2008，36（1）：53.

R373.2

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1672-5018（2017）01-214-01