紫薯濟薯18號脫毒苗的芽誘導及快繁技術研究

鄭世英　耿建芬　賈海慧

摘要 為生產出紫薯脫毒苗，進行了紫薯濟薯18號脫毒苗的芽誘導及快繁技術研究。結果表明，濟薯18號莖尖分生組織最佳芽誘導培養基為MS+0.6 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA。在含有NAA的MS培養基中，當NAA濃度為1.0 mg/L時，莖的出芽和生根所需時間最短，培養28 d后葉片數和生根數也最多；但根長和株高在NAA濃度為0.1 mg/L時最高，說明NAA在較低濃度時促進根的生長。在6-BA濃度為0.1 mg/L時，株高最高，根最長；在6-BA濃度為1.0 mg/L時，脫毒苗的生根生芽時間最短，根數最多，葉片數也最多。

關鍵詞 紫薯；濟薯18號；脫毒苗；芽誘導；快繁技術

中圖分類號 S531 文獻標識碼 A 文章編號 1007-5739（2017）15-0024-01

紫薯[Ipomoea batatas（L.）Poir.]屬旋花科（Convolvulaceae）番薯屬，又叫黑薯，其薯肉呈紫色至深紫色[1]。紫薯除了含有普通紅薯的營養成分外，還富含硒元素和花青素等營養成分，及豐富的蛋白質、磷、鐵及VC、VB、VA等[2]。實際生產中，紫薯病毒病是影響產量和品質的主要因素之一[3]。通過組織培養繁育紫薯脫毒苗是目前防治紫薯病毒病的有效途徑之一[4]。本試驗通過不同培養基和植物生長調節劑對濟薯18號（山東省農業科學院作物所繁育）脫毒試管苗組培快繁進行研究，以期為濟薯18號脫毒苗的快繁生產提供理論依據。

1 材料與方法

1.1 供試材料

供試紫薯品種為濟薯18號，置于（30±2）℃溫室中培養。

1.2 試驗方法

1.2.1 培養基設計。MS培養基，pH值5.8～6.0，蔗糖含量3.0%，瓊脂0.7%，誘導培養基中6-BA設3個濃度即0.4、0.6、0.8 mg/L、NAA設3個濃度即0.1、0.2、0.3 mg/L，共組合成9種培養基。

1.2.2 外植體接種。取濟薯18號植株，去掉大部分葉片、葉柄后，先用0.1%洗衣粉液洗滌，再用蒸餾水清洗干凈，置于超凈工作臺上進行滅菌處理（先在75%酒精中浸泡30 s，再用0.1% HgCl2溶液消毒15～20 min，再用無菌水清洗干凈）。在超凈工作臺上將濟薯18號脫毒苗修剪成段，截成1 cm左右并且帶1～2個腋芽的小段，在設計好的培養基上進行接種。每瓶接種5個外植體，觀察其生長狀況。

1.2.3 培養條件。每處理接種9瓶、每瓶接種2株。置于28～30 ℃條件下，日光燈照射培養，光照11 h/d條件下培養[5-6]。

1.2.4 病毒檢測。每試管紫薯苗取2片葉，采用斑點酶聯免疫吸附測定法檢測試管苗是否攜帶病毒[7-9]。

2 結果與分析

2.1 不同培養基對脫毒苗的誘導

從表1可以看出，接種后的外植體經過12～20 d誘導，9種培養基上均可生長為體積比較大、質地致密的愈傷組織。所有培養基出愈率均為100%；除培養基M-6及M-9的出根率分別為25.0%和26.6%外，其余培養基的出根率均為100.0%。外植體在培養基M-1、M-2、M-4、M-5上可誘導出芽，其中培養基M-1、M-2出芽率均為100.0%，培養基M-4、M-5出芽率分別為33.3%和36.7%。外植體在培養基M-3、M-6、M-7、M-8、M-9上經過培養只能誘導出愈傷組織，不能誘導出芽。培養基M-1、M-2、M-4、M-5上誘導的外植體出芽平均時間分別為34、30、42、46 d。

2.2 脫毒苗的病毒檢測

經檢測，M-1、M-2、M-4、M-5培養基上誘導的紫薯苗脫毒率分別為100%、96%、95%和100%。

2.3 脫毒苗的快速繁殖

2.3.1 NAA對脫毒苗生長的影響。從表2可以看出，當NAA濃度為1.0 mg/L時，濟薯18號脫毒幼苗5.8 d產生根原基，9.2 d開始出芽，28 d后根長4.5 cm、新生根數8.6條、葉片數4.6片、平均株高6.0 cm。當NAA濃度為0.1 mg/L時，根和莖生長較快，出芽和生根時間相對比較長，說明較低濃度的NAA不利于生根和出芽。當NAA濃度大于1.0 mg/L時，隨著NAA濃度的不斷提高，出芽及生根時間延長，根長、葉片數及株高不斷降低，說明較高濃度NAA處理濟薯18號對根、芽、葉片數、株高等的形成是不利的。由此可以說明，0.5～1.0 mg/L NAA能促進濟薯18號脫毒試管苗的生長發育。

2.3.2 6-BA對脫毒苗生長的影響。從表3可以看出，不同濃度的6-BA對MS培養基中濟薯18號脫毒苗的出芽時間、生根時間、生根數、根長、葉片數和株高均有一定影響。當6-BA濃度為1.0 mg/L時，脫毒苗出芽只需7.6 d，生根需要4.7 d，單株根數4.6條，單株葉片數4.5片。6-BA濃度為0.1 mg/L時，根最長，達5.5 cm，株高生長最快，達5.2 cm。當6-BA濃度為2.5、3.0 mg/L時，抑制了根的形成，幼根數目為0，但對葉片影響較小。說明當6-BA濃度為0.1～1.0 mg/L時，更有利于濟薯18號脫毒苗根和芽的生長。

3 結論與討論

本試驗結果表明，濟薯18號莖尖分生組織最佳芽誘導培養基為MS+0.6 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA。在含有NAA的MS培養基中，當NAA濃度為1.0 mg/L時，莖的出芽和生根所需時間最短，培養28 d后葉片數和生根數也最多。但根長和株高在NAA濃度為0.1 mg/L時最高，說明NAA在較低濃度時促進根的生長。在6-BA濃度為0.1 mg/L時，株高最高，根最長；在6-BA濃度為1.0 mg/L時，脫毒苗的生根生芽時間最短，根數最多，葉片數也最多，說明較低濃度的6-BA有利于脫毒苗根和植株的生長。NAA和6-BA在根的數目和根的長度上NAA優于6-BA，在出芽和生根時間上6-BA較NAA快。

4 參考文獻

[1] 曹秀敏，張明，熊法亭，等.平薯3號脫毒苗組培快繁技術研究[J].陜西農業科學，2008（6）：19-20.

[2] 段玉云，王新良，金月嶸，等.紫甘薯京薯6號脫毒苗的誘導與快繁[J].西南農業學報，2011，24（2）：835-837.

[3] 張雄堅，房伯平，黃宏城，等.南方薯區甘薯脫毒苗生產體系研究[J].廣東農業科學，1999（1）：7-9.

[4] 張雅瓊，郭春華.甘薯莖尖分生組織培養研究進展[J].中國農學通報，2005，21（3）：74-76.

[5] 曲藝姣，周清，孫佳，等.美國紫薯試管苗微型繁殖的研究[J].黑龍江農業科學，2013（7）：10-12.

[6] 張清蘭，上官新晨，尹忠平，等.紫薯愈傷組織誘導和培養條件優化及綠原酸類化合物的積累[J].食品工業科技，2015（24）：169-174.

[7] 黃萍，馬朝宏，顏歉.甘薯試管苗留茬培養研究[J].西南農業學報，2009，22（4）：1191-1193.

[8] 劉明明，楊繼紅，劉蓁，等.紫薯組織培養初探[J].安徽農學通報，2009（17）：30-31.

[9] 譚德冠，莊南生，黃華孫.組織培養與秋水仙堿誘導相結合培育植物多倍體的應用（綜述）[J].亞熱帶植物科學，2005（1）：77-80.endprint