超聲輔助提取—HPLC—ICP—MS同時(shí)測(cè)定水產(chǎn)及其制品中3種形態(tài)汞的含量

喬 晴

何兵兵

王向軍

李 辰

劉軍紅

(河南出入境檢驗(yàn)檢疫局，河南 鄭州 450003)

超聲輔助提取—HPLC—ICP—MS同時(shí)測(cè)定水產(chǎn)及其制品中3種形態(tài)汞的含量

喬 晴

何兵兵

王向軍

李 辰

劉軍紅

(河南出入境檢驗(yàn)檢疫局，河南 鄭州 450003)

建立了采用超聲輔助提取，高效液相色譜-電感耦合等離子體質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)測(cè)定水產(chǎn)及其制品中汞形態(tài)分析的方法。在鹽酸+L-半胱氨酸體系下，對(duì)樣品進(jìn)行超聲輔助萃取，以10 mmol/L乙酸銨+0.10%L-半胱氨酸緩沖鹽與甲醇(體積比98∶2)組成流動(dòng)相，用高效液相色譜-電感耦合等離子體質(zhì)譜儀同時(shí)檢測(cè)無(wú)機(jī)汞、甲基汞和乙基汞的含量。無(wú)機(jī)汞、甲基汞和乙基汞的檢出限(3S/N)分別為0.18，0.09，0.15 ng/mL，標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程相關(guān)系數(shù)(R)均>0.999。以實(shí)際樣品對(duì)無(wú)機(jī)汞、甲基汞、乙基汞進(jìn)行加標(biāo)回收試驗(yàn)，回收率在78.5%～96.8%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)≤3.0%。經(jīng)對(duì)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)進(jìn)行檢測(cè)，測(cè)得值與標(biāo)準(zhǔn)值吻合。該方法準(zhǔn)確可靠、簡(jiǎn)單快速、精密度及準(zhǔn)確度結(jié)果理想，可用于實(shí)際水產(chǎn)及其制品中汞形態(tài)的分析。

無(wú)機(jī)汞；甲基汞；乙基汞；水產(chǎn)品；超聲輔助提取；高效液相色譜；電感耦合等離子體質(zhì)譜

汞俗稱水銀，是對(duì)人類和高等生物具有危害的有毒元素之一，揮發(fā)性強(qiáng)，熔點(diǎn)低，毒性較大。汞是在生態(tài)系統(tǒng)中能完善循環(huán)的唯一重金屬，汞及其化合物容易被生物體吸收，通過(guò)食物鏈(尤其是水生生物的食物鏈)富集并傳遞，最終導(dǎo)致水生動(dòng)物體內(nèi)汞濃度大大超出環(huán)境水體中的汞濃度。水產(chǎn)類膳食是人類攝入汞的主要途徑。不同形態(tài)的汞及其化合物都會(huì)威脅人類健康，造成人體免疫、神經(jīng)以及心血管等多系統(tǒng)損害，并且還有致癌作用。中國(guó)GB 2762—2012《食品中污染物限量》規(guī)定魚(yú)類中甲基汞限量為0.5 mg/kg，食肉魚(yú)類為1.0 mg/kg；日本規(guī)定水產(chǎn)品中甲基汞限量為0.3 mg/kg(不適用河川淡水魚(yú))[1]；美國(guó)規(guī)定魚(yú)類甲基汞限量為1.0 mg/kg(濕重)[2]。

目前汞的形態(tài)分析主要有GC—MS聯(lián)用法、HPLC—AFS聯(lián)用法、HPLC—UV聯(lián)用法、HPLC—ICP—MS聯(lián)用法等[3-5]。GC—MS聯(lián)用法檢測(cè)速度快靈敏度高，然而雜質(zhì)干擾多，前處理復(fù)雜；HPLC—UV聯(lián)用法選擇性差，基體干擾嚴(yán)重，靈敏度低，操作復(fù)雜，目前已很少使用；HPLC—AFS聯(lián)用法測(cè)定的靈敏度雖然能滿足檢測(cè)需求，但需要加入強(qiáng)氧化劑將有機(jī)汞氧化成無(wú)機(jī)汞，可能會(huì)出現(xiàn)反應(yīng)不充分，轉(zhuǎn)化率低的缺陷，實(shí)際應(yīng)用性差。而HPLC—ICP—MS聯(lián)用法可以獲得更低的檢出限和更好的靈敏度，選擇性強(qiáng)，已成為形態(tài)分析技術(shù)中的首選。

本試驗(yàn)依據(jù)GB 5009.17—2014《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中總汞及有機(jī)汞的測(cè)定》中第二篇食品中甲基汞的測(cè)定方法(液相色譜—原子熒光光譜聯(lián)用方法)，通過(guò)對(duì)超聲提取工藝的優(yōu)化，以及采用液相色譜與電感耦合等離子體質(zhì)譜聯(lián)用法，并對(duì)測(cè)定條件進(jìn)行優(yōu)化，旨在建立一套適用于同時(shí)分析水產(chǎn)及其制品中3種汞形態(tài)含量的方法。

1 材料與方法

1.1 儀器

電感耦合等離子體質(zhì)譜儀：ICP-MS 7900型，美國(guó)安捷倫公司；

高效液相色譜：HPLC 1200型，美國(guó)安捷倫公司；

霧化器：ICP-MS PFA型，美國(guó)安捷倫公司；

Zorbax Eclipse Plus C18：150 mm×4.6 mm，5 μm，美國(guó)安捷倫公司；

電子天平：XP205型，瑞士梅特勒-托利多公司；

高速冷凍離心機(jī)：Z300K型，德國(guó)哈默公司；

超聲波清洗機(jī)：KANG SHIJIE PL-J60型，0.45 μm濾膜，天津市津騰實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司；

超純水系統(tǒng)：Millipore型，法國(guó)密理博公司。

1.2 試劑與標(biāo)準(zhǔn)品

試驗(yàn)用水：符合GB/T 6682—2008規(guī)定的一級(jí)水，超純水系統(tǒng)制備；

乙酸銨：分析純，北京化工廠；

甲醇：色譜純，賽默飛世爾科技有限公司；

氫氧化鈉：優(yōu)級(jí)純，國(guó)藥化學(xué)試劑有限公司；

L-半胱氨酸鹽酸鹽：生化試劑，天津市致遠(yuǎn)化學(xué)試劑有限公司；

甲基汞標(biāo)準(zhǔn)溶液：GBW 08675，(63.6±2.4) μg/g，國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研究中心；

乙基汞標(biāo)準(zhǔn)溶液：GBW(E) 081524，(76.4±2.8) μg/g，國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研究中心；

無(wú)機(jī)汞標(biāo)準(zhǔn)溶液：GBW 08617，1 000 μg/mL，國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研究中心。

1.3 溶液的配制

1.3.1 鹽酸溶液(5 mol/L) 準(zhǔn)確量取41.66 mL鹽酸，用水稀釋定容至100 mL。

1.3.2 氫氧化鈉溶液(6 mol/L) 準(zhǔn)確量取24 g氫氧化鈉，溶于水并定容至100 mL。

1.3.3 氨水溶液(20 mL/100 mL) 準(zhǔn)確量取10 mL氨水，緩慢倒入50 mL水中，混勻。

1.3.4 提取溶液(5 mol/L鹽酸+0.10%L-半胱氨酸) 稱取0.1 gL-半胱氨酸,用水溶解，緩慢加入41.66 mL鹽酸，用水稀釋定容至100 mL。

1.3.5 流動(dòng)相 流動(dòng)相A(10 mmol/L 乙酸銨，0.10%L-半胱氨酸，pH=7.5)：稱取0.771 g乙酸銨和1 gL-半胱氨酸，用水溶解，加水稀釋定容至1 000 mL。用20 mL/100 mL氨水溶液調(diào)節(jié)pH至7.5，經(jīng)0.45 μm濾膜過(guò)濾，超聲脫氣30 min；流動(dòng)相B為甲醇。

1.3.6 甲基汞標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液(2 μg/mL) 準(zhǔn)確稱取0.786 2 g甲基汞標(biāo)準(zhǔn)溶液，用2%甲醇稀釋定容至25 mL。

1.3.7 乙基汞標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液(2 μg/mL) 準(zhǔn)確稱取0.654 5 g乙基汞標(biāo)準(zhǔn)溶液，用2%甲醇稀釋定容至25 mL。

1.3.8 無(wú)機(jī)汞標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液(2 μg/mL) 準(zhǔn)確稱取10 mL無(wú)機(jī)汞標(biāo)準(zhǔn)溶液，用5%鹽酸稀釋定容至100 mL，再分取2 mL用2 % 甲醇稀釋定容至100 mL。

1.3.9 混合標(biāo)準(zhǔn)使用液(50 ng/mL) 準(zhǔn)確移取甲基汞標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液、乙基汞標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液和無(wú)機(jī)汞標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液各0.625 mL，用2%甲醇稀釋定容至25 mL。使用時(shí)現(xiàn)配。

1.3.10 混合標(biāo)準(zhǔn)工作液 分別移取混合標(biāo)準(zhǔn)使用液0.0，0.1，0.2，0.4，1.0，2.0 mL于一組10 mL容量瓶中，用流動(dòng)相定容至刻度，得到甲基汞、乙基汞和無(wú)機(jī)汞的濃度分別0.0，0.5，1.0，2.0，5.0，10.0 ng/mL的混合標(biāo)準(zhǔn)工作液。

1.4 試驗(yàn)方法

1.4.1 樣品處理 取可食部分，用搗碎機(jī)打成勻漿，均分成2份作為試樣，分別裝入潔凈的容器內(nèi)，密封并標(biāo)記。于-18 ℃以下保存。

稱取樣品1 g(精確到0.001 g)，置于25 mL離心管中，加入10 mL提取溶液，放置過(guò)夜。在20 ℃、40 kHz、300 W下超聲萃取(超聲提取時(shí)溫度會(huì)升高，容易使無(wú)機(jī)汞揮發(fā)，所以選擇20 ℃下提取)1.5 h，期間振搖數(shù)次。于4 ℃下以4 500 r/min 離心30 min。移取4 mL上清液至25 mL刻度管中，逐滴緩慢加入氫氧化鈉溶液(6 mol/L)，調(diào)節(jié)pH至2～7，用水定容至10 mL，再用0.45 μm濾膜過(guò)濾，待測(cè)。同時(shí)作空白試驗(yàn)。

1.4.2 儀器條件 色譜柱：Agilent ZORBAX Eclipse Plus C18柱；流動(dòng)相：流動(dòng)相A(10 mmol/L 乙酸銨—0.10%L-半胱氨酸，pH 7.5)與流動(dòng)相B(甲醇)98∶2(體積比)；流速：1.0 mL/min；進(jìn)樣量：50 μL。儀器參考工作條件及參數(shù)見(jiàn)表1。

表1 ICP—MS工作條件

1.4.3 樣品測(cè)定 依次對(duì)混合標(biāo)準(zhǔn)溶液系列、空白溶液和試樣溶液進(jìn)行測(cè)定，以其標(biāo)準(zhǔn)溶液峰的保留時(shí)間定性，用標(biāo)準(zhǔn)工作曲線對(duì)試樣進(jìn)行定量。按上述步驟，對(duì)同一試樣進(jìn)行平行試驗(yàn)。

2 結(jié)果與討論

2.1 樣品前處理的選擇

有機(jī)汞化合物在生物樣品中容易與S牢固結(jié)合，利用有機(jī)溶劑破壞硫化物并轉(zhuǎn)變?yōu)辂u代烷基汞，是提取、分離有機(jī)汞最有效的方法之一[6-8]。常用的汞化合物的提取方法主要有堿消解提取、酸消解提取、固相微萃取、水蒸氣蒸餾和固相萃取等[9]。試驗(yàn)中比較了堿消解和酸消解的提取效果，發(fā)現(xiàn)堿消解提取所需時(shí)間較長(zhǎng)，并且在甲基汞含量較低時(shí)存在復(fù)雜的基體效應(yīng)。因此，試驗(yàn)中選用鹽酸+L-半胱氨酸作為水產(chǎn)及其制品樣品汞形態(tài)分析的提取劑。

2.1.1 鹽酸濃度 選取標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)SRM 2976貽貝[甲基汞(28.09±0.31) μg/kg]進(jìn)行測(cè)定，比較了不同濃度鹽酸的提取效果，結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 鹽酸濃度對(duì)提取效率的影響

由表2可知，鹽酸濃度越大提取效率越高，當(dāng)加入鹽酸濃度>5 mol/L時(shí)，提取率基本比較穩(wěn)定，但隨著鹽酸濃度增加，中和鹽酸需要的堿溶液過(guò)多，使樣品溶液中離子濃度過(guò)高，對(duì)ICP—MS檢測(cè)器有影響。因此，鹽酸提取的濃度選擇5 mol/L。

2.1.2L-半胱氨酸的濃度L-半胱氨酸中的S與Hg結(jié)合，可以形成金屬-半胱氨酸絡(luò)合物，在一定的酸度下，可將樣品中不同形態(tài)的汞提取出來(lái)。試驗(yàn)比較了在提取液中鹽酸濃度不變的情況下，分別加入不同量的L-半胱氨酸，使其含量分別為0.02%，0.05%，0.10%，0.15%，0.20%，通過(guò)對(duì)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)SRM 2976貽貝[甲基汞(28.09±0.31) μg/kg]中提取的甲基汞含量進(jìn)行上機(jī)測(cè)定，結(jié)果見(jiàn)表3。

由表3可知，0.10%的L-半胱氨酸對(duì)水產(chǎn)品及其制品樣品中甲基汞的提取效果最好。

表3 L-半胱氨酸濃度對(duì)提取效率的影響

2.1.3 超聲提取時(shí)間 選取標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)SRM 2976貽貝[甲基汞(28.09±0.31) μg/kg]，加入25 μg/kg的無(wú)機(jī)汞、甲基汞和乙基汞混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，在20 ℃下分別超聲提取0.5，1.0，1.5，2.0，3.0 h，期間振搖數(shù)次，測(cè)定無(wú)機(jī)汞、甲基汞和乙基汞的加標(biāo)回收率，結(jié)果見(jiàn)表4。

表4 不同超聲提取時(shí)間的加標(biāo)回收率

由表4可知，超聲提取1.5 h時(shí)，3種形態(tài)汞的加標(biāo)回收率已能夠滿足檢測(cè)要求。綜合考慮工作效率等因素，最終選擇超聲提取時(shí)間為1.5 h。

2.2 流動(dòng)相的選擇

2.2.1 乙酸銨濃度的影響 在流動(dòng)相中加入乙酸銨，可以穩(wěn)定流動(dòng)相的酸度，改善峰型和拖尾現(xiàn)象[10]。試驗(yàn)分別比較了不同濃度的乙酸銨對(duì)不同形態(tài)汞的分離效果。結(jié)果表明，隨著乙酸銨濃度的增加，儀器響應(yīng)值增加，各種形態(tài)汞的峰型有所改善，出峰時(shí)間縮短，拖尾逐漸有所改善。但當(dāng)乙酸銨濃度達(dá)到10 mmol/L以上時(shí)，各種汞形態(tài)的色譜峰拖尾不再有明顯改善，尤其是無(wú)機(jī)汞和甲基汞分離效果變差(見(jiàn)圖1)。故選擇乙酸銨的濃度為10 mmol/L。

2.2.2 絡(luò)合劑的影響 在用反相液相色譜分析無(wú)機(jī)汞、甲基汞和乙基汞時(shí)，加入適當(dāng)?shù)慕j(luò)合劑，使其和樣品中的各形態(tài)汞反應(yīng)，形成非極性絡(luò)合物，從而實(shí)現(xiàn)在C18柱上保留分離[11-13]。L-半胱氨酸無(wú)毒無(wú)害，親水性較強(qiáng)，絡(luò)合能力較弱，檢測(cè)時(shí)間短。通過(guò)比較不同濃度的L-半胱氨酸對(duì)汞形態(tài)的分離效果和峰形影響，結(jié)果表明，L-半胱氨酸的濃度對(duì)汞化合物的分離和保留有很大影響。當(dāng)不加入L-半胱氨酸時(shí)，不同形態(tài)的汞無(wú)法分離，譜圖上出現(xiàn)單峰，或者出峰時(shí)間過(guò)長(zhǎng)；隨著L-半胱氨酸的加入，3種形態(tài)汞的分離度明顯改善，拖尾現(xiàn)象減弱，靈敏度大大提高，見(jiàn)圖2。當(dāng)L-半胱氨酸濃度達(dá)到0.10%及其以上時(shí)，這3種形態(tài)汞的峰形、保留時(shí)間和靈敏度不再有明顯變化，且對(duì)色譜柱的損害較大。綜合考慮，選擇0.10%L-半胱氨酸作為流動(dòng)相中的絡(luò)合劑，需臨配現(xiàn)用。

圖1 不同濃度乙酸銨的色譜圖

圖2 不同濃度L-半胱氨酸的色譜圖

2.2.3 pH的影響 試驗(yàn)考察了流動(dòng)相的pH值(pH 4.0～8.0)對(duì)3種形態(tài)汞的分離度、保留時(shí)間、響應(yīng)值等的影響。結(jié)果表明：在試驗(yàn)范圍內(nèi)，當(dāng)pH較小時(shí)，色譜峰形較差；當(dāng)pH>6.0時(shí)，色譜峰形開(kāi)始有所改善，但隨著pH的增大，3種形態(tài)汞的分離度、保留時(shí)間變化不大。當(dāng)pH為7.5時(shí)，色譜峰形相對(duì)更對(duì)稱尖銳，見(jiàn)圖3。因此，最終選擇流動(dòng)相的pH為7.5。

2.2.4 甲醇濃度的影響 試驗(yàn)考察了流動(dòng)相中不同濃度的甲醇(2，5，8 mL/100 mL)對(duì)不同形態(tài)汞的保留時(shí)間和分離效果的影響，結(jié)果見(jiàn)圖4。

由圖4可知，隨著甲醇濃度的增加，會(huì)導(dǎo)致汞化合物分離效果逐漸變差，可能是ICP—MS的采樣錐和截取錐的錐口積碳，造成 ICP—MS的信號(hào)不穩(wěn)定。因此試驗(yàn)最終選用 2 mL/100 mL 的甲醇作為流動(dòng)相，能達(dá)到理想的分離效果。

圖3 不同pH值的色譜圖

圖4 不同濃度甲醇的色譜圖

2.3 分離效果

采用1.4試驗(yàn)條件測(cè)定5 ng/mL汞混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，無(wú)機(jī)汞、甲基汞、乙基汞的保留時(shí)間分別為1.751，2.501，5.201 min，色譜分離效果好，見(jiàn)圖5。

2.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線和檢出限

待儀器狀態(tài)穩(wěn)定后，使用調(diào)諧液對(duì)儀器雙電荷、靈敏度、氧化物、分辨率等指標(biāo)進(jìn)行調(diào)諧，達(dá)到最優(yōu)。以色譜峰面積為縱坐標(biāo)，標(biāo)準(zhǔn)溶液中3種形態(tài)汞的濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到線性回歸方程、相關(guān)系數(shù)及檢出限(3S/N)，結(jié)果見(jiàn)表5。

圖5 汞形態(tài)的色譜分離圖

汞化合物線性范圍/(ng·mL-1)線性方程相關(guān)系數(shù)檢出限/(ng·mL-1)無(wú)機(jī)汞0.5^10.0Y=56972X+4650.99990.18甲基汞0.5^10.0Y=55865X+1160.99990.09乙基汞0.5^10.0Y=52340X+1821.00000.15

2.5 回收率和精密度

選取三文魚(yú)肉樣品，根據(jù)GB 27404—2008《實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制規(guī)范 食品理化檢測(cè)》中方法確認(rèn)要求，進(jìn)行3個(gè)不同濃度水平的加標(biāo)回收率和精密度試驗(yàn)，結(jié)果見(jiàn)表6。

2.6 標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的驗(yàn)證

對(duì)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)SRM 2976貽貝[甲基汞(28.09±0.31) μg/kg]進(jìn)行測(cè)定，實(shí)際測(cè)定值27.82 μg/kg，RSD為1.66%，3種汞形態(tài)的色譜圖見(jiàn)圖6。

2.7 實(shí)際應(yīng)用

選取市售部分水產(chǎn)品及其制品，分別測(cè)定樣品中的無(wú)機(jī)汞、甲基汞及乙基汞的含量，同時(shí)在樣品中添加1 ng/mL濃度水平的無(wú)機(jī)汞、甲基汞及乙基汞混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，進(jìn)行加標(biāo)回收測(cè)定，結(jié)果見(jiàn)表7。

表6 加標(biāo)回收率和精密度結(jié)果?

? N.D.表示未檢出。

圖6 標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的色譜圖

由表7可知，所測(cè)水產(chǎn)及其制品中的汞主要以甲基汞的形態(tài)存在，乙基汞均未檢出，未經(jīng)加工過(guò)的冰鮮水產(chǎn)品中的甲基汞較高。依據(jù)中國(guó)GB 2762—2012的規(guī)定，魚(yú)類中甲基汞含量≤0.5 mg/kg，食肉魚(yú)類為≤ 1.0 mg/kg，本試驗(yàn)所測(cè)的水產(chǎn)品及其制品中甲基汞含量均未超標(biāo)。

3 結(jié)論

本試驗(yàn)建立了5 mol/L鹽酸+0.10%L-半胱氨酸超聲輔助萃取前處理，HPLC—ICP—MS聯(lián)用技術(shù)測(cè)定水產(chǎn)品中甲基汞、乙基汞和無(wú)機(jī)汞的方法。該方法簡(jiǎn)單快速，提取效率高，精密度及準(zhǔn)確度結(jié)果理想，克服了GB 5009.17—2014

表7 樣品分析結(jié)果?

? N.D.表示未檢出。

測(cè)定甲基汞方法實(shí)際應(yīng)用性差的缺點(diǎn)，可廣泛應(yīng)用于水產(chǎn)及其制品中汞形態(tài)的分析。但是由于甲基汞和無(wú)機(jī)汞化學(xué)性質(zhì)相似，如何使甲基汞和無(wú)機(jī)汞達(dá)到更加理想的分離效果，同時(shí)獲得更好的靈敏度，是汞形態(tài)分析技術(shù)下一步面對(duì)的最大問(wèn)題。

[1] 歐陽(yáng)珮珮, 黃誠(chéng), 丘福保. 高效液相色譜—電感耦合等離子體質(zhì)譜法同時(shí)測(cè)定水產(chǎn)品中的無(wú)機(jī)汞、甲基汞和乙基汞[J]. 中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志, 2016, 26(1): 50-53.

[2] 劉奇, 柯常亮, 陳潔文, 等. 水產(chǎn)品中甲基汞測(cè)定方法的優(yōu)化[J]. 食品工業(yè)科技, 2016(3): 299-302.

[3] 傅雄偉, 李海普, 楊遠(yuǎn), 等. 高效液相色譜與電感耦合等離子體質(zhì)譜聯(lián)用測(cè)定水中的二價(jià)汞、甲基汞與乙基汞[J]. 理化檢驗(yàn): 化學(xué)分冊(cè), 2016, 52(11): 1 277-1 281.

[4] 王征, 游飛明, 邱秀玉, 等. HPLC-ICP-MS 法測(cè)定水樣中的甲基汞、乙基汞和無(wú)機(jī)汞[J]. 福建分析測(cè)試, 2009, 18(1): 28-31.

[5] 黃先亮, 屠大偉, 朱永紅, 等. 食品安全元素形態(tài)分析聯(lián)用技術(shù)的應(yīng)用[J]. 中國(guó)調(diào)味品, 2014, 39(5): 134-140.

[6] 林少英, 程允杰, 區(qū)文凱, 等. 超聲萃取—冷蒸氣—原子熒光光譜法測(cè)定常見(jiàn)水產(chǎn)品中甲基汞[J]. 疾病監(jiān)測(cè)與控制, 2016, 10(11): 872-873.

[7] 童銀棟, 郭明, 張巍, 等. 甲苯二次萃取—直接測(cè)汞法快速測(cè)定海產(chǎn)品中的甲基汞[J]. 環(huán)境化學(xué), 2011, 30(4): 766-770.

[8] 孫瑾, 陳春英, 李玉鋒, 等. 超聲波輔助溶劑萃取—電感耦合等離子體質(zhì)譜法測(cè)定生物樣品中的總汞和甲基汞[J]. 光譜學(xué)與光譜分析, 2007, 27(1): 173-176.

[9] 呂蕾. 水產(chǎn)品中總汞和甲基汞、乙基汞的測(cè)定方法的建立[D]. 青島: 青島大學(xué), 2009: 8-12.

[10] 梅光明, 郭遠(yuǎn)明, 朱敬萍, 等. 高效液相色譜—原子熒光光譜法測(cè)定水產(chǎn)品中汞的形態(tài)[J]. 理化檢驗(yàn): 化學(xué)冊(cè), 2013, 49(7): 840-843.

[11] SARZANINI C, SACCHERO G, ACETO M, et al. Simultaneous determination of methyl-, ethyl-, phenyl-and inorganic mercury by cold vapour atomic absorption spectrometry with on-line chromatographic separation[J]. Journal of Chromatography A, 1992, 626(1): 151-157.

[12] FALTER R, SCHOLER H F. Interfacing high-performance liquid chromatography and cold-vapour atomic absorption spectrometry with on-line UV irradiation for the determination of organic mercury compounds[J]. Journal of Chromatography A, 1994, 675(1/2): 253-256.

[13] 梁立娜, 江桂斌. 高效液相色譜及其聯(lián)用技術(shù)在汞形態(tài)分析中的應(yīng)用[J]. 分析科學(xué)學(xué)報(bào), 2002, 18(4): 338-343.

Simultaneous determination of the content of the different mercury speciation in aquatic products by liquid chromatography-inductively coupled plasma mass spectrometry coupled with ultrasonic-assisted extraction

QIAOQing

HEBing-bing

WANGXiang-jun

LIChen

LIUJun-hong

(HenanEntry-ExitInspection&QuarantineBureauofP.C.R,Zhengzhou,Henan450003,China)

Ultrasonic assisted extraction coupled with high performance liquid chromatography-inductively coupled plasma mass spectrometry was developed for the determination of mercury speciation in aquatic products. Using ultrasonic assisted extraction for sample in HCl +L- cysteine system, with 10 mmol/L ammonium acetate +0.10%L- cysteine buffer and methanol (98∶2) system consisting of mobile phase, and detected the content of inorganic mercury and methyl mercury and ethyl mercury by high performance liquid chromatography- inductively coupled plasma mass spectrometry. The detection limits (3S/N) of inorganic mercury, methyl mercury and ethyl mercury were 0.18, 0.09, 0.15 ng/mL, respectively. The correlation coefficient (R) of the regression equation of the standard curve was above 0.999. Inorganic mercury and methyl mercury, ethyl mercury were spiked in actual samples, the rate of recovery was 78.5%～96.8%, the relative standard deviation (RSD)≤3.0%. The standard substance was detected by this method, and the measured value was consistent with the standard value. The method is accurate, reliable, simple, rapid and accurate. It can be applied to the analysis of mercury speciation in aquatic products.

Inorganic mercury; methyl mercury; ethyl mercury; aquatic product; ultrasonic-assisted extraction; HPLC; ICP-MS

河南省科技廳科技攻關(guān)項(xiàng)目(編號(hào)：162102310065)

喬晴(1983—)，女，河南出入境檢驗(yàn)檢疫局工程師，碩士。E-mail:89478260@qq.com

2017—05—11

10.13652/j.issn.1003-5788.2017.07.014