p-mTOR、p-4EBP1及p-S6K1在胃癌組織中的表達及意義

閆斌,于躍利,韓麗紅

1.包頭醫學院第一附屬醫院普外二科，內蒙古包頭 014010；2.包頭醫學院生物化學教研室，內蒙古包頭 014060

*論著*

p-mTOR、p-4EBP1及p-S6K1在胃癌組織中的表達及意義

閆斌1,于躍利1,韓麗紅2

1.包頭醫學院第一附屬醫院普外二科，內蒙古包頭 014010；2.包頭醫學院生物化學教研室，內蒙古包頭 014060

目的 探討磷酸化雷帕霉素靶蛋白 (p-mTOR)、p-4EBP1及p-S6K1蛋白的表達水平與胃癌常見臨床病理因素的關系。 方法 選擇2014年3月—2016年6月在包頭市腫瘤醫院行手術切除的60例胃癌患者為觀察組，對照組為癌旁組織(腫瘤邊緣5 cm處)胃組織40例。采用免疫組化的方法檢測60例胃癌組織及40例癌旁胃組織中p-mTOR、p-4EBP1及p-S6K1的表達情況。結果p-mTOR在觀察組和對照組的陽性率分別為36.7%和10.0%，p-4EBP1在觀察組和對照組的陽性率分別為80.0%和60.0%，p-S6K1在觀察組和對照組的陽性率分別為26.7%和10.0%。p-mTOR、p-4EBP1和p-S6K1在胃癌組織中的表達水平高于癌旁組織，差異有統計學意義（P＜0.05）。結論p-mTOR、p-4EBP1及p-S6K1在胃癌組織中過度表達可能是胃癌發生的重要機制之一。

胃癌；磷酸化雷帕霉素靶蛋白；4E結合蛋白1；磷酸化核糖體S6蛋白激酶1；免疫組織化學法

胃癌是來源于胃黏膜上皮的惡性腫瘤，胃癌是全球發病率第5位的惡性腫瘤，致死率僅次于肺癌、肝癌居第3位。胃癌的治療措施包括手術、化療、放療、內分泌治療及生物靶向治療等，其中手術結合化學藥物治療是胃癌治療的最佳方案。當今醫療技術水平的不斷提升，胃癌發生及發展相應分子生物學機制，日益成為臨床研究人員關注之重點，哺乳動物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）是近些年發現的蛋白質翻譯、核糖體合成及細胞內參當中一種十分重要的生物學行為[1]。該次研究通過選取 2014年 3月—2016年6月在包頭市腫瘤醫院診治的60例胃癌患者，就mTOR信號通路與胃癌組織相關性予以分析，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

觀察組為2014年3月—2016年6月在包頭市腫瘤醫院行手術切除的60例胃癌患者，于手術前均未采用化療及放療經歷，且均為首次手術，收集胃癌組織、癌旁組織(腫瘤邊緣4 cm處)；對照組為癌旁組織(腫瘤邊緣5 cm處)胃組織40例。取其組織，均防止于液氮罐內，實施冷凍保存。所選取觀察組胃癌患者中，男性患者為37例，女為23例，年齡39～75歲，平均年齡為48.8歲，病程1～5年，患者均經相關病理學診斷確診病癥類型。對照組患者男性患者為27例，女為13例，年齡42～71歲，平均年齡為45.6歲，病程1～5年。兩組患者性別、年齡、病程等一般資料差異無統計學意義（P＞0.05）。

1.2 方法

p-mTOR、p-4EBP1及p-S6K1蛋白的檢測方法采用免疫組化法：一抗p-mTOR(Bioworld Technology,BS4706)、P-S6K1(PR-1281P）、P-4EBP1(bs-3018R），一抗稀釋度分別為 1:100、1:100、1:50。二抗:HRP標記抗兔二抗。pmTOR、p-4EBP1和p-S6K1均以胞質中出現棕黃色顆粒為陽性，以0.01 mol/L PBS代替一抗作為陰性判斷標準。

1.3 統計方法

采用SPSS 19.0統計學軟件處理所得數據，彩用均數±標準差（±s）表示計量資料，t對其實施檢驗，采用直線相關分析兩因素的相關性，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

p-mTOR在觀察組和對照組的陽性率分別為36.7%和10.0%，p-4EBP1在觀察組和對照組的陽性率分別為80.0%和60.0%，p-S6K1在觀察組和對照組的陽性率分別為26.7%和10.0%。p-mTOR、p-4EBP1及p-S6K1在胃癌組織當中相應表達水平高于癌旁組織，差異有統計學意義（P＜0.05）。見表1。在胃癌中，p-mTOR、p-4EBP1及p-S6K1的染色陽性部分主要集中于胃癌細胞的胞漿部分，成棕色、彌漫性的分布于細胞胞漿當中，在對照組的胃癌旁組織中，染色的陽性部分主要集中于細胞胞漿，呈棕色如圖1、圖2、圖3）。

表1 p-mTOR、p-4EBP1及p-S6K1表達情況

圖1 p-mTOR在胃癌旁組織及胃癌組織中的表達

圖2 p-4EBP1在胃癌旁組織及胃癌組織中的表達

圖3 p-S6K1在胃癌旁組織及胃癌組織中的表達

3 討論

相關報道顯示[2-6]，mTOR信號通路與乳腺癌、胃癌、結腸癌、甲狀腺癌等多種惡性腫瘤的的發生、發展密切相關。當mTOR受到其通路方面的PTEN基因、上游生長因子受體等多因素的影響下，能夠對細胞凋亡產生抑制作用，對于腫瘤血管相應形成具有促進作用，并促進腫瘤侵襲轉移。mTOR在肝癌、胰腺癌、胃癌等[7-9]消化系腫瘤中亦存在高表達和活化，已成為胃癌治療的新靶點。

張剛等[10]采用免疫組織化學法及Westernblot方法檢測P-AKT及P-mTOR在胃癌(100例)、癌旁(80例)及胃組織正常黏膜(100例)中的表達水平，并分析其與常見病理學指標之間的關系，探討兩者之間的相關性。結果pmT0R在胃癌、癌旁及胃組織正常黏膜中的陽性表達均呈降低趨勢，與Westernblot結果一致。p-AKT在胃癌中的表達與腫瘤分化程度有關，p-mTOR在胃癌中的表達與淋巴結轉移有關。p-AKT及p-mTOR在同一例胃癌患者中表達呈顯著正相關。該次研究結果顯示p-mTOR在觀察組和對照組的陽性率分別為36.7%和10.0%，p-4EBP1在觀察組和對照組的陽性率分別為80.0%和60.0%，p-S6K1在觀察組和對照組的陽性率分別為26.7%和10.0%。pmTOR、p-4EBP1及p-S6K1在胃癌組織當中相應表達水平高于癌旁組織，差異有統計學意義（P＜0.05）。與該次的結果相似。伴隨mTOR信號通路在整個抗癌研究的廣泛應用，其通過抑制靶向，或將此信號相應傳導通路當中的某位點給予下調，則會對腫瘤發生及發展作用造成影響。

綜上所述，針對胃癌患者，mTOR信號通路在其組織當中特異性激活，而mTOR信號通路可能作用于胃癌的發生及發展。

（

）

[1]張丹丹，李慶林．PI3K／Akt／mT0R信號通路與腫瘤[J]．安徽醫藥，2012，16(3)：281-283．

[2]Li M,Sun H,Song L,et al.Immunohistochemical expression of mTOR negatively correlates with PTEN expression in gastric carcinoma[J].Oncol Lett,2012,4(6):1213-1218.

[3]Pande S，Brown G，Padmanabhan S，et a1．Oneogenic cooperation between PI3K／Akt signaling and transcription factor Runx2 promotes the invasive properties of metastatic breast cancer cells[J]．J Cell Physiol，2013，228(8)：1784-1792．

[4]Nemunaitis J,Hochster HS,Lustgarten S,et al.A phase I trial of oral ridaforolimus (AP23573;MK-8669)in combination with bevacizumab for patients with advanced cancers[J].Clin Oncol(R Coll Radiol),2013,25(6):336-342.

[5]Monsalves E，Jurasczhka K，Tateno T，et a1．The PI3K／AKT／mTOR pathway in the pathophysiology and treatment of pituitary adcnomas[J]．Endocr Relat Cancer，2014，21(4)：331-344．

[6]袁莉，賈莉．PI3K／AKT／PTEN通路與肺癌的關系[J]．齊齊哈爾醫學院學報，2013，34(18)：2657-2659．

[7]潘理會，張平，李春輝.PI3K/AKT/mTOR信號傳導通路在胃癌中的研究進展[J].承德醫學院學報，2016,33（4）：324-327.

[8]季冬梅,李進.靶向PI3K/Akt/mTOR通路在胃癌中的研究進展[J].腫瘤,2014(2):191-196.

[9]孫丹鳳,張燕捷,田筱青,等.哺乳動物雷帕霉素靶蛋白信號通路及其下游蛋白在胃癌組織中的活化及臨床意義[J].中華消化雜志,2013,33(3):166-170.

[10]張剛，郭劍，李杰,等.P13K／AKT／mTOR信號通路在胃癌組織中的表達及意義[J].廣東醫學,2016,37(9):1330-1332.

Expression and Significance of p-mTOR,p-4EBP1 and p-S6K1 in the Gastric Cancer Tissue

YAN Bin1,YU Yue-li1,HAN Li-hong2
1.Second Department of General Surgery,First Affiliated Hospital of Baotou Medical College,Baotou,Inner Mongolia, 014010 China；2.Biological and Chemistry Teaching and Research Room,Baotou，Inner Mongdia 014060 China

Objective To discuss the correlation between the expression level of p-mTOR,p-4EBP1 and p-S6K1 and common clinical pathological factors of gastric cancer.Methods 60 cases of patients with gastric cancer with operative incision in our hospital from March 2014 to June 2016 were selected as the observation group,and 40 cases of patients with paracancerous tissue gastric tissue(tumor marginal 5cm)were selected as the control group,and the expression of p-mTOR,p-4EBP1 and p-S6K1 was tested by the immunohistochemical method.Results The positive rate of p-mTOR,p-4EBP1 and p-S6K1 in the observation group and the control group was respectively 36.7%and 10.0%,80.0%and 60.0%and 26.7%and 10.0%,and the expression level of p-mTOR,p-4EBP1 and p-S6K1 in the gastric tissue was higher than that in the paracancerous tissue,andthe differences had statistical significance（P＜0.05）.Conclusion The overexpression of p-mTOR,p-4EBP1 and p-S6K1 in the gastric tissue may be one of the important mechanism of occurrence of gastric cancer.

Gastric cancer;p-mTOR;p-4EBP1;p-S6K1;Immunohistochemical method

R735

A doi 10.11966/j.issn.2095-994X.2017.03.01.01

2016-12-20；

2017-01-05

包頭市科技計劃項目（2015S2004-5-6)；內蒙古自治區高等學校科學研究項目（NJZY16204)；包頭醫學院博士啟動基金項目（BSJJ201605)。

閆斌（1978.11-），男，內蒙古包頭人，本科，副主任醫師，主要從事普外科疾病的診斷與治療工作。

韓麗紅（1979.9-），女，內蒙古赤峰人，博士，教授，主要從事腫瘤基因診斷研究工作，E-mail:ybacm@163.com。