高效液相色譜法測定氨咖黃敏膠囊中對乙酰氨基酚含量

張蕾

摘 要：本文采用高校液相測定了氨咖黃敏膠囊中對乙酰氨基酚的含量，固定相為：安捷倫Cl8（4.6mm×250mm，5um），乙腈-甲醇-0.025moL磷酸二氫鉀（磷酸調節至pH3.0）（5：10：85）為流動相，檢測波長為249nm，流速1.0mL·min-1，柱溫：30℃。對乙酰氨基酚在10～60μg·mL-1范圍內呈良好的線性關系。對乙酰氨基酚的平均回收率為99.3%，RSD為0.66%（n=6）；此方法簡便、準確、重現性好，可用于氨咖黃敏膠囊中對乙酰氨基酚的含量測定。

關鍵詞：氨咖黃敏膠囊；對乙酰氨基酚；含量

氨咖黃敏膠囊為常用感冒藥。氨咖黃敏膠囊為復方制劑，由對乙酰氨基酚、咖啡因、馬來酸氯苯那敏、人工牛黃、淀粉、糊精、糖粉組成。氨咖黃敏膠囊用于感冒引起的鼻塞、頭痛、咽喉痛、發熱等。對乙酰氨基酚是非那西丁在體內的代謝產生，其抑制中樞神經系統前列腺素合成的作用與阿司匹林相似，但抑制外周前列腺素合成作用弱，故解熱鎮痛作用強，抗風濕作用弱。本文采用高校液相測定了氨咖黃敏膠囊中對乙酰氨基酚的含量。

1 儀器與試藥

HH-601超級恒溫水浴（江蘇金壇市億通電子有限公司）；PH-620高精度實驗室酸度計（上海禾工科學儀器有限公司）；優普杜伯特UP-DBT-IV實驗室洗瓶機（西安優普儀器設備有限公司）；QTSXR10260數控型超聲波清洗器（天津市瑞普電子儀器公司）；PTX-FA110萬分之一天平（上海鑫倉電子科技有限公司）；屹譜儀器U-1810準雙光束紫外可見分光光度計（屹譜儀器制造（上海）有限公司）；Kertone實驗室超純水機（科爾頓（中國）有限公司）；LC3000高效液相色譜儀（山東滕州市滕海分析儀器有限公司）。對乙酰氨基酚對照品由中國藥品生物制品檢定所提供。乙腈（啟東市名成化工有限公司）、乙醇（南京維之誠化學試劑有限公司）、磷酸（武漢市偉琪博星生物科技有限公司）、甲醇（武漢市偉琪博星生物科技有限公司）、冰醋酸（濟南英出化工科技有限公司）、磷酸二氫鉀（啟東市名成化工有限公司）、三乙胺（南京維之誠化學試劑有限公司）。

2 含量測定

2.1 色譜條件：依據查閱文獻及考查的結果，確定色譜條件如下[1-5]。色譜柱為安捷倫Cl8規格為（4.6mm×250mm，5um）；乙腈-甲醇-0.025moL磷酸二氫鉀（磷酸調節至pH3.0）（5：10：85）為流動相；檢測波長為249nm。理論板數按對乙酰氨基酚峰計算應不得低于2000。

2.2 供試品溶液的制備

取氨咖黃敏膠囊內容物，精密稱取，加流動相超聲處理10分鐘，放冷，濾過，濾液置50ml量瓶中，用流動相分次洗滌容器和殘渣，洗液濾人同一量瓶中，加流動相至刻度，搖勻，濾過，取續濾液，即得。

2.3 對照品溶液的制備

精密稱取對乙酰氨基酚對照品約5mg，用流動相溶解并稀釋成每1ml中含30μg的溶液，作為對照溶液。

2.4 陰性溶液的制備

依照處方取咖啡因、馬來酸氯苯那敏、人工牛黃、淀粉、糊精、糖粉，按樣品制備工藝制成陰性對照樣品，照供試品溶液的制備方法制成陰性液，依上述方法測定，結果在對乙酰氨基酚出峰處陰性液無色譜峰，結果陰性試驗沒有干擾，表明本方法專屬性良好。

2.5 準曲線的制備

制備濃度為10、15、20、25、30、35、40、45、50、60μg·mL-1的對照品溶液，分別精密吸取10μL注入HPLC，記錄色譜圖。以峰面積積分值A（μg）為橫坐標，進樣量為縱坐標，繪制標準曲線，計算回歸方程。試驗表明，對乙酰氨基酚對照品在10～60μg·mL-1范圍內線性關系良好。

2.6 精密度試驗

依照2.3項下制備對照品溶液，精密吸取對乙酰氨基酚對照品溶液10μL重復進樣6次，測定峰面積積分值，對照品峰面積積分值的RSD為0.89%。結果表明，本實驗精密度良好。

2.7 重現性試驗

稱取同一批的氨咖黃敏膠囊樣品6份，按測定方法項下的方法制備供試品溶液，測定含量，并計算樣品的RSD值，結果RSD為0.83%，結果表明此方法的重現性良好。

2.8 穩定性試驗

依照2.2項下供試品制備方法制備供試品溶液，分別在0，2，4小時精密吸取供試品溶液注入液相色譜儀，進樣測定，供試品對乙酰氨基酚峰面積積分值的RSD為0.85%。結果表明對乙酰氨基酚至少在4小時內穩定。

2.9 回收率試驗

采用加樣回收試驗，取已知含量的同一批供試品各6份，精密稱定，分精密添加一定量的對乙酰氨基酚對照品，按供試品制備所述方法制備供試品溶液，測定含量（同時測定樣品含量），計算回收率。6次測定的平均回收率為99.3%，RSD為0.66%。

2.10 樣品含量測定

依照上述含量測定方法，測定氨咖黃敏膠囊三批樣品中對乙酰氨基酚的含量，含量為標示量的100.1%、100.3%、99.1%。

3討論

分別考察乙腈-甲醇-0.025moL磷酸二氫鉀（磷酸調節至pH3.0）（5：10：85），乙腈-0.05mol.L-1磷酸二氫鉀溶液（用磷酸調節pH值至3.0）（30∶70），乙腈-甲醇-0.025moL磷酸二氫鉀（磷酸調節至pH3.0）（10：10：80），乙腈-甲醇-0.025moL磷酸二氫鉀（磷酸調節至pH4.0）（10：10：80），乙腈-0.05mol·L-1磷酸二氫鉀緩沖液（含三乙胺0.5%，磷酸調pH至3.0）（20：80）不同比例的流動相，結果以乙腈-甲醇-0.025moL磷酸二氫鉀（磷酸調節至pH3.0）（5：10：85）為流動相，供試品各峰分離效果最好，故選用乙腈-甲醇-0.025moL磷酸二氫鉀（磷酸調節至pH3.0）（5：10：85）為流動相。此方法簡便、準確、重現性好，可用于氨咖黃敏膠囊中對乙酰氨基酚的含量測定。氨咖黃敏膠囊中對乙酰氨基酚的含量應為標示量的95-105%。

參考文獻

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