白玉+鄒海龍
前言
草莓是薔薇科草莓屬多年生草本植物。在世界小漿果生產中,草莓榮居首位。在草莓的葉片再生過程中,不同的激素種類及濃度配比控制著細胞的再分化方向和效果。為了篩選適宜的激素種類和濃度配比,本試驗以MS為基本培養基,以‘全明星、‘圖得拉、‘豐香3個草莓主栽品種為試材,以葉片為外植體,研究了植物組織培養過程中6-BA與TDZ對不定芽再生效率的影響。
1 試驗材料及方法
供試材料為MS培養基上生長健壯、大小一致的繼代試管苗,品種為‘全明星、‘圖得拉、‘豐香。選取生長4周左右的草莓試管苗葉片,剪成3至4mm寬的小條作為外植體。每瓶接6個外植體,每個處理4瓶,2次重復。培養溫度25℃,光照強度2000 Lux,光周期12 h/d 。以MS為基本培養基,蔗糖30g.L-1,瓊脂6.5g.L-1,Ph5.8,附加不同組合的激素制成的誘導再生培養基。
2 6-BA與NAA、IBA組合再生比較(表一)
將試材分別接入含6-BA(0.5、1.0、1.5、2.0、2.5)和NAA(0.2、0.4),IBA(0.2、0.4)的MS培養基中。當培養基中附加0.5 mg·L-1 6-BA時,最高再生頻率為16.83%,葉片再生出1.8個不定芽,可見草莓葉片對細胞分裂素非常敏感。培養基中6-BA濃度在0.5至2.0 mg·L-1的范圍內,草莓葉片的再生芽數隨著6-BA濃度的增加而增多,且再生頻率也隨著6-BA濃度增加而增加。生長素中IBA對草莓再生不定芽的效果要好于NAA,兩個濃度IBA再生效果接近。綜合看來,2.0 mg·L-1 BA與0.2 mg·L-1 IBA組合,再生效果均最好。
3 TDZ與NAA、IBA組合再生比較(表二)
自80年代以來,TDZ(噻重氮苯基脲)作為一活性較6-BA高得多的細胞分裂素,在草莓離體葉片誘導上已經開始得到廣泛的應用。本試驗置同上述6-BA系列激素組合,只是以TDZ代替6-BA作為培養基中細胞分裂素。隨著TDZ濃度的增加,再生頻率及再生芽數均有提高的趨勢;但隨著TDZ濃度都增加,玻璃化現象也開始嚴重;生長素中IBA對草莓再生不定芽都效果好于NAA,兩個濃度IBA都再生效果接近。當TDZ濃度為1.5 mg·L-1、IBA濃度為0.2 mg·L-1時,全明星草莓的再生率為90.58%,平均再生芽數為10.84,為最高;當TDZ濃度為1.5 mg·L-1、IBA濃度為0.4 mg·L-1,圖得拉的再生率為98.66%,平均再生芽數為10.15,豐香再生率為73.22%,平均再生芽數為5.36,均為最高;總體來看,1.5mg·L-1 TDZ與0.2 、0.4mg·L-1 IBA組合都效果最好。
4 結論(6-BA與TDZ對草莓葉片再生作用的比較)
實驗表明用TDZ代替6-BA能夠明顯提高再生不定芽的效率。當培養基中附加6-BA時,再生出芽呈單芽狀態,芽直立性好,培養40 d以后即可剪下直接成苗,成苗快;當培養基中附加TDZ時,再生出的芽呈叢生狀,直立性差。草莓葉片再生出的不定芽有不同程度的玻璃化現象,其中在附加TDZ的培養基上再生出的芽玻璃化程度較嚴重。
TDZ具有很強的細胞分裂素活性,對提高草莓葉片分化率有很大的促進作用,由于附加TDZ的培養基的葉片再生芽數比附加6-BA的培養基的再生芽數高得多,因此應選用TDZ代替6-BA。
作者單位:遼寧省阜新市農業廣播電視學校endprint