高效液相色譜串聯質譜儀檢測玉米中噻蟲嗪及噻蟲胺的殘留量

河南省農藥檢定站 王青霞 馬麗娜 郝小磊 呂穎賢 馬南方

高效液相色譜串聯質譜儀檢測玉米中噻蟲嗪及噻蟲胺的殘留量

河南省農藥檢定站 王青霞 馬麗娜 郝小磊 呂穎賢 馬南方

噻蟲嗪是一種全新結構的第2代煙堿類高效低毒殺蟲劑，對害蟲具有胃毒、觸殺及內吸活性，用于葉面噴霧及土壤灌根處理。其施藥后迅速被內吸，并傳導到植株各部位，對刺吸式害蟲如蚜蟲、飛虱、葉蟬、粉虱等有良好的防效。本文研究了玉米中噻蟲嗪及噻蟲胺的殘留量檢測方法，該方法簡單、快速、準確度和靈敏度高，符合殘留分析的要求。

一、試驗部分

（一）儀器與材料

1.儀器。1200液相色譜-6410三重四極桿質譜聯用儀，低速離心機，振蕩器，電子天平。

2.試劑。乙腈：色譜純。

3.標準品。噻蟲嗪純度99.0%，由沈陽化工研究院提供；噻蟲胺100 μg/mL，由農業部環境保護科研監測所提供。

（二）實驗步驟

1.提取。用50 mL的離心管稱取10g樣品加25 mL乙腈振蕩30 min，加入 3 gNaCl，震蕩 10 min后以3000轉/min離心3 min，最終取上清液乙腈相4 mL于燒杯中，濃縮1 mL于離心試管中。

2.凈化。將1 mL濃縮液加入0.2 gPSA和0.05 g石墨化碳黑渦旋，過0.22 μm有機系濾膜，待測。

（三）儀器條件

1.液相色譜條件

色譜柱：ZORBAX Eclipse Plus C18色譜柱（100 mm×3 mm，1.8 μm）。

柱溫：30 ℃。

流速：0.4 mL/ min。

進樣量：5 μL。

梯度洗脫條件見表1。

表1 梯度洗脫條件

2.質譜條件

離子源：電噴霧離子源ESI。

掃描方式：正離子源。

毛細管電壓：3.5 KV。

錐孔電壓：35 V。

離子源溫度：110 ℃。

脫溶劑溫度：450 ℃。

脫溶劑氣流量：600 L/h。

錐孔氣流量：90 L/h。

檢測方式：多重反應監測（MRM）見表2。

表2 多重反應監測（MRM）

二、結果與討論

（一）標準曲線

圖1 噻蟲嗪標準曲線

圖2 噻蟲胺標準曲線

將 10 μg/mL的噻蟲嗪、噻蟲胺標準溶液用乙腈稀釋配得0.01μg/mL、0.05 μg/mL、0.1 μg/mL、0.5 μg/mL、1 μg/mL 系 列標準溶液，在上述液相色譜/質譜條件下進行測定，以噻蟲嗪、噻蟲胺標準溶液濃度與監測離子峰面積作標準曲線。噻蟲嗪線性方程為：y=214 601x+3 377.1，相關系數為：r= 0.999；噻蟲胺線性方程為：y=157 094x+94.383，相關系數為：r= 0.999 9；其中，y為噻蟲嗪、噻蟲胺峰面積，x為標準溶液濃度見圖1和圖2。

（二）最低檢出量

噻蟲嗪、噻蟲胺的最低檢出量均為 2.0×10-3ng。

（三）最低檢測濃度

根據添加回收率實驗，在上述色譜條件下噻蟲嗪、噻蟲胺在玉米中的最低檢出濃度均為0.02 mg/kg。

（四）相對保留時間

噻蟲嗪保留時間約為2.2 min、噻蟲胺保留時間約為2.3 min。

（五）添加回收率與相對標準偏差

取對照區的玉米粒樣品，按上述方法做添加回收率試驗。添加濃度 為 0.02 mg/kg、0.04 mg/kg 和0.4mg/kg，每個濃度做5個平行試驗。試驗結果表明平均回收率在76.3%～112.0%，變異系數0.4%～1.7%，結果見表3和表4。

表3 玉米中噻蟲嗪的添加回收率和相對標準偏差

表4 玉米中噻蟲胺的添加回收率和相對標準偏差

（六）液相色譜條件優化

分別用乙腈加0.1%甲酸水、乙腈加0.2%甲酸水、甲醇加0.1%甲酸水、甲醇加0.2%甲酸水作為流動相。結果表明，以乙腈加0.1%甲酸水作為流動相時，噻蟲嗪和噻蟲胺均有較強的離子豐度，并且分離度高、對稱性好，因此本方法選用乙腈加0.1%甲酸水作為流動相。

（七）質譜條件優化

根據噻蟲嗪和噻蟲胺的分子量和結構分析，分別對兩種物質進行質譜參數優化，最終分別找到合適的錐孔電壓和碰撞電壓，編輯成兩種物質的方法，連接高效液相色譜儀，并設置梯度洗脫程序。結果表明，在1.3的分析條件下，噻蟲嗪和噻蟲胺均可得到離子豐度強、峰形良好的色譜峰。

三、實驗譜圖

試驗譜圖見圖3、圖4、圖5。

圖3 噻蟲嗪、噻蟲胺標樣

圖4 玉米添加

圖5 玉米空白

四、結論

進樣量均為5 μL。

本文對噻蟲嗪及噻蟲胺檢測的前處理、流動相條件及質譜條件進行優化，建立了利用高效液相色譜串聯質譜聯用儀檢測玉米中噻蟲嗪及噻蟲胺的殘留分析方法。該方法簡便、重現性好、靈敏度高，可以作為檢測玉米中噻蟲嗪及噻蟲胺殘留量較為理想的方法。