畜禽衣原體病垂直傳播阻斷技術示范應用

石瑜 朱雅寧 袁雪濤（天津市動物疫病預防控制中心300402）

畜禽衣原體病垂直傳播阻斷技術示范應用

石瑜 朱雅寧 袁雪濤（天津市動物疫病預防控制中心300402）

鑒于天津地區畜禽衣原體病已廣泛存在，給養殖業帶來巨大的經濟損失，為有效防控衣原體病的發生，我們引進新技術對衣原體從垂直傳播途徑上進行阻斷，從而降低發病率，減少死淘率。

衣原體病;藥物阻斷;示范應用

衣原體（Chlamydia）是感染人和多種畜禽的病原體,現已遍布世界各地,主要引起豬、牛流產和禽的產蛋下降,是一種接觸性傳染病。本研究采取藥物阻斷技術,阻斷種公畜禽精液衣原體傳播技術,從而有效防控衣原體病的發生,降低發病率,死淘率,取得良好的經濟效益。

引進中國農業大學提供的 “畜禽衣原體綜合防治技術與應用研究”項目中的衣原體垂直傳播阻斷技術在天津市進行技術轉化,為衣原體的防治提供新的技術途徑,對畜禽衣原體從垂直傳播途徑上進行阻斷,從而有效防控畜禽衣原體的發生,降低養殖業的經濟損失和公共衛生危害。

1 藥物阻斷技術

1.1 材料

1.1.1 樣品來源及種類

（1） 禽樣品

選取天津市3個區縣3個養殖場,每場采集100枚種蛋,阻斷技術應用前、后各采集一次,共計采集樣本600份,具體信息見表1。

表1 禽場采樣信息表

（2）豬、牛樣品

選取天津市5個區縣5個養殖場（其中豬場2個,牛場3個）,每場采集新生犢牛血清樣本50份、仔豬血清樣本100份,阻斷技術應用前、后各采集一次,共計采集樣本700份,具體信息見表2。

1.1.2 試劑

表2 豬、牛養殖場采樣信息表

衣原體間接血凝 (IHA)試驗試劑,由中國農業科學院蘭州獸醫研究所提供,抗原批號130524,稀釋液130524,陽性血清130403,陰性血清130524。

1.2 阻斷方法

1.2.1 雞胚藥物阻斷技術

（1） 藥物

鹽酸強力霉素和鹽酸環丙沙星原料藥：購自天津恒基利得科技發展有限公司,批號分別為20130603,20130518。

（2）藥物的配制

鹽酸強力霉素：稱取2mg強力霉素,加入2ml滅菌蒸餾水, 配成1mg/ml的原液 (即1000μg/ml)。

鹽酸環丙沙星注射液：稱取2.5mg,加入2.5ml蒸餾水,配成 lmg/ml的原液 (即1000μg/ml)。以上藥物均用0.22μm的針頭濾器過濾除菌,置于-20℃冰箱保存。

（3）接種劑量和方法

接種劑量分別為：鹽酸強力霉素：100.0μg/枚,鹽酸環丙沙星：100.0μg/枚,接種7～8d雞胚的卵黃囊腔,0.2ml胚（50ml卵黃液/枚）,石蠟封口,在37～38℃孵育。接種后每天進行燈檢,直到雞胚孵化,觀察雞胚發育特點和每100枚種蛋的孵化率以及健康雛雞的數量。

1.2.2 精液藥物阻斷技術

（1） 藥物

注射用乳糖酸紅霉素 (0.3g,30萬單位),購自哈藥集團制藥總廠,批號20130219。

（2）藥物的配制

乳糖酸紅霉素針劑的配制：加滅菌注射用水10ml至0.5g乳糖酸紅霉素粉針瓶,用力震搖至溶解。然后加生理鹽水稀釋,紅霉素濃度在1～5%以內。

（3）精液阻斷方法

精液加入生理鹽水進行1：1稀釋,每0.25ml精液加入0.25ml已配制好的藥物溶液,混勻后,分別對待配種的母畜進行人工授精。

1.3 檢測方法

間接血凝 (IHA)試驗,IHA凍干衣原體抗原、標準陽性和陰性血清均由蘭州獸醫研究所提供。

（1） 每孔加入75μl稀釋液。

（2）在第一孔加入25μl被檢血清,4倍遞增稀釋3孔（1：4～1：16）, 第3孔棄去25μl。 同一板上同時設陽性、 陰性和空白對照各2孔。

（3）每孔加入稀釋的抗原 25μl,37℃作用2h后判定結果。

判定標準：在對照孔成立的條件下,觀察各待檢血清孔,被檢血清1：16孔為++及以上凝集者為陽性,1：4孔為++及以下者為陰性。

2 示范應用

將藥物阻斷方法應用于全市3個種雞場、3個奶牛場和2個豬場,使用IHA方法對未應用藥物阻斷技術和應用藥物阻斷技術種蛋的孵化率和血清陽性率進行比較,結果顯示,應用該阻斷技術后種蛋的孵化率明顯提高,仔豬和犢牛的血清陽性率明顯降低,具體結果見表3和表4。

3 討論和結論

將藥物阻斷方法應用于天津市的8個畜禽養殖場,對未應用和應用該技術后衣原體病的檢測結果進行對比。結果顯示,3個示范禽場未應用藥物阻斷技術時種蛋的孵化率平均為92%,應用阻斷技術后種蛋的孵化率平均為95%,平均提高3%；5個家畜示范場應用該技術后,配種成功率明顯提高,懷孕母畜的流產率大大降低。此外,未應用藥物阻斷技術的仔畜的血清樣本抗體陽性檢出率為9.14%,應用該技術后的仔畜血清樣本抗體陽性率為6.57%,下降2.57%。仔豬和犢牛的血清抗體陽性率有明顯降低,健康狀況有效提高。

由于藥物阻斷技術對操作人員技術熟練程度要求較高,雞胚接種操作時會增加種蛋破損,造成一定的經濟損失；此外,如果連續進行藥物阻斷,衣原體產生的耐藥性可能會影響阻斷效果,雖然藥物阻斷在禽衣原體的垂直傳播上是安全有效的,綜合考慮其風險因素,不適合在種禽養殖場進行大面積推廣。

表3 種蛋的孵化率比較

表4 犢牛和仔豬血清陽性檢出率比較