血清高爾基體蛋白73聯(lián)合甲胎蛋白診斷原發(fā)性肝癌的臨床意義

張麗萍，周慧芳，米熱尼沙·熱米吐拉，劉 雯，許愛敏，李澤泳

（新疆喀什地區(qū)第一人民醫(yī)院檢驗科，新疆喀什844000）

血清高爾基體蛋白73聯(lián)合甲胎蛋白診斷原發(fā)性肝癌的臨床意義

張麗萍，周慧芳，米熱尼沙·熱米吐拉，劉 雯，許愛敏，李澤泳

（新疆喀什地區(qū)第一人民醫(yī)院檢驗科，新疆喀什844000）

目的：探討高爾基體蛋白73（GP73）聯(lián)合血清甲胎蛋白（AFP）診斷原發(fā)性肝癌的臨床價值．方法：回顧分析230例原發(fā)性肝癌組患者、208例良性肝臟疾病患者、178例健康對照者的血清AFP、GP73檢測結(jié)果，其中AFP測定采用電化學發(fā)光法，GP73測定采用酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）．結(jié)果：血清 AFP、GP73診斷原發(fā)性肝癌組的 ROC曲線下面積（AUC）分別為 0．787、0．903，血清 GP73 診斷原發(fā)性肝癌的AUC顯著高于血清AFP（P＜0．05）．血清甲胎蛋白診斷原發(fā)性肝癌的 cut?off值定為 187．7 μg／L，AFP 檢測的特異度為94．3%，敏感度為 77．4%．血清 GP73診斷原發(fā)性肝癌的 cut?off值定為 143．1 μg／L，GP73 檢測的特異度為 95．3%，敏感度為84．3%．PHC組GP73和AFP水平明顯高于良性肝臟疾病組和健康對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0．05）．良性肝臟疾病組的血清GP73和AFP水平明顯高于健康對照組（P＜0．05）．采用平行試驗對血清AFP、GP73指標進行聯(lián)合檢測診斷原發(fā)性肝癌組的敏感度為 94．7%（218／230），特異度為 92．6%（358／386）．聯(lián)合檢測診斷PHC組的敏感度明顯高于單獨檢測血清 AFP的敏感度（77．4%）和 GP73的敏感度（84．3%）（P＜0．05）；而聯(lián)合檢測的特異度與單獨檢測血清AFP的特異度（95．3%）和 GP73的特異度（94．3%）比較，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0．05）．結(jié)論：單獨檢測血清 AFP、GP73 作為診斷原發(fā)性肝癌的敏感度較低，當兩者聯(lián)合時可以明顯提高診斷靈敏度，從而有利于原發(fā)性肝癌組的診斷與鑒別診斷．

甲胎蛋白；高爾基體蛋白?73；原發(fā)性肝癌

0 引言

原發(fā)性肝癌（primary hepatic cancer，PHC）的特點為惡性程度高、進展快、預后差，是致死率高的主要原因．全世界每年約有25萬人死于肝癌，而我國占45%～60%［1］．傳統(tǒng)的血清甲胎蛋白（alpha?fetopro?tein，AFP）標志物應用廣泛，但敏感度（40%～66%）、特異性（75%～95%）均較低，容易造成誤診、漏診．已有研究表明，多重血清標志物聯(lián)合檢測能提高對PHC的早期診斷率，對臨床工作有重要意義．近年來，高爾基體蛋白（golgi protein，GP73）與AFP被認為是較為理想的肝癌血清標記物［2］．因此有必要深入細致的探討血清AFP聯(lián)合GP73診斷原發(fā)性肝癌的臨床應用價值．

1 資料和方法

1．1 一般資料 選取 2014－09／2015－06 新疆喀什地區(qū)第一人民醫(yī)院178例健康對照者、208例良性肝臟疾病患者、230例原發(fā)性肝癌患者作為研究對象．178例健康對照者均經(jīng)體檢科確診，208例良性肝臟疾病患者包括早中期肝硬化102例、慢性活動性肝炎66例、其他良性肝病40例．所有原發(fā)性肝癌患者均經(jīng)病理檢查確診．各組研究對象年齡、性別等比較，差異均無統(tǒng)計學意義（P＞0．05，表 1），具有可比性．

表1 一般資料比較

1．2 研究方法 按照血清收集標準對本研究對象進行血液采集，待檢測患者在治療前空腹采集靜脈血3 mL，離心后分離血清待測定．GP73檢測采用ELISA方法，試劑盒由北京熱景生物科技有限公司提供，按照試劑盒說明書嚴格進行操作．AFP檢測采用化學發(fā)光方法，使用羅氏公司生產(chǎn)的e601型發(fā)光免疫分析儀和配套試劑，統(tǒng)一檢測．

1．3 統(tǒng)計學處理 采用SPSS20．0統(tǒng)計學軟件對數(shù)據(jù)進行分析，先進行數(shù)據(jù)的正態(tài)性檢驗，方差齊性檢驗．AUC比較采用Z檢驗，診斷價值采用ROC曲線分析．組間診斷方法之間靈敏度、特異度的比較采用配對χ2檢驗．P＜0．05為差異有統(tǒng)計學意義．

2 結(jié)果

2．1 血清AFP、GP73診斷PHC組的 ROC曲線及臨床意義分析 繪制 ROC曲線，得到血清 AFP、GP73 診斷原發(fā)性肝癌組的 AUC 分別為0．787、0．903．血清GP73診斷原發(fā)性肝癌組的AUC顯著高于血清AFP（P＜0．05，圖 1）．從 ROC 曲線可看出，血清 GP73診斷 PHC 組的合適 cut?off值定為 143．1 μg／L，其對應的靈敏度為84．3%，特異度為95．3%．血清AFP診斷原發(fā)性肝癌組的最佳 cut?off值為 187．7 μg／L，其對應的靈敏度為 77．4%，特異度為 94．3%（表 2）．

圖1 血清AFP、GP73診斷PHC組的ROC曲線

表2 血清AFP、GP73診斷原發(fā)性肝癌組的臨床價值分析

2．2 三組研究對象血清AFP、GP73檢測結(jié)果比較

PHC組GP73和AFP水平明顯高于良性肝臟疾病組和健康對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0．05）．良性肝臟疾病組的血清GP73和AFP水平明顯高于健康對照組（P＜0．05，表 3）．

表3 研究對象血清AFP、GP73檢測結(jié)果比較 （±s）

表3 研究對象血清AFP、GP73檢測結(jié)果比較 （±s）

aP＜0．05 vs健康對照組；cP＜0．05 vs良性肝臟疾病組．

組別 n AFP（μg／L） GP73（μg／L）健康對照組 178 9．5±4．4 23．9±13．6良性肝臟疾病組 208 104．5±49．0a 63．2±39．5a原發(fā)性肝癌組 230 337．1±105．3ac 280．7±65．2ac

2．3 血清AFP聯(lián)合GP73診斷原發(fā)性肝癌組的臨床價值分析 采用平行試驗對血清AFP、GP73指標進行聯(lián)合檢測診斷原發(fā)性肝癌組的敏感度為94．7%（218／230），特異度為 92．6%（358／386）。 聯(lián)合檢測診斷PHC組的敏感度明顯高于單獨檢測血清AFP的敏感度（77．4%）和 GP73 的敏感度（84．3%）（P＜0．05）；而聯(lián)合檢測的特異度與單獨檢測血清AFP的特異度（95．3%）和 GP73 的特異度（94．3%）比較，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0．05）．

3 討論

AFP是診斷原發(fā)性肝癌的重要腫瘤標志物，廣泛用于原發(fā)性肝癌的診斷，并且起到監(jiān)測療效判斷及預測復發(fā)等作用，是原發(fā)性肝癌的重要篩查指標．在生理情況下，AFP主要來自正在發(fā)育的肝細胞或腫瘤原始細胞．也可見于孕婦，胎兒出生約兩周后甲胎蛋白從血液中消失．在病理情況下，血清AFP升高則主要見于肝炎、肝炎后肝硬化、胚胎瘤疾病，以及原發(fā)性肝癌組等惡性疾病［3］．但有10%～20%的原發(fā)性肝癌組患者AFP呈陰性［4］，單靠AFP指標的檢查將增加早期原發(fā)性肝癌的漏診率．

GP73是一種域型跨膜糖蛋白，含400個氨基酸．肝癌組織中GP73顯著高于對應的癌旁組織及正常肝組織．在肝癌患者血清中，GP73水平顯著升高．將GP73作為一種新的血清肝癌標記物的原因可能與肝癌患者肝細胞損傷有關(guān)或是與GP73維持高爾基體結(jié)構(gòu)完整性有關(guān)［5－6］．研究［7－8］表明，原發(fā)性肝癌組的血清中GP73水平明顯升高，而正常人肝細胞中表達很少甚至不表達．目前研究均認為，GP73對于PHC患者診斷及鑒別具有重要意義．

本研究結(jié)果顯示，高爾基體蛋白73在PHC患者中明顯升高．基于本研究的情況，原發(fā)性肝癌組與肝硬化、肝炎及健康對照組的血清AFP和GP73比較，差異均有統(tǒng)計學意義，證明血清GP73對原發(fā)性肝癌患者的診斷是較好的標志物［9－11］．近些年來的研究發(fā)現(xiàn)，多種腫瘤標志物與AFP聯(lián)合檢測可相互彌補單一檢測的不足，從而提高PHC的診斷效能．GP73與AFP聯(lián)合檢查可作為肝臟疾病的檢測指標，尤其可以減少 PHC 的漏檢［12－15］．聯(lián)合檢測對 PHC 診斷的敏感性高于單項檢測率，且準確性高，而特異性可維持在較高水平．GP73對鑒別無臨床癥狀AFP陰性的PHC的診斷有較高的臨床價值．GP73聯(lián)合AFP檢測可明顯提高PHC的診斷率，具有較好的臨床應用價值．

［1］劉愛霞，劉 佳，戴 亮，等．高爾基體蛋白73在原發(fā)性肝癌預后判斷中的應用價值［J］．中華實驗和臨床病毒學雜志，2014，28（5）：464－466．

［2］周偉東，孫傳東，吳力群，等．肝臟局灶性結(jié)節(jié)性增生與甲胎蛋白陰性肝細胞肝癌的CT及組織學鑒別［J］．臨床外科雜志，2012，20（4）：254－256．

［3］施純朝，薛 峰，孫延富，等．乙型肝炎肝硬化并發(fā)原發(fā)性肝癌的危險因素［J］．實用癌癥雜志，2013，28（4）：399－401．

［4］李玉柱，張玉敏．血清鐵蛋白、甲胎蛋白和甲胎蛋白異質(zhì)體聯(lián)合檢測對原發(fā)性肝癌診斷的臨床意義［J］．腫瘤研究與臨床，2014，26（7）：465－469，472．

［5］謝明水，劉 楊，陳丹丹，等．甲胎蛋白異質(zhì)體3、高爾基體蛋白73、磷脂酰肌醇蛋白聚糖3在原發(fā)性肝癌診斷中的價值［J］．腫瘤研究與臨床，2013，25（11）：730－732．

［6］趙 巖，李 勇，胡寶山，等．高爾基體蛋白73在肝細胞癌診斷及預測疾病進展中的作用［J］．中華醫(yī)學雜志，2014，94（5）：390－392．

［7］Bachert C，F(xiàn)immel G，Linstedt AD．Endosomal trafficking and prop?rotein convertase cleavage of cis Golgi protein GP73 produces marker for hepatocellular carcinoma［J］．Traffic，2007，8（10）：1415－1423．

［8］袁明生，唐富英，王 影．高爾基體蛋白73診斷原發(fā)性肝癌的臨床評價［J］．中國實驗診斷學，2013，17（5）：844－846．

［9］張麗坤，崔健嬌．血清PCT與hs?CRP聯(lián)合檢測診斷老年下呼吸道細菌性感染的臨床價值［J］．中國老年學雜志，2012，32（16）：3445－3446．

［10］Tan LY ．Correlation between GP73 protein and human liver disease［J］．Zhonghua Gan Zang Bing Za Zhi，2007，15（12）：958－959．

［11］李明岳，劉嘉林，鄭錦鋒，等．原發(fā)性肝癌患者手術(shù)治療后生存狀況的影響因素分析［J］．實用癌癥雜志，2014，29（7）：802－804．

［12］李利軍，李新豐，王高雄．GP73聯(lián)合 AFP、VEGF檢測對原發(fā)性肝癌的診斷價值［J］．世界華人消化雜志，2009，17（29）：3056－3060．

［13］葉佩靈．GP73水平在原發(fā)性肝癌中的意義［D］．廣州：廣州醫(yī)科大學，2014．

［14］寧 珠，殷 芳，劉 海，等．血清 AFP、CEA、AFU、GGT?II聯(lián)合檢測診斷原發(fā)性肝癌的臨床價值［J］．中國醫(yī)藥導報，2013，10（2）：73－75．

［15］Jemal A， Bray F， Center MM， et al．Global cancer statistics［J］．CA Cancer J Clin，2011，61（2）：69－90．

Clinical value of serum Golgi protein 73 com?bined with alpha?fetoprotein in the diagnosis of primary hepatic carcinoma

ZHANG Li?Ping， ZHOU Hui?Fang， Mi ren ni sha·ren mi tu lai，LIU Wen， XU Ai?Min， LI Ze?Yong
Department of Laboratory Medicine，F(xiàn)irst People's Hospital of Kashgar Prefecture， Kashgar 844000， China

AIM： To investigate the clinical value of Golgi protein 73 （GP73） combined with alpha?fetoprotein （AFP） in the diagnosis of primary hepatic carcinoma（PHC）．METHODS：The levels of serum AFP and GP73 in 230 cases of PHC，208 cases of benign hepatic diseases and 178 cases of healthy control were analyzed retrospectively．Level of AFP was determined by electrochemiluminescence，while level of GP73 was detected by enzyme?linked immunosorbent assay（ELISA）．RESULTS： The area under the ROC curve（AUC） of serum AFP and GP73 were 0．787 and 0．903 in the diagnosis of PHC respectively， in which the AUC of serum GP73 was significantly higher than that of serum AFP （P＜0．05）．The cut?off value of AFP in the diagnosis of PHC was 187．7 μg／L， specificity was 94．3%and sensitivity was 77．4%．The cut?off value of GP73 in the diagnosis of PHC was 143．1 μg／L， specificity was 95．3%and sensitivity was 84．3%．The levels of serum AFP and GP73 in control group were significantly higher than those of benign hepatic disease group and healthy controls， with statistically significant differences（P＜0．05）．The levels of serum AFP and GP73 in benign hepatic disease group were significantly higher than those of healthy controls， with statistically significant differences（P＜0．05）．The level of AFP combined with GP73 in the diagnosis of PHC was analyzed by parallel test．The sensitivity was 94．7%（218／230）and specificity was 92．6% （358／386）．The sensitivity of AFP combined with GP73 in the diagnosis of PHC was obviously higher than sensitivity of isolated AFP（77．4%） or sensitivity of GP73（84．3%）（P＜0．05）．There was no statistically significant differ?ence between specificity through combined detection and specificity through single detection of AFP （95．3%） or GP73（94．3%）（P＞0．05）．CONCLUSION： The sensitivity of serum AFP or GP73 detection alone was lower in the diagnosis of PHC，while the combined detection of both AFP and GP73 could increase the diagnostic sensitivity，which is beneficial to the diagnosis and antidiastole of PHC．

alpha?fetoprotein； golgi protein 73； primary hepatic carcinoma

R735．7

A

2095?6894（2017）09?36?03

2016－12－28；接受日期：2017－01－15

新疆自治區(qū)自然科學基金（2016D01C024）

張麗萍．主任技師．E?mail：12487124961＠ qq．com

許愛敏．E?mail：51920269＠ qq．com

李澤泳（共同通訊作者）．副主任技師．E?mail：sunnar78＠ 126．com