大球蓋菇菌種及培養基的篩選

程遠

(五常市寶龍店種子林場，黑龍江 哈爾濱 150200)

大球蓋菇菌種及培養基的篩選

程遠

(五常市寶龍店種子林場，黑龍江 哈爾濱 150200)

通過實驗室現有的5種大球蓋菇(Strophariarugoso-annulata)菌種在PDA培養基上的生長速度及生長勢的比較分析試驗，結果表明：3號菌種(培養基配方為：馬鈴薯200 g，蔗糖20 g，瓊脂20 g，水1 000 mL，蛋白胨3 g，酵母膏2 g，KH2PO43 g，MgSO42 g)生長速度最快，且菌絲濃白、粗壯，所以3號菌種為實驗室現有最優菌株。進一步比較最優菌株的菌落形態、菌絲的顏色和密度以及菌絲長勢，得出最優培養基配方為：馬鈴薯200 g·L-1，蔗糖20 g·L-1，蛋白胨2 g·L-1，酵母膏1 g·L-1，玉米粉10 g·L-1，維生素B 1片·L-1，稻草15 g·L-1。

大球蓋菇；菌種；培養基

AbstractThe growth rate & growth potential of five kinds ofStrophariarugoso-annulatastrains on the PDA medium were analyzed.Result shows that the growth rate of No. 3 strain(the medium is : potato 200 g, sucrose 20 g, agar 20 g, water 1 000 mL, peptone 3 g, yeast extract 2 g, KH2PO43 g, MgSO42 g is fastest, and hyphae are thick,white and stout, so No. 3 strain for the laboratory is the optimum.The colony morphology, mycelial color and density, and mycelial growth were compared.The optimum culture medium is as follows: potato 200 g ·L-1, sucrose 20 g ·L-1, peptone 2 g ·L-1, yeast extract 1 g·L-1, corn flour 10 g·L-1, vitamin B1 tablets·L-1, straw 15 g ·L-1.

KeywordsStrophariarugoso-annulata; strain;culture medium

大球蓋菇(Strophariarugoso-annulata)，又名皺環蓋菇，隸屬于擔子菌門(Basidomycota)，層菌綱(Hymenomycetes) ,傘菌目(Agaricales)，球蓋菇科(Strophariaceae)，球蓋菇屬(Stropharia)[1]，是國際菇類交易市場上的十大菇類之一，也是聯合國糧農組織向發展中國家推薦栽培的食用菌之一[2,3]。在我國，野生大球蓋菇多產于云南、四川、西藏、吉林等地。

單個的大球蓋菇菇團可達數公斤重，具有近半球形的菌蓋，濕潤時表面微黏。初期子實體呈白色，隨著子實體逐漸長大其顏色會逐漸加深至灰褐色，菌肉白且肥厚，圓柱形菌柄長5～20 cm，柄粗0.5～4 cm[4,5]。大球蓋菇可生于林中、草地、路旁、園地、垃圾場或牧場的牛馬糞堆上等處。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

試驗所用大球蓋菇菌種。

1.2 試驗方法

1.2.1 菌種篩選 采用常規方法制備PDA培養基1 000 mL，分裝制成PDA平面培養基，接入直徑為3 mm且菌齡一致的5種菌種，每個菌種接種3個平板。

1.2.2 母種培養基篩選 將篩選出的大球蓋菇優質菌株接種到不同配方制備的培養基中，進行25 ℃黑暗恒溫培養。在培養過程中定時對大球蓋菇菌絲的生長密度、菌絲色澤、菌絲生長勢等生長狀況進行觀察評估，通過菌絲的生長指標篩選出最佳配方。

根據查閱大量文獻以及實驗室原有的實驗成果，擬定如下5個母種培養基配方，并按照如下配方使用常規培養基配制方法配制培養基，經高溫高壓濕熱滅菌(121 ℃，20 min)后制成斜面或平板培養基。培養基配方如下：

(1)PSA培養基：馬鈴薯200 g，蔗糖20 g，瓊脂20 g，水1 000 mL。

(2)PSA培養基：馬鈴薯200 g，蔗糖20 g，瓊脂20 g，水1 000 mL，蛋白胨3 g，酵母膏2 g。

(3)馬鈴薯200 g，蔗糖20 g，瓊脂20 g，水1 000 mL，蛋白胨3 g，酵母膏2 g，KH2PO43 g，MgSO42 g。

(4)馬鈴薯200 g，蔗糖20 g，瓊脂20 g，水1 000 mL，蛋白胨3 g，酵母膏2 g，KH2PO43 g，MgSO42 g，玉米粉10 g。

(5)馬鈴薯200 g，蔗糖20 g，蛋白胨2 g，酵母膏1 g，玉米粉10 g，維生素B 1片，稻草15 g，水1 000 mL。

1.2.3 不同培養基上生長情況測試 利用孔徑為3mm的打孔器在培養皿內旺盛生長的供試菌種的同一半徑上打孔，將菌絲塊隨機地轉接到培養皿和試管斜面，恒溫培養(25 ℃)，每兩天定時測量菌落中心垂直的一組直徑，并求得其平均值作為菌落直徑。同時每天定時觀察記錄菌絲的密度、菌絲粗壯程度、菌絲色澤以及菌絲生長勢等菌絲生長指標。

2 結果與分析

2.1 菌種篩選

表1不同菌種在PDA培養基中生長速度及菌絲生長勢的比較

菌種編號菌落生長速度/mm·d-1重復1重復2重復3平均生長速度/mm·d-1菌絲長勢評價13．513．533．483．47++23．563．583．533．56++33．673．63．73．67+++43．513．553．53．52++53．473．493．453．47+++

表2 不同菌種在PDA培養基中生長速度方差分析

由表1中對菌絲生長勢的評價可知，在PDA培養基上生長勢最好的3號菌種和5號菌種。同時，由表2方差分析結果得出，1號菌種與5號菌種之間sig.=0.986，差異不顯著；而4號菌種與2號菌種之間sig.=0.55，差異亦不明顯；但3號菌種與其他各組之間都存在顯著差異。由此可知，在生長速度上，各組菌種存在差異，其中3號菌種菌絲生長速度最快。結合以上兩點得出，根據在PDA培養基上菌絲生長速度及長勢的評價可以篩選出最優菌種為3號菌種。

2.2 培養基的篩選

如表3，④、⑤號菌絲生命力明顯強于其他組，菌絲雪白，能形成密度大且邊緣整齊的菌落；②、③菌落邊緣不整齊，此外密度和色澤也略差；①號菌絲細弱，顏色灰白，且隨著培養時間延長菌絲會形成索狀菌絲。大球蓋菇菌絲在以上5種培養基中的生長情況為(表4)，⑤號生長速度最快，達到6.82 mm·d-1，高于④號的6.57 mm·d-1，并明顯高于其他3組，5組間差異顯著。

表3 不同培養基所培養的菌絲生長情況

表4 大球蓋菇菌絲在5種培養基上的菌絲生長速度

培養基篩選試驗表明：添加稻草玉米粉能明顯促進大球蓋菇的生長，能夠明顯提高菌絲長速、長勢。

3 結論

本文通過對實驗室現有的大球蓋菇菌種及母種培養基篩選實驗，得出以下結果：

(1)本試驗通過實驗室現有的5種大球蓋菇菌種在PDA培養基上的生長速度及生長勢的比較分析得出：3號菌種生長速度最快，相比1號、2號、4號、5號菌種分別提高了5.44%、3.00%、4.09%、5.45%，且菌絲濃白、粗壯，所以3號菌種為實驗室現有最優菌株。

(2)通過對篩選出的最優菌株在常見的5種培養基中生長速度及菌絲在培養基中菌落邊緣整齊度、菌絲密度、菌絲生長勢、菌絲色澤的比較得出，大球蓋菇最適母種培養基配方為：馬鈴薯200 g·L-1，蔗糖20 g·L-1，蛋白胨2 g·L-1，酵母膏1 g·L-1，玉米粉10 g·L-1，維生素B 1片·L-1，稻草15 g·L-1。

[1] Hawksworth D L,Kirk P M, Sutton B C, et al. Ainsworth and Bisby's Dictionary of the fungi Ⅷ[M].London:CABI, 1995

[2] 王新娜,李紅超,楊勇岐.利用農作物秸稈種植大球蓋菇新技術[J].陜西農業科學，2005 (5):134-135

[3] 黃年來.大球蓋菇的分類地位和特征特性[J].食用菌, 1995(6):11

[4] 黃年來.美國波蘭大球蓋菇的栽培技術[J].食用菌,1996(1):27

[5] 薩仁圖雅,圖力古爾.大球蓋菇研究進展[J].食用菌學報,2005,12(4):57-64

StrainandCultureMediumofScreeningofStrophariarugoso-annulata

Cheng Yuan

(Wuchang City Baolong shop seed forest, Heilongjiang Haidian 150200)

Q949.329.81

A

10.13601/j.issn.1005-5215.2017.09.018

1005-5215(2017)09-0057-02

2017-05-25

程遠(1982-)，男，黑龍江巴彥人，大學，工程師，從事小漿果及食用菌等培養研究.