混菌發酵消減大米中鎘的工藝優化

陳 瑤 廖盧艷 吳衛國

(湖南農業大學食品科技學院，湖南 長沙 410128)

混菌發酵消減大米中鎘的工藝優化

陳 瑤 廖盧艷 吳衛國

(湖南農業大學食品科技學院，湖南 長沙 410128)

以鎘含量為0.977 8 mg/kg的超標大米為原料，脫鎘率為衡量指標，利用單因素試驗和Box-behnken中心組合試驗對羅伊氏乳桿菌+發酵乳桿菌+植物乳桿菌(體積比=1∶1∶1)發酵消減大米中鎘的工藝條件進行優化，重點考察發酵溫度、發酵時間、大米粒度、料液比、接種量對脫鎘率的影響。結果表明：羅伊氏乳桿菌+發酵乳桿菌+植物乳桿菌(體積比=1∶1∶1)發酵消減大米中鎘的最佳工藝條件為大米粒度40目，接種量3%，料液比1∶5 (g/mL)，溫度37 ℃，時間21 h，該工藝條件下脫鎘率可達到89.98%，與模型預測值(89.736 2%)相近。

鎘；大米；乳酸菌；發酵

Abstract： Rice with cadmium content of 0.977 8 mg/kg was studied as the main material, its cadmium removal rate was regard as the basic measuring index. The process parameters of reducing techniques for cadmium-tainted rice were optimized by single factor test and Box-behnken response surface design. The investigation were focused on the effects of temperature, time, mesh number of rice, solid-liquid ratio, and inoculation amount. The optimal parameters were found as follows: mesh number of rice 40, inoculation amount 3, solid-liquid ratio 1∶5, treated at 37 ℃ for 21 h. Under this optimum conditions, the cadmium removal rate was 89.98%, which was similar to the predicted value of 89.736 2%.

Keywords： Cadmium; rice; lactobacillus; fermentation

近年來，“鎘大米”的出現引發了人們對大米食用安全性的擔憂與焦慮。另外，因鎘大米存在的安全問題而造成了大量糧食資源的浪費。防治大米鎘污染的根本途徑即從源頭出發，修復鎘污染稻田及水源。選育鎘富集能力低的水稻也是減輕大米鎘污染的有效手段[1]。但這些技術的推廣和普及在短期內難以實現。通過加工技術實現大米脫鎘，是解決鎘超標大米利用問題的應急之策，有利于稻米行業的健康發展和糧食安全[2]。研究[3-4]表明，通過礱谷、碾米和浸泡等物理方法均能降低大米中的鎘含量，物理法設備簡單、成本低，但脫鎘率較低。田陽[3]發現鎘含量高于0.323 mg/kg的鎘超標稻谷很難通過簡單的礱谷碾米等物理方式使鎘含量降低至達標。化學法能取得較好的脫鎘效果，但經過酸式或堿式浸提得到的脫鎘大米制品應用范圍窄，還有可能造成化學殘留[5-6]。微生物法在大米鎘脫除方面前景廣闊，一方面，針對鎘超標嚴重的大米，采用微生物法可以有效脫鎘，為富鎘米的深加工及綜合利用提供了有效轉化途徑；另一方面，經過微生物發酵作用還可以提升大米的口感和品質[7-8]。目前的微生物脫鎘研究主要圍繞單一菌種展開，如植物乳桿菌、發酵乳桿菌、長雙歧乳桿菌等[9-10]。而多菌種發酵的優勢明顯優于單一菌種，很多重要的化學反應僅靠純種發酵是無法順利進行的，采用混菌發酵可以彌補單一菌種發酵不足的缺點[11-14]。此外，由于混菌發酵過程中代謝產物更為豐富，混菌發酵脫鎘效率可能會提高。

本研究結合了微生物脫鎘和混菌發酵的優勢，以鎘超標大米為原料，選用植物乳桿菌、發酵乳桿菌、羅伊氏乳桿菌、鼠李糖乳桿菌4種常用于食品工業的益生菌復配成發酵劑，消減大米中的鎘，通過對比試驗選擇具有最佳脫鎘能力的菌種組合，利用響應面法優化獲得發酵脫鎘的最佳工藝參數，以期為鎘超標稻米的治理和用途轉換提供理論依據。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

大米：早秈米(鎘含量0.977 8 mg/kg)，產地湖南省株洲縣；

鼠李糖乳桿菌凍干粉、植物乳桿菌凍干粉：廣東環凱微生物科技有限公司；

羅伊氏乳桿菌凍干粉、發酵乳桿菌凍干粉：中國食品發酵工業研究院；

硝酸、高氯酸：優級純，國藥集團化學試劑有限公司；

鎘標準儲備液：1 000 μg/mL，中國計量科學院；

MRS培養基、MRS肉湯：廣東環凱微生物科技有限公司。

1.2 儀器與設備

立式壓力蒸汽滅菌鍋：LDZX-50KB型，上海申安醫療器械廠；

無菌操作臺：SW-CJ-IFD型，蘇州佳寶凈化工程設備有限公司；

生化培養箱：SPX-250BS-Ⅱ型，上海新苗醫療器械制造有限公司；

臺式離心機：TD5A型，湖南赫西儀器裝備有限公司；

電熱鼓風干燥箱：101A-3ET型，天津市泰斯特儀器有限公司；

電子天平：BS201S型，北京賽多利斯天平有限公司；

原子吸收分光光度計：AA-7000型，日本島津有效公司；

不銹鋼數顯電熱板：DB-1型，北京市永光明醫療儀器有限公司。

1.3 方法

1.3.1 菌種的活化及菌懸液的制備

(1) 凍干菌種的復活：在無菌條件下開啟裝有菌種的安瓿管，加入復蘇液(MRS肉湯)，輕輕旋轉安瓿管，將凍干菌種粉制成懸浮液，然后用移液槍吸取適量菌液，移至滅菌的MRS液體培養基，在36 ℃下培養24～48 h，直至液體培養基渾濁。

(2) 菌懸液的制備：無菌條件下制備一系列稀釋度的菌液接種至滅菌的MRS瓊脂平板上，37 ℃恒溫培養24 h，采用稀釋平板計數對菌落計數，稀釋至濃度達到109CFU/mL即可。

1.3.2 大米粉發酵

(1) 大米粉樣品的制備：大米除雜后，用粉碎機粉碎，依次通過100，80，60，40，20目的標準篩，分別分裝編號。排氣密封后存放在陰涼、干燥、易通風處，備用。

(2) 發酵大米粉的制作工藝：準備20～70 mL的超純水置于錐形瓶中滅菌(121 ℃，20 min)，準確稱量10.00 g過篩的大米粉樣品置于已滅菌的去離子水中，充分混合均勻。再將不同比例混合的乳桿菌菌懸液(植物乳桿菌、羅伊氏乳桿菌、發酵乳桿菌、鼠李糖乳桿菌)接種到大米漿液中，菌懸液的接種量為1%～6%。用封口膜將錐形瓶密封后置于20～40 ℃恒溫培養箱中發酵12～32 h。空白組不接種，加入等量的0.3%的苯甲酸鈉于恒溫培養箱35 ℃浸泡發酵21 h[15]。待發酵完畢后倒去發酵液，用去離子水清洗4次，將發酵后的米粉轉入離心管中，再用40 mL的去離子水洗滌錐形瓶4次，洗液合并于離心管中。用離心機脫水(3 000 r/min，5 min)，脫水后的大米粉置于55 ℃的熱風干燥箱中干燥至恒重，再用自封袋密封后置于冰箱4 ℃保存備用。

1.3.3 大米中鎘含量的測定

(1) 樣品消解：稱取干大米試樣0.3～0.5 g(精確至0.000 1 g)，采用濕法消解，消解液為10 mL硝酸—高氯酸混合溶液(體積比為9∶1)，待消解完畢后將消化液轉移至容量瓶，用1%的硝酸溶液定容至刻度，同時做空白試驗[16]2-3。

(2) 標準曲線的繪制：調整原子吸收分光光度計至最佳狀態，參數條件：波長228.8 nm，狹縫寬度0.7 nm，燈電流8 mA，灰化溫度550 ℃，灰化時間30 s，原子化溫度1 800 ℃，原子化時間3 s[18]3。配制含鎘量分別為0.0，0.5，1.0，1.5，2.0 ng/mL的標準系列溶液，注入20 μL的標準系列溶液和5 μL的基改劑溶液(10 g/L磷酸二氫銨溶液)于石墨爐中，測其吸光度值，得到吸光值與鎘濃度的標準曲線(見圖1)，平行測定3次，結果取平均值。

圖1 鎘標準曲線

(3) 樣品中鎘含量的測定：吸取20 μL的樣品消化液和5 μL的基改劑溶液(10 g/L磷酸二氫銨溶液)于石墨爐中，測其吸光值，按式(1)求出樣品中的鎘含量，平行測定3次，結果取平均值。

(1)

式中：

X——試樣中鎘含量，mg/kg；

C1——試樣中消化液中的鎘含量，ng/mL；

C0——空白液中的鎘含量，ng/mL；

V——試樣消化液定容總體積，mL；

m——試樣質量，g；

1 000——換算系數。

1.3.4 大米脫鎘率 按式(2)計算：

(2)

式中：

X——脫鎘率，%；

W0——原料大米中鎘的含量， mg/kg；

W1——發酵脫鎘后大米中鎘的含量，mg/kg。

1.3.5 發酵劑脫鎘效果的比較

(1) 單菌脫鎘效果：在相同試驗條件下 [大米目數20目，發酵溫度35 ℃，發酵時間25 h，料液比1∶4 (g/mL)，接種量3%]，選取發酵乳桿菌、羅伊氏乳桿菌、鼠李糖乳桿菌、植物乳桿菌，以脫鎘率為考察指標，研究各菌種單獨脫除大米中重金屬鎘的效果。

(2) 混菌脫鎘效果：在相同試驗條件下[大米粒度20目米，發酵溫度35 ℃，發酵時間25 h，料液比1∶4 (g/mL)，接種量3%]，選取植物乳桿菌分別與發酵乳桿菌、羅伊氏乳桿菌、鼠李糖乳桿菌按體積比1∶1，2∶1混合復配成兩菌型發酵劑，植物乳桿菌與發酵乳桿菌、鼠李糖乳桿菌、羅伊氏乳桿菌依次組合復配成三菌型發酵劑(體積比1∶1∶1)，以脫鎘率為考察指標，研究混菌發酵劑脫除大米中重金屬鎘的效果。

每個試驗重復3次，試驗數據均以平均值±標準偏差表示。通過對比試驗，選取脫鎘效果最好的菌種或菌種組合作為后續試驗的發酵劑。

針對在建設工程項目管理工作中存在的問題，企業應實行定員定崗的崗位工作責任制。將企業控制成本的工作責任落實到涉及工程建設項目的每一個人身上。例如：負責合同擬定和管理的部門要與業主和各級部門做好合同內容的溝通工作，明確合同各條款內容。對存在爭議的部分要及時作出有效的溝通。施工內容或者材料價格變更時要及時與業主溝通，劃分好責任。施工人員對施工工藝和施工設備進行統一的管理，確保施工工作正常有序的進行。這樣將責任細化分配給各個崗位的工作者，不僅可以增加施工工程的工作效率，也可以有效的將責任與成本結合起來，達到控制成本的目的。

1.3.6 單因素試驗設計 單因素試驗采用以下試驗操作進行，選取上一步得到的脫鎘效果最好菌種組合：羅伊氏乳桿菌∶發酵乳桿菌∶植物乳桿菌(體積比1∶1∶1)作為發酵劑，以脫鎘率為指標，每個試驗做3次平行試驗，試驗數據均以平均值±標準偏差表示。

(1) 溫度：固定大米粒度20目，發酵時間25 h，料液比1∶4 (g/mL)，接種量3%，發酵溫度分別為20，25，30，35，40 ℃，研究發酵溫度對脫鎘率的影響。

(2) 時間：固定大米粒度20目，發酵溫度37 ℃，料液比1∶4 (g/mL)，接種量3%，發酵時間分別為12，16，20，24，28，32 h，研究發酵時間對脫鎘率的影響。

(3) 目數：固定發酵溫度37 ℃，發酵時間25 h，料液比1∶4 (g/mL)，接種量3%，大米粒度分別為20，40，60，80，100目，研究大米目數對脫鎘率的影響。

(4) 料液比：固定大米粒度20目，發酵溫度37 ℃，發酵時間25 h，接種量3%，料液比分別為1∶2，1∶3，1∶4，1∶5，1∶6，1∶7 (g/mL)，研究料液比對脫鎘率的影響。

(5) 接種量：固定大米粒度20目，發酵溫度37 ℃，發酵時間25 h，料液比1∶4 (g/mL)，接種量分別為1%，2%，3%，4%，5%，6%，研究接種量對脫鎘率的影響。

1.3.7 響應面試驗設計 根據單因素試驗結果，選取料液比、溫度、時間為自變量，以脫鎘率為響應值。根據 Box-Behnken Design中心組合試驗設計原理，運用Design Expert 8.0.6軟件設計3因素3水平響應面試驗，并對試驗數據進行分析優化，得出大米發酵降鎘的最佳工藝。

2 結果與分析

2.1 發酵劑脫鎘效果的比較

由表1可知，混菌發酵的脫鎘效果明顯優于純種發酵脫鎘的效果，以三菌混合發酵脫鎘效果最佳。其中脫鎘效果最佳的菌種組合為羅伊氏乳桿菌∶發酵乳桿菌∶植物乳桿菌=1∶1∶1 (體積比)，脫鎘率可達(88.46±0.45)%，因此選擇該混合菌種，作為后續試驗的發酵劑。混菌發酵效果較好的原因是混菌發酵利用了不同菌株作用效果的差異，具有多菌共生酶系互補的特點，使得混菌發酵產酶和產酸能力遠高于單一菌株，并能克服中間產物過大對發酵產物生成的不良影響[17-18]。

2.2 單因素試驗結果

2.2.1 溫度對脫鎘率的影響 由圖 2可知，20 ℃時的脫鎘率最低，隨著溫度的升高脫鎘率逐漸升高，在35 ℃時脫鎘率達到最高值，之后脫鎘率明顯下降，說明過高和過低的溫度都不利于大米中重金屬鎘的去除。乳酸菌發酵脫除大米中的鎘主要是依靠微生物代謝產物——乳酸、蛋白酶等的作用，同時菌體本身對重金屬也有吸附作用[19-20]。低溫時脫鎘率較低可能是低溫時乳酸菌生長緩慢，其代謝產物也較少，不利于鎘的溶出。而高溫導致大量菌體自溶，乳酸菌的活菌數大量下降，削弱了微生物及其代謝產物對鎘的淋濾作用[21]。此外，微生物分泌的胞外聚合物存在大量具有重金屬親和性的陰離子基團，溫度過高使胞外聚合物的活性降低，導致重金屬的吸收效率變低[22]。因此選擇35 ℃為中心點進行后續試驗。

表1 發酵劑脫鎘效果的比較?

? 括號內為體積比。

2.2.2 時間對脫鎘率的影響 由圖3可知，隨著發酵時間的延長，脫鎘率也隨之增加，當發酵時間達到24 h之后，脫鎘率增加趨勢變緩。可能是在發酵前期，隨著微生物大量生長繁殖，代謝產物大量累積，游離態的鎘溶出速度較快，大量結合態的鎘也隨著發酵的進行逐漸溶出，脫鎘率隨之上升；當發酵時間繼續延長，乳酸菌的活菌數量逐漸下降，鎘的溶出逐漸接近飽和狀態，脫鎘率則增加緩慢。同時，隨著發酵時間的延長，發酵液的pH也越來越低，過低的pH環境影響了金屬離子與吸附活性點位的接觸，不利于微生物對重金屬的吸附[23-24]。由于24 h之后的脫鎘率增加幅度不明顯，考慮到經濟效益，選擇20 h為中心點進行后續的試驗。

相同字母表示經鄧肯氏新復極差法檢驗在P<0.01水平上差異不顯著

相同字母表示經鄧肯氏新復極差法檢驗在P<0.01水平上差異不顯著

2.2.3 大米目數對脫鎘率的影響 由圖4可知，脫鎘率隨大米目數的增加總體變化趨勢不大。當大米目數為20目時，脫鎘率最低，隨著大米粉越來越細，脫鎘率先增加后下降。可能是大米目數變大，加速了微生物脫鎘的反應速率，有利于游離態鎘的溶出；但大米粉粒度繼續降低，米粉的粒度過小，溶液的黏度增大，減弱了游離態鎘向外溶出的速率。因此在之后的試驗中固定大米粒度為40目。

相同字母表示經鄧肯氏新復極差法檢驗在P<0.01水平上差異不顯著

2.2.4 料液比對脫鎘率的影響 由圖5可知，隨著料液比的增加，脫鎘率先升高后下降。當料液比較小時，脫鎘率也相對較低，可能是去離子水的用量較小，發酵液的pH偏小，大米中淀粉大量水解，可溶性物質大量溶出，此時溶液的黏度較大，影響了金屬離子與吸附活性點位的結合，導致鎘溶出比較困難[25-26]。隨著料液比的增大，發酵液的pH隨之增加，加快了鎘的溶出，然而當料液比繼續增加會稀釋發酵液的濃度，同時微生物的代謝產物體積分數隨之下降。因此選擇料液比1∶5 (g/mL)為中心點進行后續的響應面優化。

相同字母表示經鄧肯氏新復極差法檢驗在P<0.01水平上差異不顯著

2.2.5 接種量對脫鎘率的影響 由圖6可知，隨著接種量的增加，脫鎘率先增加后下降。接種量較小時，初始活菌數較少，微生物代謝產物的積累也較少，從而不利于鎘的脫除；隨著接種量的增加，鎘脫除率逐漸升高。但繼續增加接種量，脫鎘率并未繼續升高。因為當接種量過大時，菌體生長環境中可供利用的營養物質有限，菌種之間產生競爭，生長繁殖的速率減慢，使得鎘脫除的效率也隨之緩慢下降[26]。因此，后續試驗接種量固定為3%。

相同字母表示經鄧肯氏新復極差法檢驗在P<0.01水平上差異不顯著

2.3 響應面試驗結果與分析

2.3.1 響應面分析試驗結果 響應面因素設計水平見表2。運用Design Expert 8.0.6軟件，對表3中的試驗數據進行多元回歸分析，得到脫鎘率與所選3個因素的回歸方程為：

Y=88.99+0.58A+2.37B+2.13C+0.31AB+2.68AC-1.67BC-7.09A2-2.64B2-3.40C2，

(3)

2.3.2 響應面交互作用分析 由圖7可知，料液比和發酵溫度之間的交互作用等高線圖呈圓形，說明兩者交互作用不是很顯著。由圖8可知，發酵時間對脫鎘率的影響大于料液比，且發酵時間與料液比之間的等高線圖呈橢圓形，說明兩者之間存在較強的交互作用。由圖9可知，發酵溫度對脫鎘率的影響略大于發酵時間，且兩者之間存在較強的交互作用。

2.3.3 最優工藝條件的確定與驗證 在各因素選定范圍內，對回歸模型進行分析優化，得到的大米發酵脫鎘最佳工藝條件為：料液比1∶5.1 (g/mL)，溫度36.86 ℃，時間21.04 h，在此條件下預測脫鎘率為89.736 2%。為驗證此方法的結果，并考慮實際可操作性，將最佳工藝參數修正為：料液比1∶5 (g/mL)，溫度37 ℃，時間21 h。并進行3次平行實驗，脫鎘率分別為89.85%，90.01%，90.08%。實際脫鎘率平均值為89.98%，與模型擬合良好，說明該模型能夠較好地預測大米發酵脫鎘的效果。

表2 響應面試驗設計因子水平表

表3 響應面試驗設計與結果

表4 回歸模型方差分析?

? **表示P<0.01，差異極顯著； *表示P<0.05，差異顯著。

圖7 料液比和溫度交互影響脫鎘率的等高線圖及曲面圖

圖8 料液比和時間交互影響脫鎘率的等高線圖及曲面圖

圖9 溫度和時間交互影響脫鎘率的等高線圖及曲面圖

3 結論

本試驗對混菌發酵的脫鎘效果進行了研究，發現混菌發酵的脫鎘效果明顯比單菌純種發酵的效果好，脫鎘率最高菌株組合即羅伊氏乳桿菌+發酵乳桿菌+植物乳桿菌 (體積比1∶1∶1)。通過響應面優化了乳酸菌混合發酵消減大米中鎘的工藝條件為：大米目數40 目，接種量3%，料液比1∶5 (g/mL)，溫度37 ℃，時間21 h，在此工藝條件下脫鎘率可達到 89.98%，與模型預測值89.736 2%相近。空白組未進行發酵的大米鎘脫除率僅為4.38%。

本研究雖獲得了較好的脫鎘效果，但其脫鎘機制還有待進一步研究。近年來，關于微生物脫除重金屬的研究尚處于起步階段。為了加速微生物脫鎘技術在大米脫鎘中的應用，還需要進一步了解脫鎘菌株的生理特征，代謝產物對脫鎘率的影響，以及各種發酵參數之間的關系。進一步優化工藝條件，盡可能地提高脫鎘菌種的利用效率。

[1] 鄭陶, 李廷軒, 張錫洲, 等. 水稻鎘高積累品種對鎘的富集特性[J]. 中國農業科學, 2013, 46(7): 1 492-1 500.

[2] 魏益民, 魏帥, 郭波莉, 等. 含鎘稻米的分布及治理技術概述[J]. 食品科學技術學報, 2013, 31(2): 1-6.

[3] 田陽. 稻米加工技術對產品鎘含量的影響[D]. 北京: 中國農業科學院, 2013: 11-14.

[4] 劉晶, 任佳麗, 林親錄, 等. 大米浸泡過程中重金屬遷移規律研究[J]. 食品與機械, 2013, 29(5): 66-67.

[5] 彭志兵, 莫逆, 楊學文. 乳酸浸提去除大米粉中鎘的研究[J]. 糧食科技與經濟, 2016, 41(5): 39-42.

[6] 許艷霞, 倪小英, 袁毅, 等. 溶劑浸提技術消減稻米中鎘含量[J]. 糧食科技與經濟, 2015, 40(5): 36-39.

[7] 張麗娜, 解萬翠, 楊錫洪, 等. 微生物法脫除重金屬技術的研究進展[J]. 食品工業科技, 2015(24): 356-359.

[8] 周顯青, 李亞軍, 張玉榮. 不同微生物發酵對大米理化特性及米粉食味品質的影響[J]. 河南工業大學學報: 自然科學版, 2010, 31(1): 4-8.

[9] HALTTUNEN T, SALMINEN S, TAHVONEN R. Rapid removal of lead and cadmium from water by specific lactic acid bacteria[J]. International Journal of Food Microbiology, 2007, 114(1): 30-35.

[10] 傅亞平, 廖盧艷, 劉陽, 等. 乳酸菌發酵技術脫除大米粉中鎘的工藝優化[J]. 農業工程學報, 2015, 31(6): 319-326.

[11] BADER J, MASTGERLACH E, POPOVIC M K, et al. Relevance of microbial coculture fermentations in biotechnology[J]. Journal of Applied Microbiology, 2010, 109(2): 371-87.

[12] PETTIT R K. Mixed fermentation for natural product drug discovery[J]. Applied Microbiology and Biotechnology, 2009, 83(1): 19-25.

[13] 徐德陽, 王莉莉, 杜春梅. 微生物共培養技術的研究進展[J]. 微生物學報, 2015, 55(9): 1 089-1 096.

[14] 雷群英. 大米中鎘的微生物法脫除及其應用品質研究[D]. 無錫: 江南大學, 2015: 11-19.

[15] 王鋒, 魯戰會, 薛文通, 等. 浸泡發酵大米成分的研究[J]. 糧食與飼料工業, 2003(1): 11-14.

[16] 國家衛生計生委. GB 5009.15—2014 食品中鎘的測定[S]. 北京: 中國標準出版社, 2014.

[17] 趙德安. 混合發酵與純種發酵[J]. 中國調味品, 2005(3): 3-8.

[18] BERTRAND S, BOHNI N, SCHNEE S, et al. Metabolite induction via microorganism co-culture: a potential way to enhance chemical diversity for drug discovery[J]. Biotechnology Advances, 2014, 32(6): 1 180.

[19] 傅亞平, 吳衛國, 王巨濤. 乳酸菌發酵脫除大米粉中重金屬鎘的機理[J]. 食品與發酵工業, 2016, 42(3): 104-108.

[20] 曾曉希. 抗重金屬微生物的篩選及其抗鎘機理和鎘吸附特性研究[D]. 長沙: 中南大學, 2010: 61-69.

[21] 馮鎮, 張蘭威. 乳酸菌發生自溶的影響因素研究[J]. 中國乳品工業, 2003, 31(3): 7-9.

[22] 王婷婷. 微生物對重金屬的吸附作用及其影響因素[J]. 生物學教學, 2012, 37(11): 9-10.

[23] 張海歐, 周維芝, 馬玉洪, 等. 微生物胞外聚合物對重金屬鎘的解毒作用及紅外光譜分析[J]. 光譜學與光譜分析, 2013, 33(11): 3 041-3 043.

[24] 楊彥平. 三株嗜酸性微生物表面質子及重金屬吸附行為研究[D]. 長沙: 中南大學, 2013: 31-77.

[25] KINOSHITA H, SOHMA Y, OHTAKE F, et al. Biosorption of heavy metals by lactic acid bacteria and identification of mercury binding protein[J]. Research in Microbiology, 2013, 164(7): 701.

[26] GHORBANI F, YOUNESI H, GHASEMPOURI S M, et al. Application of response surface methodology for optimization of cadmium biosorption in an aqueous solution by Saccharomyces cerevisiae[J]. Chemical Engineering Journal, 2008, 145(2): 267-275.

Optimization of the technology for reducing cadmium in rice by mixed fermentation

CHEN YaoLIAOLu-yanWUWei-guo

(CollegeofFoodScienceandTechnology,HunanAgriculturalUniversity,Changsha,Hunan410128,China)

10.13652/j.issn.1003-5788.2017.08.011

2017年湖南省研究生科研創新項目(編號：CX2017B375)；農業部、財政部專項(編號：農辦財函 [2016] 6號)

陳瑤，女，湖南農業大學在讀碩士研究生。

吳衛國(1968—)，男，湖南農業大學教授，博士。 E-mail: 1061051403@qq.com

2017—05—04