舟山海島地區多重耐藥鮑曼不動桿菌調查及替加環素對其藥物敏感性研究

王輝　李略　李海峰

[摘要] 目的 分析舟山海島地區多重耐藥鮑曼不動桿菌調查結果及替加環素對其藥物敏感性的影響。 方法 收集我院2016年1月～2017年5月150例多耐藥鮑曼不動桿菌感染患者的各類標本。采用調查表形式調查多重耐藥鮑曼不動桿菌感染患者的臨床情況，如年齡、性別、病種、基礎疾病、病程、用藥情況、抗菌藥物使用頻率、免疫狀況、有無侵入性操作、藥敏結果等，統計分析患者感染多重耐藥鮑曼不動桿菌的危險因素、好發人群等。通過常規培養、分離篩選出多重耐藥鮑曼不動桿菌菌株150例，予Kirby-Bauer紙片擴散法置入培養基（MH）中進行藥敏試驗。研究本地區多重耐藥鮑曼不動桿菌對替加環素、頭孢哌酮舒巴坦鈉的耐藥及抑菌率。采用空白組、替加環素組、舒普深組及替加環素+舒普深組對150例多重耐藥鮑曼不動桿菌進行耐藥及抑菌效果的觀察及分析。 結果 通過分析發現，年齡大、合并多種疾病、惡性腫瘤、病程長、用藥種類單一、抗菌藥物使用時間長是患者感染多重耐藥鮑曼不動桿菌的危險因素。替加環素組的耐藥率和抑菌率為10.0%和90.0%、舒普深組的耐藥率和抑菌率為20.0%和80.0%，替加環素+舒普深組的耐藥率和抑菌率為4.6%和95.4%。 結論 替加環素對多重耐藥鮑曼不動桿菌具有較高的敏感度，并且通過與舒普深的聯合應用，能夠減少其耐藥性，從而有效治療多重耐藥鮑曼不動桿菌引起的疾病。

[關鍵詞] 海島地區；多重耐藥鮑曼不動桿菌；替加環素；藥物敏感性

[中圖分類號] R446.5 [文獻標識碼] B [文章編號] 1673-9701（2017）23-0109-03

[Abstract] Objective To analyze the investigation results of multi-drug resistant Acinetobacter baumannii in Zhoushan Island and the sensitivity of tigecycline to Acinetobacter baumannii. Methods Various types of specimens of 150 patients with multi-drug resistant Acinetobacter baumannii infection in our hospital from January 2016 to May 2017 were collected. The clinical status of patients with multiple drug-resistant Acinetobacter baumannii infection， such as age， sex， disease， underlying disease， course of disease， medication status， frequency of antimicrobial use， immune status， invasive operation， medication sensitive results was investigated by using the form of the questionnaire. The risk factors for multiple drug resistance of Acinetobacter baumannii infection in patients and good people were statistically analyzed.150 cases of multi-drug resistant Acinetobacter baumannii strains were screened by conventional culture and isolated. And the drug susceptibility test was carried out by Kirby-Bauer paper diffusion placed into culture medium（MH）. The resistance and inhibitory rate of Acinetobacter baumannii to ticyclotaxel and cefoperazone sulbactam sodium in the region were studied. The antibiotic resistance and antibacterial effect of 150 cases of multi-drug resistant Acinetobacter baumannii were observed and analyzed by blank group， tigecycline group， sulperazon group and tigecycline+sulperazon group. Results The analysis revealed that older age， combination with multiple diseases， cancer， longer duration， a single type of medication， long time of antibiotics use ere the risk factors for patients to be infected with multiple drug resistant Acinetobacter baumannii infection.The resistant rate and antimicrobial rate of the tigecycline group were 10.0% and 90.0%， respectively. The resistant rate and antibacterial rate of the sulperazon group were 20.0% and 80.0%， respectively. The resistant rate and antibacterial rate were 4.6% and 95.4% in the tigecycline+sulperazon group. Conclusion Tigecycline has a high sensitivity to multidrug-resistant Acinetobacter baumannii and its drug resistance can be reduced by co-administration with sulperazon， so as to effectively treat the diseases caused by multidrug-resistant Acinetobacter baumannii.

[Key words] Island region； Multiple drug-resistant Acinetobacter baumannii； Tigecycline； Drug sensitivity

隨著臨床抗菌藥物以及免疫制劑的廣泛應用，致病菌耐藥成為一種普遍現象，給臨床治療帶來了較大的問題[1]。鮑曼不動桿菌是一種常見的致病菌，且近些年來發現其耐藥率不斷提升，成為一種難治性細菌[2]。替加環素是一種新型廣譜抗生素，對于耐藥病菌有較好的應用效果。因此，文章主要針對舟山海島地區多重耐藥鮑曼不動桿菌調查結果及替加環素對其藥物敏感性的影響展開分析，現報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料

收集我院2016年1月～2017年5月150例多耐藥鮑曼不動桿菌感染患者的各類標本。入選標準：（1）在我院留取各類樣本的患者；（2）入院住院時間超過48 h或在近30 d內有住院史的患者；（3）年齡30～90歲；（4）符合醫院獲得性肺炎診斷（依據中華醫學會呼吸病學分會制定的HAP標準）[3]。排除標準：排除同一患者相同部位分離到的重復菌株[4]。

1.2 方法

1.2.1 分組方法 將分離得到的多耐藥鮑曼不動桿菌菌株，擴增后分為空白組、替加環素組、舒普深組（頭孢哌酮舒巴坦鈉）及替加環素+舒普深組四組，空白組不添加任何藥物，替加環素組單純使用替加環素、舒普深組單純使用頭孢哌酮舒巴坦鈉，替加環素+舒普深組聯合應用替加環素和頭孢哌酮舒巴坦鈉，均在培養24 h后對其進行藥敏檢測。

1.2.2 藥敏檢測操作方法 無菌操作下采集、運送用于細菌培養的標本，實驗室接收標本后依據《全國臨床檢驗操作規程》的標準進行處理[5]。將分離后的標本常規接種于9 cm血平板中培養，24～48 h后觀察是否有菌落生長。如發現菌落生長予進行分純培養18～24 h，然后在分純過夜新鮮培養的細菌平板上挑選4～5個形態相同的菌落，用3～5 mL無菌生理鹽水中經比濁儀調整濃度至0.5麥氏單位（約1×108 CFU/mL）上細菌儀鑒定。經過18～24 h細菌儀檢測后獲得鮑曼不動桿菌，并將獲得菌株再次進行分純培養18～24 h（得到對數生長期）獲得多重耐藥鮑曼不動桿菌。然后挑選4～5個形態相同的菌落，用3～5 mL無菌生理鹽水中經比濁儀調整濃度至0.5麥氏單位，用K-B紙片接種法置入藥敏培養基（MH），并貼入藥敏試片測試。

1.3 材料與設備

所需材料由鄭州安圖生物有限公司提供。使用設備：美國BD公司生產PHOENIX-100型全自動細菌鑒定和藥敏測試儀。藥敏培養基（MH）材料由法國梅里埃公司生產。藥敏試片由英國Oxoid公司生產。

1.5 判斷標準

參照美國FDA 制定的測量抑菌圈直徑標準，經過18～24 h培養后用游標卡尺測量藥物抑菌環的直徑。

1.6統計學分析

采用SPSS16.0統計學軟件進行統計學分析，計量資料用（x±s）表示，組間差異、組內差異比較采用t檢驗，計數資料比較采用χ2檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 舟山地區多重耐藥鮑曼不動桿菌調查分析

通過分析發現，年齡大、合并多種疾病、惡性腫瘤、病程長、用藥種類單一、抗菌藥物使用時間長是患者感染多重耐藥鮑曼不動桿菌的危險因素，見表1、2。

2.2四組的耐藥率和抑菌率比較

替加環素組的耐藥率和抑菌率為10.0%和90.0%、舒普深組的耐藥率和抑菌率為20.0%和80.0%，替加環素+舒普深組的耐藥率和抑菌率為4.6%和95.4%，見表3。

3 討論

鮑曼不動桿菌（Ab）為非發酵革蘭陰性桿菌，廣泛存在于自然界，為條件致病菌，是醫院感染的重要病原菌，通過污染的環境、醫療器械以及帶菌醫護人員的手等環節在醫院內傳播及流行[6]。現階段國內對多重鮑曼不動桿菌感染的危險因素調查研究成果較少，難以為臨床預防鮑曼不動桿菌導致的院內感染提供科學依據[7]。本次研究經分析發現，年齡大、合并多種疾病、惡性腫瘤、病程長、用藥種類單一、抗菌藥物使用時間長是患者感染多重耐藥鮑曼不動桿菌的危險因素，同時與老年患者的身體免疫機制和抵抗機制衰弱也有一定的相關性，加上在多種疾病的作用下，個體免疫功能異常，降低了抵抗致病菌入侵的能力[8，9]。

根據國內資料表明，Ab占臨床分離的不動桿菌的70.0%以上，且對第3代和第4代頭孢菌素的耐藥率達63.0%～89.9%[10，11]。近年來多重耐藥鮑曼不動桿菌感染在全球重癥患者中日益普遍，且耐藥率和病死率逐漸增高，已被冠名為“21世紀革蘭陰性桿菌MRSA”[12，13]。全球細菌耐藥監測數據庫（SENTRY）的數據顯示，不動桿菌位于HAP致病原的第5位，同時其對常用抗菌藥物的耐藥率也逐年增高[14]。美國2004～2005年76個醫學中心的耐藥監測顯示，多重耐藥鮑曼不動桿菌（MDRAB）占鮑曼不動桿菌臨床分離株29.3%[15，16]。2012年中國 CHINET的監測資料顯示，不動桿菌屬（鮑曼不動桿菌占89.6%）對亞胺培南和美羅培南的耐藥率分別為63.5%和68.2%，泛耐藥株數量高達45.0%[17，18]。

本次研究中，替加環素組的耐藥率和抑菌率為10.0%和90.0%、舒普深組的耐藥率和抑菌率為20.0%和80.0%，替加環素+舒普深組的耐藥率和抑菌率為4.6%和95.4%，這說明替加環素對多重耐藥鮑曼不動桿菌具有較高的敏感度，并且通過與舒普深的聯合應用，能夠減少其耐藥性發生，從而有效治療多重耐藥鮑曼不動桿菌引起的疾病。替加環素（tigecycline）為甘氨酰環素類抗菌藥物的第一個品種，甘氨酰環素類為四環素類抗菌藥物米諾環素的衍生物[19，20]。其兩種主要耐藥機制為外排泵和核糖體保護。對腸球菌、葡萄球菌、鏈球菌以及絕大部分革蘭陰性桿菌都有較強的抗菌活性，由于其抗菌譜廣、抗菌作用強，已經成為治療多重耐藥菌株的重要選擇。

通過對多重耐藥鮑曼不動桿菌的臨床分布、易感因素、耐藥特征及藥敏情況等調查，了解替加環素對多重耐藥鮑曼不動桿菌的體外敏感率，并與常規經典用藥的耐藥及微生物清除率對照，觀察相關藥物之間是否存在協同作用，為臨床診治提供參考。通過對多重耐藥鮑曼不動桿菌耐藥性監測，及時準確地掌握本地區菌株耐藥及敏感性，并為臨床合理使用抗菌藥物、防止濫用抗菌藥物提供參考依據。通過對多重耐藥鮑曼不動桿菌感染的危險因素分析，為早期經驗性應用抗菌藥物及預防院內感染提供科學依據。

[參考文獻]

[1] 周洋，黃河，張家洪，等.替加環素聯合頭孢哌酮舒巴坦治療多重耐藥鮑曼不動桿菌肺炎的療效觀察[J].實用醫學雜志，2015，34（5）：816-818.

[2] 趙智慧，王曉莉，馬志強，等.超說明書使用替加環素聯合頭孢哌酮舒巴坦治療多重耐藥鮑曼不動桿菌肺炎的臨床研究[J].中國藥房，2017，28（2）：201-204.

[3] 余琳，蘇丹虹，江鳳茹，等.多重耐藥鮑曼不動桿菌耐藥基因分析與同源性分析[J].實用醫學雜志，2015，29（12）：2018-2021.

[4] 佘鵬飛，王央霞，陳麗華，等.D-酪氨酸與3，3'-二氨基二丙基胺對多重耐藥鮑曼不動桿菌生物膜形成與分散的影響[J].臨床檢驗雜志，2015，33（6）：460-463.

[5] 孫靜娜，劉澤世，王國欣，等.多重耐藥鮑曼不動桿菌的臨床分布及其外排泵基因型分析[J].山東醫藥，2014， 34（43）：22-24.

[6] 張立然，劉原，柯蕊，等.鮑曼不動桿菌adeB基因檢測及外排泵抑制劑逆轉亞胺培南耐藥性的研究[J].中國抗生素雜志，2017，42（1）：62-66.

[7] 池細俤，高世華，陳家龍，等.多重耐藥鮑曼不動桿菌隨機多態性DNA分型與院內感染相關性研究[J].中國人獸共患病學報，2015，29（6）：609-613.

[8] 楊杰，蔡蕓，王睿，等.多重耐藥鮑曼不動桿菌耐藥分型的相關性及聯合用藥探討[J].中國臨床藥理學雜志，2015，28（2）：139-141.

[9] 劉沖，蘇建榮，閆東輝，等.重癥監護病房多重耐藥鮑曼不動桿菌感染及耐藥性分析[J].中華檢驗醫學雜志，2015，38（1）：55-58.

[10] 朱善軍，倪曉艷，吳巧珍，等.吳江地區多重耐藥鮑曼不動桿菌碳青霉烯酶基因攜帶情況及同源性[J].中國感染控制雜志，2016，15（12）：913-916.

[11] 巫培連，趙子文，陳惠玲，等.多重耐藥鮑曼不動桿菌對戊二醛消毒劑的敏感性[J].廣東醫學，2015，34（12）：1810-1813.

[12] 黃麗菊，張桂芳.替加環素對多重耐藥鮑曼不動桿菌adeB基因表達水平的影響[J].中國生化藥物雜志，2015， 34（5）：47-49.

[13] 王鐵山，蘇建榮.不同抗菌藥物組合對多重耐藥鮑曼不動桿菌的作用研究[J].中華微生物學和免疫學雜志，2015，31（10）：898-902.

[14] 吳倩，蔣敏，趙清，等.多重耐藥鮑曼不動桿菌的耐藥機制研究[J].重慶醫學，2015，44（21）：2961-2965.

[15] Chusri，Sasitorn，Na-Phatthalung，et al.Holarrhena antid-ysenterica as a resistance modifying agent against Acinetobacter baumannii：Its effects on bacterial outer membrane permeability and efflux pumps[J].Microbiological Research，2014，169（5/6）：417-424.

[16] Sof'ya N，Senchenkova，Alexander S.Shashkov，Mikhail M. Shneider，et al.Structure of the capsular polysaccharide of Acinetobacter baumannii ACICU containing di-N-acetylpseudaminic acid[J].Carbohydrate research，2014， 391：89-92.

[17] MJ Morrison，B Imperiali.Biosynthesis of UDP-N，N0-diacetylbacillosamine in Acinetobacter baumannii：Biochemical characterization and correlation to existing pathways[J].Archives of Biochemistry and Biophysics，2013， 536（1）：72-80.

[18] Eleonora Fregolino，Valentina Gargiulo，Rosa Lanzetta，et al.Identification and structural determination of the capsular polysaccharides from two Acinetobacter baumannii clinical isolates，MG1 and SMAL[J].Carbohydrate research，2015，346（7）：973-977.

[19] Smani Y，Docobopérez F，Lópezrojas R，et al.Platelet-activating factor receptor initiates contact of Acinetobacter baumannii expressing phosphorylcholine with host cells[J].The Journal of biological chemistry，2015，287（32）：26901-26910.

[20] Jasna Hrenovic，Jelena Milenkovic，Ivana Goic-Barisic，et al.Antibacterial activity of modified natural clinoptilolite against clinical isolates of Acinetobacter baumannii[J].Microporous and Mesoporous Materials：The offical Journal of the International Zeolite Association，2015，169（45）：148-152.

（收稿日期：2017-06-22）