頂空固相微萃取—氣相色譜/質(zhì)譜法測定川厚樸揮發(fā)性成分

夏新中

(長江大學醫(yī)學院，湖北 荊州 434023)

肖靜

(孝感市中心醫(yī)院病理科，湖北 孝感 432100)

夏庭君

(湖北生態(tài)工程職業(yè)技術學院，湖北 武昌 430065)

頂空固相微萃取—氣相色譜/質(zhì)譜法測定川厚樸揮發(fā)性成分

夏新中

(長江大學醫(yī)學院，湖北 荊州 434023)

肖靜

(孝感市中心醫(yī)院病理科，湖北 孝感 432100)

夏庭君

(湖北生態(tài)工程職業(yè)技術學院，湖北 武昌 430065)

目的：采用頂空固相微萃取-氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用技術分析測定川厚樸揮發(fā)性化學成分。方法：利用氣相色譜峰面積歸一法測定各組分的相對質(zhì)量分數(shù)。結(jié)果：從川厚樸生品和炮制品揮發(fā)性成分分離鑒定出39和47個色譜峰，分別占揮發(fā)油總峰面積的 97.399%和96.064%。結(jié)論：頂空固相微萃取和氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用法具有簡便、實用、快速、靈敏的優(yōu)點，可應用于厚樸揮發(fā)性成分的研究。

厚樸/姜厚樸；頂空固相微萃取；氣相色譜-質(zhì)譜；揮發(fā)性成分

厚樸為木蘭科植物厚樸MagnoliaofficinaisRehd.etWils.或凹葉厚樸M.officinalisRehd.etWils.var.bilobaRehd.etWils.干燥干皮、根皮和枝皮[1]。具有行氣燥濕,降逆平喘功效。傳統(tǒng)上稱產(chǎn)于四川、湖北、陜西西南部的厚樸藥材為“川樸”，質(zhì)量較好;其中湖北恩施產(chǎn)厚樸,又稱“紫油厚樸”,是地道名優(yōu)藥材,質(zhì)量最佳[2]。產(chǎn)于浙江、福建北部的為“溫樸”,質(zhì)量較次。有關厚樸揮發(fā)油的化學成分研究已有報道[2～7]，不同產(chǎn)地厚樸的化學成分有很大的區(qū)別。本實驗采用頂空固相微萃取(headspace solid-phasemicroextraction，HS-SPME ) 法提取川厚樸生品及其炮制品中的揮發(fā)油,采用毛細管氣相色譜-質(zhì)譜(Gas chromatography-mass spectrometry， GC/MS)聯(lián)用技術分離鑒定其化學成分,利用峰面積歸一化法測定各成分的質(zhì)量分數(shù)，為厚樸藥材的質(zhì)量評價和開發(fā)利用提供參考。

1 儀器與方法

1.1 儀器

HP6890/HP5975C GC/MS聯(lián)用儀(美國安捷倫公司)；固相微萃取裝置(美國Supelco公司) ，萃取纖維頭為:2cm-50/30μm DVB/CAR/PDMS StableFlex。

1.2 材料

厚樸和姜厚樸藥材購自湖北聚瑞中藥飲片有限公司(產(chǎn)地：四川)，厚樸批號141001；姜厚樸批號160201，厚樸經(jīng)鑒定為木蘭科植物厚樸M.officinaisRehd.etWils.的干燥樹皮;姜厚樸按照中國藥典2010年版一部方法加工炮制。

1.3 方法

1)頂空萃取 將厚樸用小型粉碎機粉碎，迅速稱取5g樣品裝入10mL固相微萃取儀采樣瓶中，插入裝有2cm～50/30μm DVB/CAR/PDMS StableFlex纖維頭的手動進樣器，在85℃左右頂空萃取30min取出，快速移出萃取頭并立即插入氣相色譜儀進樣口(溫度250℃)中，熱解析3min進樣，同時啟動工作站進行數(shù)據(jù)采集。

2)氣相色譜條件 色譜柱ZB-5MSI 5%Phenyl-95%DiMethylpolysiloxane (30cm×0.25mm×0.25μm)彈性石英毛細管柱，柱溫40℃(保留2min)，以4℃/min升溫至280℃，保持2min；汽化室溫度250℃；載氣為高純He(99.999%)；柱前壓7.62psi，載氣流量1.0mL/min；不分流進樣；溶劑延遲時間：1.5min。

3)質(zhì)譜條件 離子源為EI源；離子源溫度230℃；四極桿溫度150℃；電子能量70eV；發(fā)射電流34.6μA；倍增器電壓1425V；接口溫度280℃；質(zhì)量范圍20～450amu。

2 結(jié)果

圖1 厚樸揮發(fā)性成分離子圖 圖2 姜厚樸揮發(fā)性成分離子圖

采用頂空固相微萃取(SPME)和氣相色譜-質(zhì)譜(GC/MS)聯(lián)用法對厚樸生品與炮制品揮發(fā)性成分進行分析,氣相色譜分離得到離子峰分別為43個和51個，各成分離子圖如圖1和圖2所示。通過對總離子流圖中的各峰經(jīng)質(zhì)譜計算機數(shù)據(jù)系統(tǒng)檢索及核對Nist2008和Wiley275標準質(zhì)譜圖，分別確定了39種和47種化學成分，采用峰面積歸一化法測定了各化學成分的相對質(zhì)量分數(shù)，分析結(jié)果見表1。

表1 厚樸生品及炮制品中揮發(fā)成分分析結(jié)果

(續(xù)表1)

3 討論

實驗結(jié)果表明，從厚樸生品中共分離鑒定出39種成分,所鑒定的組分占總峰面積的97.399%,主要由單萜、倍半萜及其含氧衍生物組成，主要成分是α-桉葉油醇(23.143%)、β-桉葉油醇(21.724%)、γ-桉葉油醇(9.998%)、朱欒倍半萜(7.377%)、石竹烯氧化物(6.025%)、β-芹子烯(4.046%)、8,9-脫氫新異長葉烯(2.652%)、δ-杜松烯(2.616%)、蛇麻烯氧化物(2.031%)、β-石竹烯(1.938%)和茅術醇(1.832%)等。從厚樸炮制品中共分離鑒定出47種成分,所鑒定的組分占總峰面積的96.064 %,主要成分是β-桉葉油醇(29.27%)、α-桉葉油醇(18.451%)、γ-桉葉油醇(9.95%)、石竹烯氧化物(6.951%)、朱欒倍半萜(4.975%)、β-芹子烯(3.082%)、蛇麻烯氧化物(3.037%)、δ-杜松烯(2.299%)、茅術醇(1.762%)和8,9-脫氫新異長葉烯(1.673%)等。

從圖1和表1可以看出，厚樸炮制前后氣相色譜圖基本一致，揮發(fā)油的化學成分未發(fā)生明顯的變化,但在質(zhì)量分數(shù)上有所差別。炮制前后共有成分39種，炮制后新增成分9種和消失1種。

川厚樸揮發(fā)油成分主要是倍半萜類化合物，萜類化合物具有多種生物活性。龍腦具有發(fā)汗、鎮(zhèn)痙作用；石竹烯具有平喘作用；乙酸龍腦酯具有祛痰作用；α 、β-桉油醇具有鎮(zhèn)靜作用[8]。由此可以推斷厚樸中揮發(fā)性成分是行氣燥濕、降逆平喘功效成分，本實驗為厚樸藥材的質(zhì)量評價以及藥材的綜合開發(fā)利用提供物質(zhì)基礎。

[1]國家藥典委員會.中國藥典[S]，一部. 北京: 化學工業(yè)出版社，2010：176.

[2]楊紅兵,石磊, 詹亞華.湖北恩施州產(chǎn)厚樸的揮發(fā)油分析[J].中國中藥雜志,2007,32(1):42～ 44.

[3]李玲玲.厚樸揮發(fā)油化學成分研究[J].中草藥,2001,32(8):686～687.

[4]林茵，王麟，張靜，等．厚樸炮制前后揮發(fā)油化學成分的GC-MS分析[J].中草藥，2010,41(8):1261～1264.

[5]方小平，盧永書，吳瓊，等. 貴州省不同地區(qū)的凹葉厚樸揮發(fā)油成分GC-MS分析[J].中國實驗方劑學雜志,2012,18(17):142～145.

[6]曾紅，鄧先清，黃玉珊.井岡山產(chǎn)凹葉厚樸揮發(fā)油中化學成分分析[J].中草藥,2015,46(24):3649～3654.

[7]何小珍，蔣軍輝，徐小娜，等．GC-MS聯(lián)用技術分析厚樸揮發(fā)油化學成分[J]．應用化工，2012,41(2):352～357.

[8]《中藥鑒定學》編委會.中藥鑒定學[M].北京:中國中醫(yī)藥出版社.2003:264.

2017-09-29

湖北省衛(wèi)計委醫(yī)藥院校專項項目(WJ2016-Y-03)。

夏新中(1959-)，男，教授，主任藥師，主要研究天然產(chǎn)物的化學成分及其質(zhì)量分析；通信作者：夏庭君，414820335@qq.com。

[引著格式]夏新中，肖靜，夏庭君. 頂空固相微萃取—氣相色譜/質(zhì)譜法測定川厚樸揮發(fā)性成分[J].長江大學學報(自科版), 2017,14(20):5～7.

R914.1；R284

A

1673-1409(2017)20-0005-03

[編輯] 一凡